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RNA干扰Ku70基因对宫颈癌Hela细胞放射敏感性影响的实验研究

提要第1-11页
英文缩写第11-13页
第1章 绪论第13-49页
   ·Ku70 的来源第15-16页
   ·Ku70 的结构第16-18页
   ·Ku70 蛋白的功能第18-25页
     ·Ku 蛋白在DNA 损伤修复中的作用第18-21页
     ·Ku70 参与DNA 复制调控第21页
     ·Ku70 参与免疫球蛋白和T 细胞表面抗原受体V(D)J 重组第21-22页
     ·Ku70 作为转录因子调节某些基因的表达第22-23页
     ·Ku70 与RecQ 家族某些成员相互作用而参与核酸代谢过程第23页
     ·Ku70 在维持染色体端粒结构中的作用第23-24页
     ·Ku70 可能参与某些细胞的信号转导通路第24-25页
   ·Ku 蛋白其它生物学功能第25-26页
   ·Ku 蛋白与端粒第26-27页
   ·Ku 蛋白与细胞凋亡第27-28页
   ·Ku 蛋白与肿瘤第28-32页
     ·Ku 基因表达与肿瘤相关研究第28-30页
     ·Ku 蛋白变异体与肿瘤相关研究第30页
     ·Ku 蛋白与肿瘤治疗敏感性关系的研究第30-32页
   ·RNAi 技术及其应用第32-49页
     ·RNAi 的发现和发展第32-33页
     ·RNAi 的作用机制第33-34页
     ·RNAi 的重要特征第34-35页
     ·RNA 干扰载体及导入方法研究第35-37页
     ·RNAi 的作用原理第37-39页
     ·RNAi 在哺乳动物细胞中的应用第39-40页
     ·RNAi 在基因功能研究中的应用第40-44页
     ·RNAi 在疾病治疗中的应用第44-49页
第2章 γ射线照射对Ku70 在HELA 细胞中表达的影响第49-69页
   ·实验材料第49-51页
     ·主要试剂第49页
     ·主要仪器设备第49-50页
     ·细胞株第50页
     ·Ku70 基因的实时荧光定量 PCR 引物第50-51页
   ·实验方法第51-59页
     ·细胞培养第51页
     ·实时荧光定量 PCR 引物扩增效果的检测第51-53页
     ·Hela 细胞对γ射线的敏感性检测第53-54页
     ·Ku70 在Hela 细胞受到不同剂量γ射线照射后表达水平的检测第54-59页
     ·Ku70 在Hela 细胞受4.0Gy γ射线照射后不同时间表达水平的检测第59页
   ·实验结果第59-68页
     ·总RNA 的提取第59-60页
     ·实时荧光定量 PCR 引物扩增效果的分析第60页
     ·Hela 细胞对不同剂量γ射线照射的辐射效应第60-61页
     ·Ku70 在Hela 细胞受不同剂量γ射线照射后表达水平的变化第61-65页
     ·Ku70 在Hela 细胞受4.0Gy γ射线照射后不同时间表达水平的变化第65-68页
   ·小结第68-69页
第3章 Ku70 基因RNA 干扰载体的构建及干扰效果测定第69-87页
   ·实验材料第69-71页
     ·主要试剂第69页
     ·主要仪器设备第69-70页
     ·shRNA 表达载体第70-71页
   ·针对Ku70 基因SIRNA 的设计及合成第71-76页
     ·Ku70 基因的可选择性剪切分析第71-72页
     ·Ku70 基因的局部高级结构分析第72-73页
     ·Ku70 基因的siRNA 设计第73-76页
   ·实验方法第76-82页
     ·细胞培养第76页
     ·siRNA 转染Hela 细胞第76页
     ·shRNA 表达载体的构建第76-82页
   ·实验结果第82-85页
     ·siRNA 抑制Hela 细胞Ku70 表达第82页
     ·重组pSilencer-4.1-Ku70 质粒的PCR 验证第82-83页
     ·重组pSilencer-4.1-Ku70 质粒的测序结果第83页
     ·潮霉素B 对Hela 细胞的杀死曲线(killing curve)第83-84页
     ·pSilencer-4.1-Ku70 质粒转染Hela 细胞后Ku70 表达量分析第84-85页
   ·小结第85-87页
第4章 RNA 干扰Ku 70 基因对HELA 细胞放射敏感性的影响第87-93页
   ·实验材料第87-88页
     ·主要试剂第87页
     ·主要仪器设备第87-88页
   ·实验方法第88-89页
     ·细胞培养第88页
     ·稳定转染干扰质粒后Hela 细胞对γ射线的敏感性检测第88-89页
   ·实验结果第89-91页
     ·RNA 干扰Ku70 基因后Hela 细胞放射敏感性的变化第89-91页
   ·小结第91-93页
第5章 讨论第93-97页
第6章 结论第97-98页
参考文献第98-109页
攻博期间发表的学术论文及其他成果第109-110页
个人简历第110-111页
致谢第111-112页
中文摘要第112-115页
ABSTRACT第115-117页

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