| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-20页 |
| 1 黄酮类化合物的分布、种类、结构及其生物学功能 | 第10页 |
| ·植物中的黄酮 | 第10页 |
| ·黄酮的生物学功能 | 第10页 |
| 2 荞麦中黄酮的种类和分布 | 第10-11页 |
| 3 荞麦黄酮代谢途径 | 第11-12页 |
| 4 苯丙氨酸氨解酶(PAL) | 第12-14页 |
| ·PAL的基本性质 | 第13页 |
| ·Pal基因的结构 | 第13页 |
| ·Pal的表达调控 | 第13页 |
| ·Pal表达系统的构建 | 第13-14页 |
| 5 查尔酮合成酶(CHS) | 第14-16页 |
| ·CHS的特征 | 第14页 |
| ·Chs基因的结构 | 第14页 |
| ·Chs基因的进化 | 第14-15页 |
| ·Chs表达的调控 | 第15页 |
| ·Chs的转基因应用 | 第15-16页 |
| 6 植物基因克隆技术的进展 | 第16-19页 |
| ·图位克隆 | 第16页 |
| ·RACE(Rapid amplification of cDNA ends)技术 | 第16-18页 |
| ·Genome-Walking技术 | 第18-19页 |
| ·Genome-Walking适用范围 | 第18页 |
| ·Genome-Walking方法和原理 | 第18页 |
| ·Genome-Walking引物的设计 | 第18-19页 |
| 7 立题依据和意义 | 第19-20页 |
| 第二章 苦荞Pal基因和Chs基因保守片段的克隆 | 第20-25页 |
| 1 材料与方法 | 第20-21页 |
| ·材料 | 第20页 |
| ·菌种 | 第20页 |
| ·主要试剂 | 第20页 |
| ·主要仪器和设备 | 第20页 |
| ·引物 | 第20-21页 |
| ·苦荞总DNA的提取 | 第21页 |
| ·苦荞Pal基因保守片段的PCR | 第21页 |
| ·苦荞Chs基因保守片段的PCR | 第21页 |
| ·扩增产物的T载体克隆及测序 | 第21页 |
| 2 结果与分析 | 第21-24页 |
| ·苦荞总DNA提取 | 第21-22页 |
| ·苦荞Pal和Chs保守片段的PCR | 第22页 |
| ·序列测定及分析 | 第22-24页 |
| ·苦荞Pal基因保守片段的测序结果 | 第22-23页 |
| ·苦荞Chs基因保守片段的测序结果 | 第23页 |
| ·苦荞Pal基因测序结果分析 | 第23页 |
| ·苦荞Chs基因测序结果分析 | 第23-24页 |
| 3 讨论 | 第24-25页 |
| 第三章 Genome-Walking法扩增苦养Pal基因和Chs基因的DNA序列 | 第25-36页 |
| 1 材料与方法 | 第25-28页 |
| ·试验材料 | 第25页 |
| ·引物设计 | 第25-26页 |
| ·Genome-Walking扩增苦荞Pal基因5'端和3'端序列 | 第26-27页 |
| ·苦荞Pal基因3'端未知序列的Genome-Walking | 第26-27页 |
| ·苦荞Pal基因5'端未知序列的Genome-Walking | 第27页 |
| ·Genome-Walking扩增苦荞Chs基因5'端和3'端序列 | 第27-28页 |
| ·苦荞Chs基因3'端未知序列的Genome-Walking | 第27页 |
| ·苦荞Chs基因5'端未知序列的Genome-Walking | 第27-28页 |
| ·苦荞Pal和Chs基因DNA序列的PCR | 第28页 |
| ·克隆、转化和测序 | 第28页 |
| 2 结果与分析 | 第28-35页 |
| ·苦荞Pal基因3'端和5'端未知序列的Genome-Walking | 第28-29页 |
| ·苦荞Chs基因3'端和5'端未知序列的Genome-Walking | 第29-30页 |
| ·测序结果的拼接 | 第30-33页 |
| ·苦荞Pal基因的全长DNA序列 | 第30-32页 |
| ·苦荞Chs基因的全长DNA序列 | 第32-33页 |
| ·内含子预测 | 第33-35页 |
| ·苦荞Pal和Chs基因全长DNA序列的PCR | 第35页 |
| 3 讨论 | 第35-36页 |
| 第四章 苦荞Pal和Chs全长cDNA的克隆及序列分析 | 第36-53页 |
| 1 材料与方法 | 第36-38页 |
| ·材料 | 第36页 |
| ·试剂、主要仪器和设备 | 第36页 |
| ·方法 | 第36-37页 |
| ·苦荞花总RNA的抽提 | 第36页 |
| ·RT-PCR制备cDNA第一链 | 第36-37页 |
| ·PCR扩增苦荞Pal基因和Chs基因全长cDNA | 第37页 |
| ·扩增产物的T载体克隆及测序 | 第37-38页 |
| 2 结果与分析 | 第38-51页 |
| ·苦荞花总RNA电泳图 | 第38页 |
| ·苦荞Pal基因和Chs基因全长cDNA的PCR | 第38-39页 |
| ·苦荞Pal基因序列分析 | 第39-45页 |
| ·核苷酸序列分析 | 第41-43页 |
| ·氨基酸序列分析 | 第43-45页 |
| ·苦荞Chs基因序列分析 | 第45-51页 |
| ·核苷酸序列分析 | 第47-48页 |
| ·氨基酸序列分析 | 第48-51页 |
| 3 讨论 | 第51-53页 |
| ·RNA的质量控制 | 第51页 |
| ·大片段的T载体克隆 | 第51页 |
| ·Pal基因的表达调控 | 第51-52页 |
| ·Chs超基因家族 | 第52页 |
| ·展望 | 第52-53页 |
| 结论与创新点 | 第53-54页 |
| 1 论文工作取得的结果 | 第53页 |
| 2 本研究的创新点 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-58页 |
| 致谢 | 第58页 |
