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1.萜类化合物MEP生物合成途径中dxr基因的克隆表达及酶活性分析 2.野芝麻中环烯醚萜苷的生物合成研究

中文摘要第1-4页
Abstract第4-9页
英文缩略语表第9-11页
前言第11-13页
第一章 萜类化合物概述第13-22页
 1 萜类化合物的特点和功能第13-15页
   ·萜类化合物的特点第13页
   ·萜类化合物的分类及功能第13-15页
     ·单萜第14页
     ·倍半萜及二萜第14-15页
     ·其它的萜类化合物第15页
 2 萜类化合物生物合成途径研究进展第15-18页
   ·萜类化合物的生物合成途径第15页
   ·MVA途径第15-16页
   ·MEP途径第16-18页
   ·两条合成途径的联系第18页
 3 萜类化合物生物合成途径关键酶的研究进展第18-22页
   ·HMGR第18-19页
   ·DXS第19页
   ·DXR第19-22页
第二章 dxr基因的克隆、表达及DXR的纯化和活性检测第22-37页
 1 材料与仪器第22-25页
   ·菌株和载体第22-23页
   ·工具酶及试剂第23页
   ·主要溶液配方第23-24页
   ·培养基第24-25页
   ·主要仪器第25页
 2 方法第25-31页
   ·dxr基因的PCR扩增第25-26页
   ·pET15b-DXR重组质粒的构建第26-28页
     ·PCR产物的胶回收及双酶切反应第26-27页
     ·Top10感受态细胞的制备第27页
     ·目的基因与载体的连接与转化第27-28页
   ·pET15b-DXR的酶切鉴定及测序第28页
   ·BL21(DE3)-pET15b-DXR的构建第28页
   ·重组蛋白的诱导表达及最佳诱导时间优化第28页
   ·DXR融合蛋白的SDS-PAGE分析第28页
   ·DXR融合蛋白的Western-Blotting鉴定第28-29页
   ·DXR融合蛋白的大量诱导表达及蛋白纯化鉴定第29-30页
   ·Bradford法测定DXR融合蛋白浓度第30页
   ·DXP的制备第30-31页
   ·DXR融合蛋白暨DXR的活性检测第31页
 3.结果与分析第31-35页
   ·PCR扩增目的基因dxr结果第31页
   ·双酶切鉴定结果第31-32页
   ·pET15b-DXR的测序结果第32页
   ·DXR融合蛋白的诱导表达及最佳诱导时间优化结果第32-33页
   ·DXR融合蛋白Western-Blotting鉴定结果第33页
   ·纯化结果第33-34页
   ·DXR浓度测定第34页
   ·DXR活性分析第34-35页
 4.讨论第35-36页
 小结一第36-37页
第三章 野芝麻中环烯醚萜苷的生物合成研究第37-44页
 1 材料与方法第38-40页
   ·实验材料第38页
   ·试剂第38-39页
   ·实验方法第39-40页
     ·[3,4,5-~(13)C_3]DXP的合成第39页
     ·植物喂饲实验第39页
     ·环烯醚萜苷的提取分离及~(13)C NMR分析第39-40页
 2 结果与分析第40-42页
 3.结论第42-43页
 小结二第43-44页
参考文献第44-50页
附录第50-55页
 1.dxr基因测序图1第50-51页
 2.dxr基因测序图2第51-52页
 3.纯品DXP的~1H NMR图谱第52-53页
 4.Lamalbid的~(13)C NMR数据第53-55页
致谢第55页

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