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一株鞘氨醇杆菌代谢咔唑的分子机制研究

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-14页
第一章 前言第14-26页
   ·鞘氨醇单胞菌的系统分类第14-16页
   ·鞘氨醇单胞菌代谢多样性第16页
     ·微生物多糖第16页
     ·降解环境污染物第16页
   ·鞘氨醇单胞菌降解基因的组织形式第16-17页
   ·代谢质粒、质粒穿梭及插入序列的多样性第17-19页
   ·咔唑的微生物降解第19-25页
     ·上游途径第19-21页
     ·下游途径第21-22页
     ·咔唑降解基因簇第22-24页
     ·咔唑降解基因的调控第24-25页
   ·本课题的研究意义第25-26页
第二章 一株咔唑降解菌XLDN2-5 的分类鉴定第26-32页
   ·材料与方法第26-27页
     ·主要仪器和试剂第26-27页
     ·菌株鉴定第27页
   ·结果与讨论第27-31页
     ·表型分析第27-28页
     ·脂肪酸分析第28-29页
     ·生理生化分析第29-30页
     ·进化树构建第30-31页
   ·本章小结第31-32页
第三章 鞘氨醇杆菌XLDN2-5 代谢咔唑及苯并噻吩类化合物产物及途径分析第32-48页
   ·材料与方法第32-35页
     ·主要仪器和试剂第32-33页
     ·XLDN2-5 代谢咔唑和苯并噻吩类化合物产物分析第33-34页
     ·分析方法第34-35页
   ·结果与讨论第35-46页
     ·咔唑降解产物分析第35-37页
     ·苯并噻吩类化合物产物分析第37-46页
   ·本章小结第46-48页
第四章 咔唑降解基因的克隆及功能验证第48-72页
   ·材料与方法第48-56页
     ·主要仪器和试剂第48-53页
     ·XLDN2-5 基因组文库构建第53页
     ·DIG 探针标记第53页
     ·菌落杂交第53-54页
     ·杂交第54-55页
     ·染色体步移第55页
     ·基于IS6100 的PCR第55页
     ·RT-PCR第55-56页
   ·结果与讨论第56-68页
     ·菌落杂交结果第56页
     ·染色体步移第56-57页
     ·基于插入序列的PCR第57-59页
     ·car 和ant 基因簇以及fdr 基因位置关系的确定第59-60页
     ·咔唑的上游降解基因簇分散在插入序列组成的复合转座子上第60-65页
     ·car 和ant 基因簇的RT-PCR 转录数据分析第65页
     ·验证含有XLDN2-5 咔唑双加氧酶和邻氨基苯甲酸序列的转化子活性第65-66页
     ·产物鉴定第66-67页
     ·XLDN2-5 与已报道的car 和ant 基因簇的对比第67-68页
   ·本章小结第68-72页
第五章 新的邻苯二酚降解基因簇的克隆及分析第72-96页
   ·材料与方法第74-79页
     ·菌株和质粒第74页
     ·基因组文库构建和筛选第74页
     ·生物信息学分析第74-79页
     ·RT-PCR第79页
     ·启动子预测第79页
   ·结果与讨论第79-93页
     ·基因组文库的筛选和序列分析第79-83页
     ·RT-PCR第83页
     ·carD 和carE 基因的功能分析第83-85页
     ·CarF, CarL, CarC: 三个催化底物或功能相近的蛋白第85-87页
     ·基因carG 和carH:重复基因的一个例子第87-90页
     ·CarJ 和CarK 蛋白的共表达第90-91页
     ·CarM:一个新的醛缩酶第91-92页
     ·CarY 和CarX:两个假定的信号蛋白第92-93页
     ·新的邻苯二酚间位裂解途径基因组织形式第93页
   ·本章小结第93-96页
第六章 咔唑降解基因的稳定性分析及有角度双加氧酶电子传递链的可替代性研究第96-106页
   ·材料与方法第96-99页
     ·咔唑降解突变株的获得及咔唑降解基因丢失情况考察第96页
     ·分子克隆第96页
     ·重组PCR第96-99页
   ·结果与讨论第99-105页
     ·咔唑降解突变株的筛选及检测第99-100页
     ·重组PCR第100-105页
   ·本章小结第105-106页
第七章 鞘氨醇杆菌XLDN2-5 的全基因组测序及组学分析第106-132页
   ·材料与方法第106-109页
     ·测序方法第106页
     ·基因组拼接第106-107页
     ·蛋白质组分析第107-108页
     ·蛋白组聚类分析第108-109页
   ·结果与讨论第109-130页
     ·454 拼接结果第109页
     ·覆盖倍数的确定第109-110页
     ·插入片段长度的确定第110-111页
     ·菌株XLDN2-5 与四株已经测序的鞘氨醇单胞菌的比对分析第111-112页
     ·菌株XLDN2-5 基因组拼接结果第112-119页
     ·XLDN2-5 基因组中苯甲酸降解基因分析第119页
     ·XLDN2-5 基因组中类胡萝卜素合成基因分析第119-121页
     ·蛋白质组分析结果第121-130页
   ·本章小结第130-132页
结束语第132-136页
参考文献第136-150页
附录第150-162页
攻读博士期间论文发表及专利申请情况第162-164页
致谢第164页

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