| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 目录 | 第8-11页 |
| 缩略词 | 第11-12页 |
| 第一章 绪论 | 第12-28页 |
| 第一节 p53的结构与功能 | 第12-20页 |
| ·p53蛋白的结构 | 第12-17页 |
| ·p53的功能 | 第17-20页 |
| 第二节 p53的表达及突变 | 第20-22页 |
| ·p53的表达 | 第20-21页 |
| ·p53的突变 | 第21-22页 |
| 第三节 p53的靶基因及选择性转录调节 | 第22-24页 |
| ·p53的靶基因 | 第22-23页 |
| ·p53的选择性转录调节 | 第23-24页 |
| 第四节 p53基因家族 | 第24-26页 |
| ·p63 | 第24-25页 |
| ·p73 | 第25-26页 |
| 第五节 研究目的、意义及论文安排 | 第26-28页 |
| ·研究目的及意义 | 第26-27页 |
| ·论文安排 | 第27-28页 |
| 第二章 p53DBD基因的克隆及表达载体构建 | 第28-49页 |
| 第一节 实验材料 | 第29-32页 |
| ·菌株与质粒 | 第29页 |
| ·酶与生化试剂 | 第29页 |
| ·主要仪器 | 第29-30页 |
| ·常用试剂配制方法 | 第30-32页 |
| ·PCR引物 | 第32页 |
| 第二节 实验方法 | 第32-43页 |
| ·总RNA提取 | 第32-33页 |
| ·分光光度法检测RNA纯度和浓度 | 第33页 |
| ·RT-PCR | 第33-37页 |
| ·目的基因的酶切回收 | 第37页 |
| ·载体pET-32a质粒的酶切回收 | 第37-38页 |
| ·目的基因与载体的连接 | 第38页 |
| ·重组质粒pET-32a-p53DBD的转化及鉴定 | 第38-41页 |
| ·开放阅读框的修改 | 第41-43页 |
| 第三节 结果与讨论 | 第43-48页 |
| ·人外周血淋巴细胞总RNA的提取 | 第43页 |
| ·总RNA的RT-PCR | 第43-44页 |
| ·表达载体的构建 | 第44-47页 |
| ·开放阅读框的修改 | 第47-48页 |
| 第四节 本章小结 | 第48-49页 |
| 第三章 p53DBD蛋白的表达与纯化 | 第49-62页 |
| 第一节 实验材料 | 第49-52页 |
| ·菌株与质粒 | 第49页 |
| ·酶与生化试剂 | 第49页 |
| ·主要仪器 | 第49页 |
| ·常用试剂配制方法 | 第49-52页 |
| 第二节 实验方法 | 第52-56页 |
| ·蛋白表达条件的优化 | 第52-54页 |
| ·蛋白表达与纯化 | 第54-56页 |
| 第三节 结果与讨论 | 第56-60页 |
| ·蛋白表达条件的优化 | 第56-59页 |
| ·蛋白纯化 | 第59-60页 |
| 第四节 本章小结 | 第60-62页 |
| 第四章 镁离子对p53DBD与靶基因相互作用的影响 | 第62-79页 |
| 第一节 引言 | 第62-66页 |
| ·荧光光谱法 | 第62-64页 |
| ·圆二色谱法 | 第64-65页 |
| ·p53DBD与锌离子的结合 | 第65-66页 |
| 第二节 材料与方法 | 第66-69页 |
| ·实验材料 | 第66页 |
| ·实验方法 | 第66-69页 |
| 第三节 结果与讨论 | 第69-78页 |
| ·p53 DBD的内源荧光 | 第69页 |
| ·镁离子与p53 DBD的相互作用 | 第69-74页 |
| ·镁离子对p53 DBD与靶基因相互作用的影响 | 第74-78页 |
| 第四节 本章小结 | 第78-79页 |
| 第五章 结论 | 第79-80页 |
| 参考文献 | 第80-86页 |
| 致谢 | 第86-87页 |
| 个人简历 | 第87-88页 |
| 在学期间发表的学术论文与研究成果 | 第88页 |