| 中文摘要 | 第1-11页 |
| Abstract | 第11-14页 |
| 英文略语表 | 第14-16页 |
| 第一部分 纳米材料PAMAM毒性机理的研究 | 第16-59页 |
| 前言 | 第17-20页 |
| 第一节 纳米材料PAMAM G5导致急性肺损伤机理的研究 | 第20-44页 |
| 1 实验材料 | 第20-22页 |
| ·实验动物 | 第20页 |
| ·实验试剂 | 第20页 |
| ·实验设备 | 第20-22页 |
| 2 实验方法 | 第22-28页 |
| ·PAMAM纳米材料的处理 | 第22页 |
| ·纳米材料的浓度计算 | 第22页 |
| ·小鼠血浆ANGⅡ的测定 | 第22-23页 |
| ·WESTERN BLOT小鼠肺组织ACE2蛋白表达水平的变化 | 第23-25页 |
| ·小鼠死亡率 | 第25页 |
| ·小鼠肺组织湿干比 | 第25页 |
| ·小鼠肺组织血管壁渗透性实验(EVANS BLUE实验) | 第25-26页 |
| ·小鼠肺组织病理检测及肺组织中炎性浸润细胞计数 | 第26页 |
| ·小鼠动脉血氧分压检测 | 第26页 |
| ·小鼠肺弹性检测 | 第26-28页 |
| 3 实验结果 | 第28-42页 |
| ·纳米材料PAMAM可以升高小鼠ANGIOTENSIN Ⅱ水平 | 第28页 |
| ·纳米材料PAMAM下调小鼠肺组织ACE2蛋白表达水平 | 第28-29页 |
| ·纳米材料PAMAM G5可以导致小鼠的急性死亡 | 第29-30页 |
| ·纳米材料PAMAM G5可以引起小鼠肺组织水肿 | 第30页 |
| ·纳米材料PAMAM G5可以导致小鼠肺组织血管渗透性增加 | 第30-31页 |
| ·纳米材料PAMAM G5可以导致小鼠肺组织病理改变 | 第31页 |
| ·纳米材料PAMAM G5可以导致小鼠动脉血氧分压降低 | 第31-32页 |
| ·纳米材料PAMAM G5可以导致小鼠肺组织弹性的变化 | 第32页 |
| ·纳米材料PAMAM G5可以加快ACE2基因敲除小鼠死亡 | 第32-33页 |
| ·纳米材料PAMAM G5加剧ACE2基因敲除小鼠肺弹性变化 | 第33-34页 |
| ·ACE2蛋白可降低纳米材料PAMAM G5导致的小鼠死亡率 | 第34-35页 |
| ·ACE2蛋白可以改善ACE2敲除小鼠小鼠肺弹性变化率 | 第35页 |
| ·LOSARTAN可降低纳米材料PAMAM G5导致的小鼠死亡率 | 第35-36页 |
| ·LOSARTAN可以改善纳米材料PAMAM G5所导致的小鼠肺弹性变化率 | 第36页 |
| ·LOSARTAN可以改善纳米材料PAMAM G5所导致的ANGIOTENSIN Ⅱ的上升 | 第36-37页 |
| ·LOSARTAN可以改善纳米材料PAMAM G5所导致的血管渗透性的上升 | 第37页 |
| ·LOSARTAN可以改善纳米材料PAMAM G5所致的病理改变 | 第37-38页 |
| ·ARB类其他药物可以改善纳米材料PAMAM G5所导致的小鼠死亡率 | 第38页 |
| ·ARB类药物改善纳米材料PAMAM G5所导致的小鼠肺弹性变化率 | 第38-39页 |
| ·ARB类药物改善纳米材料PAMAM G5所导致的小鼠肺组织病理 | 第39页 |
| ·多种纳米材料对小鼠血液中ANGIOTENSIN Ⅱ总量无影响 | 第39-40页 |
| ·多种纳米材料对小鼠肺组织ACE2蛋白表达无影响 | 第40-42页 |
| 结论 | 第42-43页 |
| 讨论 | 第43-44页 |
