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PRRSV变异株感染对PAM细胞因子转录水平的影响

摘要第1-8页
Abstract第8-15页
第一章 引言第15-24页
   ·猪繁殖与呼吸综合症病毒分子病原学研究进展第15-17页
     ·概述第15-16页
     ·PRRSV 抗原分型和基因分型的主要依据--N 蛋白第16页
     ·PRRSV 的高变异性第16-17页
   ·PRRSV 与猪肺泡巨噬细胞相互作用关系概述第17-19页
     ·PRRSV 感染 PAM 的机制第17-18页
     ·PRRSV 感染对 PAM 免疫功能的影响第18-19页
   ·PRRSV 感染对 PAM 分泌细胞因子的影响第19-23页
     ·对促炎细胞因子表达的影响第19-20页
     ·对先天免疫细胞因子表达的影响第20页
     ·对 Th1 型细胞因子表达的影响第20-21页
     ·对 Th2 型细胞因子表达的影响第21-22页
     ·对抑制性细胞因子表达的影响第22页
     ·对调节性细胞因子表达的影响第22-23页
   ·研究目的与意义第23页
   ·研究目标与研究内容第23页
   ·技术路线第23-24页
第二章 猪繁殖与呼吸综合征病毒变异株的筛选及动物实验第24-37页
   ·材料与方法第24-28页
     ·毒株与细胞株第24页
     ·实验动物第24页
     ·生化试剂与试剂盒第24页
     ·主要仪器设备第24-25页
     ·引物设计与合成第25页
     ·病毒的培养与核酸鉴定第25-26页
     ·病毒的扩培与 TCID_(50)的测定第26-27页
     ·间接免疫荧光抗体鉴定第27页
     ·动物致病性研究第27页
     ·动物实验第27-28页
     ·PAM 的制备第28页
   ·结果第28-35页
     ·变异毒株的筛选第28-31页
     ·变异 PRRSV 毒株的扩培与 TCID_(50) 的测定第31页
     ·间接免疫荧光抗体鉴定第31页
     ·动物致病性研究第31-32页
     ·动物实验第32-35页
   ·讨论第35-37页
     ·攻毒方式与攻毒剂量的确定第35-36页
     ·变异毒株感染猪病理变化第36-37页
第三章 PRRSV 和猪细胞因子荧光定量 PCR 标准曲线的建立第37-55页
   ·材料与方法第37-42页
     ·生化试剂与试剂盒第37页
     ·仪器设备第37-38页
     ·PRRSV 病毒 RNA 和 PAMs 总 RNA 的提取第38页
     ·引物的设计及基因的扩增第38-40页
     ·重组质粒的克隆第40-41页
     ·重组质粒的鉴定第41-42页
     ·荧光定量 PCR 标准曲线的建立第42页
   ·结果第42-53页
     ·重组质粒的 PCR 鉴定、测序鉴定第42-45页
     ·标准曲线的建立第45-53页
     ·扩增效率的计算第53页
   ·讨论第53-55页
     ·实验条件的优化第53-54页
     ·看家基因第54-55页
第四章 PRRSV 变异株与弱毒株感染对PAM 中各类细胞因子MRNA 转录水平的影响第55-72页
   ·材料与方法第55-58页
     ·毒株第55页
     ·实验动物第55页
     ·生化试剂与试剂盒第55-56页
     ·主要仪器设备第56页
     ·猪肺泡巨噬细胞(PAM)与病料组织的总 RNA 的提取第56-57页
     ·猪肺泡巨噬细胞(PAM)与病料组织总 RNA 的反转录反应第57页
     ·荧光定量 PCR第57页
     ·数据分析第57-58页
   ·结果第58-67页
     ·PRRSV 变异株 FZ06A 与弱毒株 VA 感染猪 PAM 促炎细胞因子mRNA 表达比较第58-59页
     ·PRRSV 变异株 FZ06A 与弱毒株 VA 感染猪 PAM 先天性细胞因子mRNA 表达比较第59-61页
     ·PRRSV 变异株 FZ06A 与弱毒株 VA 感染猪 PAM Th1 型细胞因子mRNA 表达比较第61-63页
     ·PRRSV 变异株 FZ06A 与弱毒株 VA 感染猪 PAM Th2 型细胞因子mRNA 表达比较第63-64页
     ·PRRSV 变异株 FZ06A 与弱毒株 VA 感染猪 PAM 调节性细胞因子mRNA 表达比较第64-65页
     ·PRRSV 变异株 FZ06A 与弱毒株 VA 感染猪 PAM 抑制性细胞因子mRNA 表达比较第65-66页
     ·PRRSV 变异株 FZ06A 与弱毒株 VA 感染猪各器官病毒载量比较第66-67页
   ·讨论第67-72页
     ·PRRSV 变异株 FZ06A 比弱毒株 VA 对 PAM 促炎因子mRNA 的表达有更强的抑制作用第67-68页
     ·PRRSV变异株FZ06A比弱毒株VA对PAM 先天性细胞因子mRNA的表达有更强的抑制作用第68页
     ·PRRSV 变异株FZ06A 比弱毒株VA 对PAM Th1 型因子mRNA 的表达有更强的抑制作用第68-69页
     ·PRRSV 变异株FZ06A 比弱毒株VA 对PAM Th2 型因子mRNA 的表达有更强的抑制作用第69-70页
     ·PRRSV 变异株 FZ06A 比弱毒株 VA 对 PAM 调节性细胞因子mRNA 的表达有更强的抑制作用第70页
     ·PRRSV 变异株 FZ06A 比弱毒株 VA 对 PAM 抑制性细胞因子mRNA 的表达有更强的抑制作用第70-72页
第五章 全文结论第72-73页
参考文献第73-83页
致谢第83-84页
作者简历第84页

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