| 英文缩略词表 | 第1-6页 |
| 中文摘要 | 第6-8页 |
| 英文摘要 | 第8-14页 |
| 第一章 立题依据及研究内容 | 第14-20页 |
| 1 研究背景 | 第14-15页 |
| 2 氨甲喋呤研究进展 | 第15-16页 |
| 3 研究内容、创新点和技术路线 | 第16-18页 |
| ·研究内容 | 第16页 |
| ·创新点 | 第16-17页 |
| ·技术路线 | 第17-18页 |
| 参考文献 | 第18-20页 |
| 第二章 氨甲喋呤对映体对ECV304细胞抑制作用及其机制研究 | 第20-30页 |
| 摘要 | 第20-21页 |
| 1 实验材料、试剂及器材 | 第21页 |
| ·材料 | 第21页 |
| 2 方法 | 第21-22页 |
| ·细胞培养 | 第21页 |
| ·MTT法检测细胞增殖抑制 | 第21页 |
| ·细胞的形态学分析 | 第21-22页 |
| ·细胞周期检测 | 第22页 |
| ·统计学方法 | 第22页 |
| 3 实验结果 | 第22-27页 |
| ·(+)MTX对ECV304内皮细胞的抑制作用 | 第22页 |
| ·(-)MTX对ECV304内皮细胞的抑制作用 | 第22-23页 |
| ·(±)MTX对ECV304内皮细胞的抑制作用 | 第23页 |
| ·(±)MTX、(+)MTX、(-)MTX对ECV304增值的影响 | 第23-25页 |
| ·(±)MTX、(+)MTX、(-)MTX处理后ECV304细胞的形态改变 | 第25页 |
| ·流式细胞仪对细胞周期分析 | 第25-27页 |
| 4.讨论 | 第27-28页 |
| 参考文献 | 第28-30页 |
| 第三章 氨甲喋呤对映体药物对A549人肺腺癌细胞株增殖抑制作用及诱导凋亡的实验研究 | 第30-41页 |
| 摘要 | 第30-31页 |
| 1 实验材料、试剂及器材 | 第31页 |
| ·实验材料、试剂 | 第31页 |
| ·器材 | 第31页 |
| 2 实验方法 | 第31-32页 |
| ·细胞培养 | 第31页 |
| ·MTT法检测细胞增殖抑制 | 第31-32页 |
| ·细胞的形态学分析 | 第32页 |
| ·荧光显微镜观察 | 第32页 |
| ·细胞周期检测 | 第32页 |
| ·DNA琼脂糖凝胶电泳 | 第32页 |
| ·统计学方法 | 第32页 |
| 3 实验结果 | 第32-37页 |
| ·MTX对映体对A549增值的影响 | 第32-34页 |
| ·(+)MTX、(-)MTX处理后A549细胞的形态改变 | 第34页 |
| ·荧光显微镜观察DAPI细胞核染色结果 | 第34-35页 |
| ·流式细胞仪对细胞周期分析 | 第35-36页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳结果 | 第36-37页 |
| 4. 讨论 | 第37-39页 |
| 参考文献 | 第39-41页 |
| 第四章 氨甲喋呤对映体对人肝癌细胞HepG_2的增殖抑制作用及机制研究 | 第41-53页 |
| 摘要 | 第41-42页 |
| 1 实验试剂、器材及细胞 | 第42页 |
| ·试剂 | 第42页 |
| ·器材 | 第42页 |
| ·HepG_2细胞 | 第42页 |
| 2. 实验方法 | 第42-43页 |
| ·细胞培养 | 第42页 |
| ·MTT法检测细胞增殖反应 | 第42-43页 |
| ·MTX处理HepG_2后细胞的形态学变化 | 第43页 |
| ·细胞周期检测 | 第43页 |
| ·细胞凋亡(AnnexinV/PI双染法检测) | 第43页 |
| ·统计学处理 | 第43页 |
| 3 结果 | 第43-49页 |
| ·(+)MTX对人肝癌细胞株HepG_2的增殖抑制作用 | 第43-44页 |
| ·(-)MTX对人肝癌HepG_2细胞的抑制作用 | 第44页 |
| ·(+)MTX、(-)MTX对人肝癌细胞株HepG_2的抑制差异 | 第44-46页 |
| ·(+)MTX、(-)MTX处理后HepG_2细胞的形态改变 | 第46页 |
| ·流式细胞仪对细胞周期分析 | 第46-48页 |
| ·细胞凋亡的影响 | 第48-49页 |
| 4. 讨论 | 第49-51页 |
| 参考文献 | 第51-53页 |
| 第五章 LC-MS/MS法测定氨甲喋呤对映体在HepG_2细胞内外液的浓度 | 第53-63页 |
| 摘要 | 第53-54页 |
| 1 实验材料、试剂及器材 | 第54页 |
| ·实验材料、试剂 | 第54页 |
| ·器材 | 第54页 |
| 2 实验方法 | 第54-56页 |
| ·色谱条件 | 第54页 |
| ·质谱条件 | 第54-55页 |
| ·细胞培养 | 第55-56页 |
| ·样品细胞外液(+)MTX、(-)MTX测定 | 第56页 |
| ·样品细胞内液(+)MTX、(-)MTX测定 | 第56页 |
| 3 实验结果 | 第56-61页 |
| ·专属性考察 | 第56-57页 |
| ·标准曲线 | 第57-58页 |
| ·准确度与精密度 | 第58-59页 |
| ·稳定性考察 | 第59页 |
| ·回收率 | 第59-60页 |
| ·HepG_2细胞内外液MTX对应体测定 | 第60-61页 |
| 4 讨论 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-63页 |
| 论文总结 | 第63-64页 |
| 硕士期间发表的论文及参与的科研工作 | 第64-65页 |
| 致谢 | 第65-66页 |
| 附件:综述手性药物药理学研究进展 | 第66-73页 |
| 1. 在体内手性药物消旋体及其对映异构体具有不同的药理活性,表现为药效学、药动学方面的差异 | 第66-70页 |
| ·药效学方面差异归结起来主要有以下5个方面 | 第66-68页 |
| ·药动学方面的差异归结起来主要有以下4个方面 | 第68-70页 |
| 2. 在体外手性药物消旋体及其对映异构体具有不同的药理活性,我们着重讨论在离体器官和细胞分子水平的差异 | 第70-71页 |
| ·离体器官培养方面 | 第70页 |
| ·细胞培养方面 | 第70-71页 |
| 3 展望 | 第71-72页 |
| 参考文献 | 第72-73页 |
