| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-15页 |
| 第一章 引言 | 第15-24页 |
| ·猪繁殖与呼吸综合症病毒分子病原学研究进展 | 第15-17页 |
| ·概述 | 第15-16页 |
| ·PRRSV 抗原分型和基因分型的主要依据--N 蛋白 | 第16页 |
| ·PRRSV 的高变异性 | 第16-17页 |
| ·PRRSV 与猪肺泡巨噬细胞相互作用关系概述 | 第17-19页 |
| ·PRRSV 感染 PAM 的机制 | 第17-18页 |
| ·PRRSV 感染对 PAM 免疫功能的影响 | 第18-19页 |
| ·PRRSV 感染对 PAM 分泌细胞因子的影响 | 第19-23页 |
| ·对促炎细胞因子表达的影响 | 第19-20页 |
| ·对先天免疫细胞因子表达的影响 | 第20页 |
| ·对 Th1 型细胞因子表达的影响 | 第20-21页 |
| ·对 Th2 型细胞因子表达的影响 | 第21-22页 |
| ·对抑制性细胞因子表达的影响 | 第22页 |
| ·对调节性细胞因子表达的影响 | 第22-23页 |
| ·研究目的与意义 | 第23页 |
| ·研究目标与研究内容 | 第23页 |
| ·技术路线 | 第23-24页 |
| 第二章 猪繁殖与呼吸综合征病毒变异株的筛选及动物实验 | 第24-37页 |
| ·材料与方法 | 第24-28页 |
| ·毒株与细胞株 | 第24页 |
| ·实验动物 | 第24页 |
| ·生化试剂与试剂盒 | 第24页 |
| ·主要仪器设备 | 第24-25页 |
| ·引物设计与合成 | 第25页 |
| ·病毒的培养与核酸鉴定 | 第25-26页 |
| ·病毒的扩培与 TCID_(50)的测定 | 第26-27页 |
| ·间接免疫荧光抗体鉴定 | 第27页 |
| ·动物致病性研究 | 第27页 |
| ·动物实验 | 第27-28页 |
| ·PAM 的制备 | 第28页 |
| ·结果 | 第28-35页 |
| ·变异毒株的筛选 | 第28-31页 |
| ·变异 PRRSV 毒株的扩培与 TCID_(50) 的测定 | 第31页 |
| ·间接免疫荧光抗体鉴定 | 第31页 |
| ·动物致病性研究 | 第31-32页 |
| ·动物实验 | 第32-35页 |
| ·讨论 | 第35-37页 |
| ·攻毒方式与攻毒剂量的确定 | 第35-36页 |
| ·变异毒株感染猪病理变化 | 第36-37页 |
| 第三章 PRRSV 和猪细胞因子荧光定量 PCR 标准曲线的建立 | 第37-55页 |
| ·材料与方法 | 第37-42页 |
| ·生化试剂与试剂盒 | 第37页 |
| ·仪器设备 | 第37-38页 |
| ·PRRSV 病毒 RNA 和 PAMs 总 RNA 的提取 | 第38页 |
| ·引物的设计及基因的扩增 | 第38-40页 |
| ·重组质粒的克隆 | 第40-41页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第41-42页 |
| ·荧光定量 PCR 标准曲线的建立 | 第42页 |
| ·结果 | 第42-53页 |
| ·重组质粒的 PCR 鉴定、测序鉴定 | 第42-45页 |
| ·标准曲线的建立 | 第45-53页 |
| ·扩增效率的计算 | 第53页 |
| ·讨论 | 第53-55页 |
| ·实验条件的优化 | 第53-54页 |
| ·看家基因 | 第54-55页 |
| 第四章 PRRSV 变异株与弱毒株感染对PAM 中各类细胞因子MRNA 转录水平的影响 | 第55-72页 |
| ·材料与方法 | 第55-58页 |
| ·毒株 | 第55页 |
| ·实验动物 | 第55页 |
| ·生化试剂与试剂盒 | 第55-56页 |
| ·主要仪器设备 | 第56页 |
| ·猪肺泡巨噬细胞(PAM)与病料组织的总 RNA 的提取 | 第56-57页 |
| ·猪肺泡巨噬细胞(PAM)与病料组织总 RNA 的反转录反应 | 第57页 |
| ·荧光定量 PCR | 第57页 |
| ·数据分析 | 第57-58页 |
| ·结果 | 第58-67页 |
| ·PRRSV 变异株 FZ06A 与弱毒株 VA 感染猪 PAM 促炎细胞因子mRNA 表达比较 | 第58-59页 |
| ·PRRSV 变异株 FZ06A 与弱毒株 VA 感染猪 PAM 先天性细胞因子mRNA 表达比较 | 第59-61页 |
| ·PRRSV 变异株 FZ06A 与弱毒株 VA 感染猪 PAM Th1 型细胞因子mRNA 表达比较 | 第61-63页 |
| ·PRRSV 变异株 FZ06A 与弱毒株 VA 感染猪 PAM Th2 型细胞因子mRNA 表达比较 | 第63-64页 |
| ·PRRSV 变异株 FZ06A 与弱毒株 VA 感染猪 PAM 调节性细胞因子mRNA 表达比较 | 第64-65页 |
| ·PRRSV 变异株 FZ06A 与弱毒株 VA 感染猪 PAM 抑制性细胞因子mRNA 表达比较 | 第65-66页 |
| ·PRRSV 变异株 FZ06A 与弱毒株 VA 感染猪各器官病毒载量比较 | 第66-67页 |
| ·讨论 | 第67-72页 |
| ·PRRSV 变异株 FZ06A 比弱毒株 VA 对 PAM 促炎因子mRNA 的表达有更强的抑制作用 | 第67-68页 |
| ·PRRSV变异株FZ06A比弱毒株VA对PAM 先天性细胞因子mRNA的表达有更强的抑制作用 | 第68页 |
| ·PRRSV 变异株FZ06A 比弱毒株VA 对PAM Th1 型因子mRNA 的表达有更强的抑制作用 | 第68-69页 |
| ·PRRSV 变异株FZ06A 比弱毒株VA 对PAM Th2 型因子mRNA 的表达有更强的抑制作用 | 第69-70页 |
| ·PRRSV 变异株 FZ06A 比弱毒株 VA 对 PAM 调节性细胞因子mRNA 的表达有更强的抑制作用 | 第70页 |
| ·PRRSV 变异株 FZ06A 比弱毒株 VA 对 PAM 抑制性细胞因子mRNA 的表达有更强的抑制作用 | 第70-72页 |
| 第五章 全文结论 | 第72-73页 |
| 参考文献 | 第73-83页 |
| 致谢 | 第83-84页 |
| 作者简历 | 第84页 |