提要 | 第1-9页 |
英文缩写词 | 第9-10页 |
前言 | 第10-13页 |
第一篇 文献综述 | 第13-27页 |
第一章 Rho 亚家族蛋白在恶性肿瘤发生发展中的作用 | 第13-18页 |
第二章 RNAi 技术及其在卵巢癌基因治疗中的作用 | 第18-27页 |
第二篇 实验研究 | 第27-66页 |
第一章 RhoC-miRNA 真核表达载体的构建、鉴定及对 RhoC 基因表达的干扰作用的研究 | 第27-47页 |
·材料与方法 | 第27-37页 |
·材料 | 第27-29页 |
·方法 | 第29-37页 |
·RhoC-miRNA 重组质粒的构建 | 第29页 |
·RhoC 发卡miRNA 模板寡核苷酸退火 | 第29-30页 |
·载体与目的片断的连接 | 第30页 |
·扩增重组质粒并进行PCR 鉴定及测序 | 第30-32页 |
·重组质粒纯化 | 第32-33页 |
·细胞培养 | 第33页 |
·用脂质体法转染发卡miRNA 表达载体 | 第33-37页 |
·结果 | 第37-45页 |
·pcDNA~(TM)6.2-GW/Em GFP-miR 载体图 | 第37页 |
·单链DNA oligo 退火形成双链电泳结果 | 第37-38页 |
·重组质粒电泳结果 | 第38-39页 |
·重组质粒PCR 鉴定电泳结果 | 第39页 |
·重组质粒测序结果 | 第39-40页 |
·重组质粒质量与纯度测定结果 | 第40-41页 |
·间接免疫荧光检测重组质粒 pcDNA~(TM)6.2-GW/EmGFP- RhoC-miRNA 在SKOV_3 细胞表达结果 | 第41页 |
·激光共聚焦检测重组质粒转染的卵巢癌细胞的形态学变化(Fig.1.10,1.11 ,1.12) | 第41-42页 |
·RhoC 的mRNA 在稳定转染细胞中表达的RT-PCR 检测结果 | 第42-43页 |
·Western-blot 法检测细胞内RhoC 蛋白的表达结果 | 第43-45页 |
·讨论 | 第45-47页 |
第二章 miRNA 抑制基因RhoC 对卵巢癌细胞生物学功能影响的研究 | 第47-57页 |
·材料与方法 | 第47-50页 |
·材料 | 第47-48页 |
·方法 | 第48-50页 |
·统计学处理 | 第50页 |
·结果 | 第50-57页 |
·RhoC-miRNA 基因对SKOV_3 细胞增殖能力的影响 | 第50-51页 |
·划痕法检测细胞趋向运动能力 | 第51-52页 |
·细胞穿越Matrigel 基质实验检测细胞侵袭能力结果 | 第52-57页 |
第三章 靶向RhoC 基因RNA 干扰技术联合紫杉醇对上皮性卵巢癌细胞SKOV_3凋亡的影响 | 第57-66页 |
·材料与方法 | 第57-59页 |
·材料 | 第57-58页 |
·方法 | 第58-59页 |
·统计学处理 | 第59页 |
·结果 | 第59-63页 |
·RhoC-miRNA 转染的卵巢癌SKOV_3 细胞对紫杉醇化疗敏感性的影响 | 第59-61页 |
·流式细胞仪检测基因转染联合紫杉醇处理后细胞凋亡率 | 第61-62页 |
·RT-PCR 法检测SKOV_3 细胞中的凋亡基因Caspase-3、Survivin mRNA 的表达 | 第62-63页 |
·讨论 | 第63-66页 |
结论 | 第66-67页 |
参考文献 | 第67-81页 |
附图 | 第81-89页 |
攻读学位期间发表的学术论文和科研成果 | 第89-91页 |
致谢 | 第91-92页 |
中文摘要 | 第92-95页 |
Abstract | 第95-97页 |