| 第二节 纳米材料PAMAM G5导致急性肝损伤机理的研究 | 第44-59页 |
| 1 实验材料 | 第44-45页 |
| ·实验动物 | 第44页 |
| ·实验试剂 | 第44页 |
| ·实验设备 | 第44-45页 |
| 2 实验方法 | 第45-49页 |
| ·PAMAM纳米材料的处理 | 第45页 |
| ·纳米材料的浓度计算 | 第45页 |
| ·小鼠死亡率 | 第45页 |
| ·小鼠肝/体重比 | 第45页 |
| ·小鼠ALT、AST、TP的检测 | 第45-46页 |
| ·小鼠凝血酶时间检测 | 第46页 |
| ·小鼠血压检测 | 第46页 |
| ·小鼠细胞因子检测 | 第46页 |
| ·细胞水平NF-κB激活的检测 | 第46-47页 |
| ·小鼠活体成像检测 | 第47页 |
| ·人外周血单个核细胞分离 | 第47页 |
| ·FACS检测PAMAM G5激活TLR4实验 | 第47-48页 |
| ·CONFOCAL检测PAMAM G5激活TLR4 | 第48页 |
| ·小鼠肝组织病理 | 第48-49页 |
| 3 实验结果 | 第49-57页 |
| ·纳米材料PAMAM G5导致小鼠的急性毒性 | 第49页 |
| ·纳米材料PAMAM G5对小鼠肝/体重比的影响 | 第49-50页 |
| ·纳米材料PAMAM G5对小鼠肝组织病理的影响 | 第50页 |
| ·纳米材料PAMAM G5可以升高小鼠丙氨酸转氨酶(ALT) | 第50-51页 |
| ·纳米材料PAMAM G5升高小鼠天门冬氨酸转氨酶(AST) | 第51页 |
| ·纳米材料PAMAM G5对总蛋白的影响 | 第51-52页 |
| ·纳米材料PAMAM G5对小鼠凝血酶时间的影响 | 第52页 |
| ·纳米材料PAMAM G5对小鼠血样的影响 | 第52-53页 |
| ·纳米材料PAMAM G5对小鼠血液中IL-1B的影响 | 第53页 |
| ·纳米材料PAMAM G5对小鼠血液中TNF-A的影响 | 第53-54页 |
| ·纳米材料PAMAM G5小鼠血液中细胞因子IL-6的影响 | 第54页 |
| ·纳米材料PAMAM G5对细胞NF-κB信号通路的影响 | 第54-55页 |
| ·纳米材料PAMAM G5激活小鼠肝组织中NF-κB | 第55页 |
| ·纳米材料PAMAM G5激活TLR4受体 | 第55-56页 |
| ·纳米材料PAMAM G5激活TLR4受体 | 第56-57页 |
| 结论 | 第57-58页 |
| 讨论 | 第58-59页 |
| 第二部分 H5N1型禽流感病毒导致急性肺损伤机理的研究 | 第59-104页 |
| 前言 | 第60-62页 |
| 1 实验材料 | 第62-68页 |
| ·实验动物 | 第62页 |
| ·实验试剂 | 第62-64页 |
| ·主要仪器及设备 | 第64-65页 |
| ·主要溶液配制 | 第65-68页 |
| 2 实验方法 | 第68-78页 |
| ·H5N1型禽流感病毒的表面膜蛋白H5蛋白的制备 | 第68-69页 |
| ·病毒接种回收及滴度测定 | 第69-72页 |
| ·小鼠肺组织电镜检测 | 第72页 |
| ·流感病毒感染细胞电镜检测 | 第72-73页 |
| ·流感病毒感染细胞荧光共聚焦显微镜检测 | 第73页 |
| ·用流感病毒感染细胞WESTERN BLOT检测 | 第73-75页 |
| ·细胞活力实验 | 第75页 |
| ·细胞水平SIRNA实验 | 第75-76页 |
| ·小鼠肺组织弹性 | 第76页 |
