| 目录 | 第1-8页 |
| 摘要 | 第8-10页 |
| ABSTRACT | 第10-12页 |
| 缩略语表 | 第12-13页 |
| 1 文献综述 | 第13-37页 |
| ·油菜雄性不育与杂种优势利用的关系 | 第13-16页 |
| ·细胞质雄性不育 | 第14-15页 |
| ·细胞核雄性不育 | 第15-16页 |
| ·油菜细胞核雄性不育的研究进展 | 第16-22页 |
| ·油菜细胞核雄性不育的育性分类 | 第16页 |
| ·油菜细胞核雄性不育的遗传分类 | 第16-18页 |
| ·两对显性基因互作控制的细胞核雄性不育 | 第17页 |
| ·一对复等位基因控制的细胞核雄性不育 | 第17页 |
| ·两对隐性基因控制的细胞核雄性不育 | 第17-18页 |
| ·隐性上位基因互作控制的细胞核雄性不育 | 第18页 |
| ·转基因的细胞核雄性不育 | 第18页 |
| ·油菜细胞核雄性不育基因的定位 | 第18-20页 |
| ·油菜细胞核雄性不育的分子机理 | 第20-22页 |
| ·甘蓝型油菜的遗传连锁图谱及重要基因的定位 | 第22-27页 |
| ·甘蓝型油菜的遗传连锁图谱 | 第22-23页 |
| ·甘蓝型油菜重要基因的定位 | 第23-27页 |
| ·品质性状相关基因的定位 | 第23-24页 |
| ·抗病性状相关基因的定位 | 第24-26页 |
| ·种皮颜色相关基因的定位 | 第26页 |
| ·育性相关基因的定位与分离 | 第26-27页 |
| ·图位克隆技术的原理及基本技术环节 | 第27-31页 |
| ·目的基因的分子标记定位 | 第27-28页 |
| ·基因组文库的构建 | 第28-29页 |
| ·构建目的基因区域的物理图谱 | 第29-30页 |
| ·候选基因的确定与功能验证 | 第30-31页 |
| ·芸薹属作物与拟南芥比较基因组研究 | 第31-35页 |
| ·比较基因组学 | 第31页 |
| ·芸薹属作物的比较基因组研究 | 第31-32页 |
| ·芸薹属植物与拟南芥之间的共线性研究 | 第32-35页 |
| ·宏观共线性 | 第32-33页 |
| ·微观共线性 | 第33-34页 |
| ·ACGM标记——扩增共有序列遗传标记 | 第34-35页 |
| ·芸薹属作物与拟南芥比较基因组研究对于基因克隆的意义 | 第35页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第35-37页 |
| 2 材料和方法 | 第37-51页 |
| ·试验材料 | 第37页 |
| ·群体构建及等位性分析 | 第37-40页 |
| ·群体构建 | 第37-38页 |
| ·等位性分析 | 第38-40页 |
| ·AFLP与BSA分析 | 第40-42页 |
| ·DNA提取及样品池的构建 | 第40页 |
| ·AFLP分析 | 第40-42页 |
| ·总DNA的酶切和连接 | 第40-41页 |
| ·预扩增 | 第41页 |
| ·选择性扩增 | 第41-42页 |
| ·电泳检测 | 第42页 |
| ·SCAR标记转化 | 第42-45页 |
| ·大肠杆菌(Ecoli)感受态细胞的制备 | 第42-43页 |
| ·差异片段的回收与连接 | 第43页 |
| ·差异片段的克隆与测序 | 第43-44页 |
| ·连接子的转化 | 第43-44页 |
| ·重组子的筛选与鉴定 | 第44页 |
| ·PCR walking | 第44-45页 |
| ·SCAR引物设计及检测 | 第45页 |
| ·SSR分析 | 第45页 |
| ·BnMs2基因的粗定位和精细定位及遗传图谱的绘制 | 第45-46页 |
| ·BnMs2基因的图谱定位 | 第46页 |
