| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-10页 |
| 第一章 前言 | 第10-21页 |
| ·P450研究现状 | 第10-14页 |
| ·概述及命名 | 第10-11页 |
| ·特性 | 第11-12页 |
| ·真菌P450研究现状 | 第12-14页 |
| ·CYP51研究意义与进展 | 第14-16页 |
| ·概述 | 第14页 |
| ·功能 | 第14-15页 |
| ·结构 | 第15-16页 |
| ·CYP51杀真菌剂研究进展 | 第16-19页 |
| ·种类及杀菌原理 | 第16-17页 |
| ·DMIs对CYP51作用的研究方法 | 第17-18页 |
| ·计算机手段在杀菌剂开发中的应用 | 第18-19页 |
| ·本文的研究目的、内容及意义 | 第19-21页 |
| 第二章 柑桔绿霉菌CYP51与杀真菌剂结合光谱法的建立及应用 | 第21-41页 |
| ·实验材料 | 第21页 |
| ·菌种和质粒 | 第21页 |
| ·药物和试剂 | 第21页 |
| ·培养基及仪器 | 第21页 |
| ·主要的缓冲液 | 第21页 |
| ·实验方法 | 第21-22页 |
| ·不同化合物对柑桔绿霉菌的抑制活性测定 | 第21-22页 |
| ·异源表达重组柑桔绿霉菌CYP51蛋白的制备 | 第22页 |
| ·蛋白含量测定 | 第22页 |
| ·CYP51含量及活性测定(CO差光谱) | 第22页 |
| ·化合物作用下异源表达柑桔绿霉菌CYP51光谱学分析 | 第22页 |
| ·结果与分析 | 第22-39页 |
| ·重组CYP51性质研究 | 第22-23页 |
| ·化合物对柑桔绿霉菌生长的抑制作用 | 第23-24页 |
| ·CYP51与杀真菌剂结合光谱法的建立 | 第24-27页 |
| ·含氮化合物的筛选及分子特征分析 | 第27-39页 |
| ·讨论 | 第39-41页 |
| 第三章 柑桔绿霉菌CYP51突变体构建及其与杀菌剂结合特点分析 | 第41-58页 |
| ·实验材料 | 第41页 |
| ·菌种和质粒 | 第41页 |
| ·化学试剂及抗菌素 | 第41页 |
| ·工具酶 | 第41页 |
| ·缓冲液 | 第41页 |
| ·培养基 | 第41页 |
| ·实验方法 | 第41-42页 |
| ·生物信息学分析 | 第41页 |
| ·突变体引物设计 | 第41-42页 |
| ·突变体的构建 | 第42页 |
| ·突变体原核表达分析 | 第42页 |
| ·蛋白含量测定 | 第42页 |
| ·突变体与化合物结合光谱分析 | 第42页 |
| ·毕赤酵母GS115表达 | 第42页 |
| ·结果与分析 | 第42-54页 |
| ·生物信息学分析 | 第42-46页 |
| ·突变体的构建 | 第46-49页 |
| ·突变体的表达 | 第49-50页 |
| ·不同突变体蛋白与C系列化合物的结合光谱 | 第50-54页 |
| ·讨论 | 第54-58页 |
| 参考文献 | 第58-65页 |
| 硕士期间发表论文 | 第65页 |
| 衷心感谢以下基金资助 | 第65-66页 |
| 致谢 | 第66页 |