提要 | 第1-11页 |
英文缩写 | 第11-13页 |
第1章 绪论 | 第13-49页 |
·Ku70 的来源 | 第15-16页 |
·Ku70 的结构 | 第16-18页 |
·Ku70 蛋白的功能 | 第18-25页 |
·Ku 蛋白在DNA 损伤修复中的作用 | 第18-21页 |
·Ku70 参与DNA 复制调控 | 第21页 |
·Ku70 参与免疫球蛋白和T 细胞表面抗原受体V(D)J 重组 | 第21-22页 |
·Ku70 作为转录因子调节某些基因的表达 | 第22-23页 |
·Ku70 与RecQ 家族某些成员相互作用而参与核酸代谢过程 | 第23页 |
·Ku70 在维持染色体端粒结构中的作用 | 第23-24页 |
·Ku70 可能参与某些细胞的信号转导通路 | 第24-25页 |
·Ku 蛋白其它生物学功能 | 第25-26页 |
·Ku 蛋白与端粒 | 第26-27页 |
·Ku 蛋白与细胞凋亡 | 第27-28页 |
·Ku 蛋白与肿瘤 | 第28-32页 |
·Ku 基因表达与肿瘤相关研究 | 第28-30页 |
·Ku 蛋白变异体与肿瘤相关研究 | 第30页 |
·Ku 蛋白与肿瘤治疗敏感性关系的研究 | 第30-32页 |
·RNAi 技术及其应用 | 第32-49页 |
·RNAi 的发现和发展 | 第32-33页 |
·RNAi 的作用机制 | 第33-34页 |
·RNAi 的重要特征 | 第34-35页 |
·RNA 干扰载体及导入方法研究 | 第35-37页 |
·RNAi 的作用原理 | 第37-39页 |
·RNAi 在哺乳动物细胞中的应用 | 第39-40页 |
·RNAi 在基因功能研究中的应用 | 第40-44页 |
·RNAi 在疾病治疗中的应用 | 第44-49页 |
第2章 γ射线照射对Ku70 在HELA 细胞中表达的影响 | 第49-69页 |
·实验材料 | 第49-51页 |
·主要试剂 | 第49页 |
·主要仪器设备 | 第49-50页 |
·细胞株 | 第50页 |
·Ku70 基因的实时荧光定量 PCR 引物 | 第50-51页 |
·实验方法 | 第51-59页 |
·细胞培养 | 第51页 |
·实时荧光定量 PCR 引物扩增效果的检测 | 第51-53页 |
·Hela 细胞对γ射线的敏感性检测 | 第53-54页 |
·Ku70 在Hela 细胞受到不同剂量γ射线照射后表达水平的检测 | 第54-59页 |
·Ku70 在Hela 细胞受4.0Gy γ射线照射后不同时间表达水平的检测 | 第59页 |
·实验结果 | 第59-68页 |
·总RNA 的提取 | 第59-60页 |
·实时荧光定量 PCR 引物扩增效果的分析 | 第60页 |
·Hela 细胞对不同剂量γ射线照射的辐射效应 | 第60-61页 |
·Ku70 在Hela 细胞受不同剂量γ射线照射后表达水平的变化 | 第61-65页 |
·Ku70 在Hela 细胞受4.0Gy γ射线照射后不同时间表达水平的变化 | 第65-68页 |
·小结 | 第68-69页 |
第3章 Ku70 基因RNA 干扰载体的构建及干扰效果测定 | 第69-87页 |
·实验材料 | 第69-71页 |
·主要试剂 | 第69页 |
·主要仪器设备 | 第69-70页 |
·shRNA 表达载体 | 第70-71页 |
·针对Ku70 基因SIRNA 的设计及合成 | 第71-76页 |
·Ku70 基因的可选择性剪切分析 | 第71-72页 |
·Ku70 基因的局部高级结构分析 | 第72-73页 |
·Ku70 基因的siRNA 设计 | 第73-76页 |
·实验方法 | 第76-82页 |
·细胞培养 | 第76页 |
·siRNA 转染Hela 细胞 | 第76页 |
·shRNA 表达载体的构建 | 第76-82页 |
·实验结果 | 第82-85页 |
·siRNA 抑制Hela 细胞Ku70 表达 | 第82页 |
·重组pSilencer-4.1-Ku70 质粒的PCR 验证 | 第82-83页 |
·重组pSilencer-4.1-Ku70 质粒的测序结果 | 第83页 |
·潮霉素B 对Hela 细胞的杀死曲线(killing curve) | 第83-84页 |
·pSilencer-4.1-Ku70 质粒转染Hela 细胞后Ku70 表达量分析 | 第84-85页 |
·小结 | 第85-87页 |
第4章 RNA 干扰Ku 70 基因对HELA 细胞放射敏感性的影响 | 第87-93页 |
·实验材料 | 第87-88页 |
·主要试剂 | 第87页 |
·主要仪器设备 | 第87-88页 |
·实验方法 | 第88-89页 |
·细胞培养 | 第88页 |
·稳定转染干扰质粒后Hela 细胞对γ射线的敏感性检测 | 第88-89页 |
·实验结果 | 第89-91页 |
·RNA 干扰Ku70 基因后Hela 细胞放射敏感性的变化 | 第89-91页 |
·小结 | 第91-93页 |
第5章 讨论 | 第93-97页 |
第6章 结论 | 第97-98页 |
参考文献 | 第98-109页 |
攻博期间发表的学术论文及其他成果 | 第109-110页 |
个人简历 | 第110-111页 |
致谢 | 第111-112页 |
中文摘要 | 第112-115页 |
ABSTRACT | 第115-117页 |