| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-15页 |
| 文献综述 | 第15-25页 |
| 1 核移植 | 第15-16页 |
| ·DNA 甲基化 | 第15-16页 |
| ·组蛋白乙酰化 | 第16页 |
| 2 细胞融合 | 第16-17页 |
| 3 提取物诱导 | 第17页 |
| 4 限定因子诱导 | 第17-25页 |
| ·iPS 细胞的限定因子 | 第19-21页 |
| ·iPS 细胞的几种限定因子 | 第19-20页 |
| ·iPS 细胞限定因子的表达调控 | 第20-21页 |
| ·iPS 细胞的筛选 | 第21-22页 |
| ·iPS 细胞的鉴定 | 第22页 |
| ·iPS 细胞在畜牧业生产中的应用前景 | 第22-24页 |
| ·在遗传育种方面 | 第23页 |
| ·在生产转基因动物方面 | 第23页 |
| ·性别控制 | 第23-24页 |
| ·iPS 细胞存在的问题及展望 | 第24-25页 |
| 引言 | 第25-27页 |
| 1 试验材料 | 第27-30页 |
| ·试验动物 | 第27页 |
| ·主要实验仪器设备 | 第27页 |
| ·药品试剂 | 第27-28页 |
| ·菌株和载体 | 第28页 |
| ·常规溶液及试剂配制 | 第28-30页 |
| 2 试验方法 | 第30-41页 |
| ·目的基因的获取 | 第30-33页 |
| ·从胎猪生殖嵴部位提取RNA | 第30页 |
| ·以RNA 为模板合成第一链cDNA | 第30-31页 |
| ·以cDNA 为模板扩增相应基因 | 第31-32页 |
| ·1%琼脂糖凝胶电泳 | 第32-33页 |
| ·DNA 片断回收 | 第33页 |
| ·T4 连接酶连接基因与载体 | 第33-35页 |
| ·T4 连接酶连接基因与pUCm-T 载体 | 第33-34页 |
| ·转化 | 第34页 |
| ·挑菌及摇菌 | 第34页 |
| ·菌体PCR 鉴定 | 第34-35页 |
| ·克隆菌液序列测定 | 第35页 |
| ·连接序列正确的基因到pLEGFP-N1 载体 | 第35-38页 |
| ·限制性内切酶酶切 | 第35-36页 |
| ·T4 连接酶连接目的基因与pLEGFP-N1 载体 | 第36页 |
| ·转化、挑菌、摇菌、PCR 菌体鉴定 | 第36-38页 |
| ·逆转录病毒载体目的基因扩增 | 第38页 |
| ·pLentiLox3.7 慢病毒载体质粒酶切 | 第38页 |
| ·连接 | 第38-39页 |
| ·酶切 | 第39页 |
| ·重组慢病毒载体PLL-Sox2 和PLL-Nanog 的构建 | 第39页 |
| ·重组质粒PLL-Sox2 和PLL-Nanog 转染293 细胞 | 第39-41页 |
| ·293 细胞培养 | 第39-40页 |
| ·质粒转染 293 细胞 | 第40-41页 |
| 3 结果与分析 | 第41-49页 |
| ·Sox2 和Nanog 基因的琼脂糖电泳 | 第41页 |
| ·PCR 鉴定(与T 载体相连) | 第41-42页 |
| ·Sox2 和Nanog 基因的测序结果及分析 | 第42-45页 |
| ·Sox2 和Nanog 基因的测序结果 | 第42-44页 |
| ·Sox2 和Nanog 基因的测序结果及分析 | 第44-45页 |
| ·PCR 鉴定（与pLEGFP-N1 载体相连） | 第45-46页 |
| ·pLEGFP-Sox2 和pLEGFP-Nanog 酶切鉴定 | 第46页 |
| ·pLEntilox3.7 慢病毒载体质粒酶切 | 第46-47页 |
| ·酶切 | 第47页 |
| ·PLL-Sox2 和PLL-Nanog PCR 鉴定结果 | 第47-48页 |
| ·重组质粒PLL-Sox2 和PLL-Nanog 转染293 细胞 | 第48-49页 |
| 4 讨论 | 第49-54页 |
| ·基因概况 | 第49-50页 |
| ·Sox2 基因 | 第49页 |
| ·Nanog 基因 | 第49-50页 |
| ·生殖嵴与多能性基因表达 | 第50-51页 |
| ·慢病毒载体 | 第51-52页 |
| ·慢病毒及载体 | 第51页 |
| ·病毒载体的类型 | 第51-52页 |
| ·慢病毒载体的改造 | 第52页 |
| ·质粒转染293 细胞 | 第52-54页 |
| 5 结论 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-63页 |
| 致谢 | 第63-65页 |
| 个人简介 | 第65页 |
