| 摘要 | 第1-10页 |
| ABSTRACT | 第10-12页 |
| 前言 | 第12-13页 |
| 第一部分 理论研究 | 第13-24页 |
| 1 应用加味犀角地黄汤治疗类风湿性关节炎的理论研究背景及可行性 | 第13-20页 |
| ·类风湿性关节炎发病机理及治疗的中外研究进展 | 第13-16页 |
| ·应用加味犀角地黄汤治疗类风湿性关节炎的理论依据 | 第16-18页 |
| ·犀角地黄汤在临床的广泛应用 | 第18-20页 |
| 2 待测基因的选择依据 | 第20-22页 |
| ·VEGF在类风湿关节炎中的作用,及其表达的意义 | 第20-21页 |
| ·VEGFR2在类风湿关节炎中的作用,及其表达的意义 | 第21-22页 |
| 3 实时荧光定量RT-PCR方法的原理及研究进展 | 第22-24页 |
| ·原理 | 第22页 |
| ·研究进展 | 第22-24页 |
| 第二部分 实验研究 | 第24-35页 |
| 1 动物实验 | 第24-26页 |
| ·仪器与试剂 | 第24页 |
| ·CIA大鼠模型的制备 | 第24-25页 |
| ·CIA大鼠模型的治疗给药 | 第25页 |
| ·标本收集 | 第25页 |
| ·模型及治疗的评价 | 第25-26页 |
| 2 实时荧光定量(RT-PCR)检测大鼠VEGF及VEGFR2 MRNA方法的建立 | 第26-30页 |
| ·仪器与试剂 | 第26-27页 |
| ·实时荧光定量RT-PCR引物及探针的设计 | 第27页 |
| ·标本制备 | 第27-28页 |
| ·PCR反应体系及条件 | 第28-29页 |
| ·标准品的构建 | 第29-30页 |
| 3 测定犀角地黄汤作用前后CIA大鼠模型滑膜组织中VEGF及VEGFR2 MRNA的表达水平 | 第30-31页 |
| ·仪器与试剂 | 第30页 |
| ·实时荧光定量RT-PCR反应体系及条件 | 第30页 |
| ·结果处理及统计学分析 | 第30-31页 |
| 4 类风湿关节炎患者关节滑膜细胞培养预实验 | 第31-32页 |
| ·标本来源 | 第31页 |
| ·仪器和试剂 | 第31页 |
| ·滑膜细胞培养 | 第31-32页 |
| ·鉴定细胞存活率 | 第32页 |
| 5 实时荧光定量(RT-PCR)检测人VEGF及VEGFR2 MRNA方法的建立 | 第32-35页 |
| ·仪器及试剂 | 第32页 |
| ·实时荧光定量RT-PCR引物及探针的设计 | 第32-33页 |
| ·标本制备 | 第33-34页 |
| ·标准品的构建 | 第34-35页 |
| 第三部分 结果与讨论 | 第35-55页 |
| 1 结果 | 第35-51页 |
| ·CIA大鼠模型及治疗评价 | 第35-38页 |
| ·实时荧光定量(RT-PCR)检测大鼠VEGF及VEGFR2 mRNA方法学评价 | 第38-43页 |
| ·实时荧光定量(RT-PCR)检测大鼠VEGF及VEGFR2 mRNA表达水平结果 | 第43-45页 |
| ·类风湿关节炎患者关节滑膜细胞培养预实验结果 | 第45-46页 |
| ·实时荧光定量RT-PCR方法测定人滑膜细胞VEGF、VEGFR2 mRNA表达水平的方法及评价 | 第46-51页 |
| ·结论 | 第51页 |
| 2 讨论 | 第51-55页 |
| ·CIA大鼠模型与人类风湿关节炎的关系及可比性 | 第51-52页 |
| ·RT-PCR方法的评价 | 第52-53页 |
| ·VEGF、VEGFR2表达的比较 | 第53页 |
| ·犀角地黄汤对CIA大鼠模型滑膜组织中VEGF及VEGFR2 mRNA的表达水平的影响 | 第53页 |
| ·建立人滑膜细胞培养方法及其实时荧光定量RT-PCR检测方法的意义 | 第53-54页 |
| ·有待进一步探讨的问题 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-59页 |
| 附录 | 第59-68页 |
| 附录一 基因测序图 | 第59-67页 |
| 附录二 缩略语中英文对照表 | 第67-68页 |
| 攻读硕士学位期间取得的学术成果 | 第68-69页 |
| 致谢 | 第69页 |