| ·标记序列与拟南芥的同源性比对及ACGM标记开发 | 第46-47页 |
| ·标记序列的BLAST分析 | 第46-47页 |
| ·ACGM标记的开发 | 第47页 |
| ·农杆菌介导的遗传转化 | 第47-51页 |
| ·植物表达载体的构建 | 第47-48页 |
| ·p2301G1与p2301G2表达载体的构建 | 第47页 |
| ·p2301AntiG2反义载体的构建 | 第47-48页 |
| ·p121P2GUS启动子分析表达载体的构建 | 第48页 |
| ·油菜的遗传转化 | 第48-49页 |
| ·转基因植株的检测 | 第49-51页 |
| ·转基因植株的PCR检测 | 第49页 |
| ·转基因植株的GUS活性检测 | 第49-50页 |
| ·转基因植株育性的分子标记检测 | 第50-51页 |
| 3 结果与分析 | 第51-75页 |
| ·S4516AB群体的构建 | 第51页 |
| ·S4516AB不育性状的遗传分析 | 第51-52页 |
| ·S45AB与S4516AB杂合位点的等位性分析 | 第52页 |
| ·与BnMs2连锁的AFLP标记 | 第52-53页 |
| ·BnMs2基因的初步定位 | 第53-55页 |
| ·SCAR标记转化 | 第55-60页 |
| ·差异片段的克隆测序 | 第55-56页 |
| ·AFLP侧翼序列的分离 | 第56-57页 |
| ·SCAR标记的获取 | 第57-60页 |
| ·BnMs2基因的图谱定位 | 第60页 |
| ·在TN群体和QN群体上的图谱定位 | 第60页 |
| ·借助图谱标记信息发展新的SSR标记 | 第60页 |
| ·BnMs2基因的精细定位 | 第60-61页 |
| ·基于标记序列BLAST分析的候选基因鉴定 | 第61-64页 |
| ·与拟南芥基因组的同源性比较 | 第61页 |
| ·ACGM标记的开发 | 第61-63页 |
| ·基于白菜BAC序列的候选基因筛选 | 第63-64页 |
| ·BnMs2基因的BAC克隆筛选、候选基因的预测及测序 | 第64-65页 |
| ·油菜的遗传转化 | 第65-74页 |
| ·BnMs2基因的互补测验 | 第65-69页 |
| ·表达载体的构建 | 第65-66页 |
| ·转基因阳性株的获取与育性检测 | 第66-69页 |
| ·候选基因BnG2基因的反义抑制 | 第69-71页 |
| ·反义载体的构建 | 第69-70页 |
| ·反义抑制阳性株的获取与表型检测 | 第70-71页 |
| ·候选基因BnG2基因启动子的分离与组织特异性表达分析 | 第71-74页 |
| ·启动子分析表达载体的构建 | 第71-72页 |
| ·BnG2基因启动子的分离与花药特异表达 | 第72-74页 |
| ·小结 | 第74-75页 |
| 4 讨论 | 第75-81页 |
| ·候选基因BnG2可能就是BnMs2 | 第75页 |
| ·侧翼分子标记分析结合混合样品作图可以提高基因精细定位的效率 | 第75-76页 |
| ·利用拟南芥基因组信息定位基因与筛选候选基因的一些思考 | 第76-77页 |
| ·甘蓝型油菜转基因沉默的启示 | 第77-78页 |
| ·双隐性核不育制种时拔除50%可育株问题的基因工程解决思路 | 第78-81页 |
| 5 参考文献 | 第81-98页 |
| 附录 | 第98-100页 |
| 附录1:油菜转基因所用的培养基 | 第98页 |
| 附录2:GUS染色液的配制 | 第98-99页 |
| 附录3:作者简介和在读期间发表论文 | 第99-100页 |
| 作者简介 | 第99页 |
| 在读期间发表论文 | 第99-100页 |
| 致谢 | 第100页 |