| ·小鼠肺组织湿干比 | 第76-77页 |
| ·小鼠死亡率 | 第77页 |
| ·重组的H5蛋白加重小鼠肺损伤的实验 | 第77-78页 |
| 3 实验结果 | 第78-102页 |
| ·H5N1诱导小鼠肺泡上皮细胞发生自噬 | 第78页 |
| ·H5N1病毒诱导A549细胞发生自噬 | 第78-79页 |
| ·H5N1诱导LC3凝集 | 第79-80页 |
| ·H5N1诱导LC3 Ⅱ表达上调 | 第80-81页 |
| ·蛋白酶抑制剂抑制LC3Ⅱ的降解 | 第81-82页 |
| ·H5N1可以导致A549细胞死亡 | 第82页 |
| ·自噬的抑制剂缓解H5N1流感病毒导致的A549细胞死亡 | 第82-83页 |
| ·自噬的抑制剂降低H5N1流感病毒导致的A549细胞自噬发生 | 第83页 |
| ·ATG12SIRNA可以降低H5N1流感病毒导致的细胞死亡率 | 第83-84页 |
| ·H5N1流感病毒引起磷酸化MTOR水平下调 | 第84-85页 |
| ·H5N1流感病毒引起磷酸化S6水平下调 | 第85-86页 |
| ·TSC2敲除后细胞发生自噬减少 | 第86-87页 |
| ·TSC2敲除后细胞生存率升高 | 第87页 |
| ·H5N1引起磷酸化AKT水平下调 | 第87-88页 |
| ·H5N1病毒导致细胞自噬通路图 | 第88页 |
| ·H5N1流感病毒诱导小鼠肺组织发生细胞自噬 | 第88-89页 |
| ·H5N1可以导致小鼠急性死亡 | 第89页 |
| ·H5N1流感病毒可以导致小鼠发生急性肺水肿 | 第89-90页 |
| ·H5N1流感病毒可以导致小鼠肺弹性的变化 | 第90页 |
| ·3MA可以使H5N1病毒感染的小鼠肺组织病理改善 | 第90-91页 |
| ·3MA可以改善H5N1所致的肺弹性改变 | 第91-92页 |
| ·3MA作为预防性药物可以降低H5N1导致的小鼠死亡率 | 第92页 |
| ·3MA预防性使用后,H5N1导致的肺水肿变化 | 第92-93页 |
| ·LY294002和WORTMANNIN作为预防性药物可以降低小鼠死亡率 | 第93页 |
| ·3MA作为治疗性药物可以降低H5N1导致的小鼠死亡率 | 第93-94页 |
| ·3MA作为治疗性药物可以减缓H5N1导致的肺水肿程度 | 第94页 |
| ·ATG5 SIRNA可以降低小鼠肺组织ATG5基因表达水平 | 第94-95页 |
| ·ATG5 SIRNA可以改善H5N1流感病毒导致的小鼠肺组织病理改变 | 第95-96页 |
| ·ATG5 SIRNA可以降低H5N1导致的小鼠死亡率 | 第96页 |
| ·ATG5 SIRNA可以减缓H5N1导致的肺水肿程度 | 第96-97页 |
| ·ATG5 SIRNA可以改善火活H5N1病毒处理小鼠的肺弹性 | 第97-98页 |
| ·凋亡抑制剂对小鼠的肺弹性没有影响 | 第98页 |
| ·程序性细胞坏死抑制剂对小鼠的肺弹性没有影响 | 第98-99页 |
| ·重组H5蛋白的制备 | 第99页 |
| ·内毒素含量测定 | 第99-100页 |
| ·H5蛋白诱导A549细胞发生自噬 | 第100页 |
| ·H5蛋白加剧滴酸的肺组织水肿程度 | 第100-101页 |
| ·H5蛋白加剧滴酸的肺组织病理损伤程度 | 第101-102页 |
| 结论 | 第102-103页 |
| 讨论 | 第103-104页 |
| 综述 | 第104-129页 |
| 参考文献 | 第124-129页 |
| 致谢 | 第129-130页 |
| 个人简历 | 第130-132页 |
