| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-14页 |
| 第1章 综述 | 第14-33页 |
| ·间充质干细胞概述 | 第14-17页 |
| ·间充质干细胞 | 第14-16页 |
| ·羊膜间充质干细胞 | 第16-17页 |
| ·间充质干细胞体外扩增和分化 | 第17-29页 |
| ·体外培养环境对间充质干细胞扩增的影响 | 第20-24页 |
| ·间充质干细胞分化特性及其影响因素 | 第24-29页 |
| ·间充质干细胞分化特性 | 第24-26页 |
| ·间充质干细胞体外分化的影响因素 | 第26-29页 |
| ·乳酸对间充质干细胞扩增和分化的影响 | 第29-30页 |
| ·生物反应器与微载体技术 | 第30-32页 |
| ·研究内容及目的意义 | 第32-33页 |
| 第2章 羊膜间充质干细胞体外扩增和成骨诱导过程中的乳酸生成 | 第33-43页 |
| ·概述 | 第33页 |
| ·材料与方法 | 第33-36页 |
| ·胎盘与骨髓来源 | 第33页 |
| ·细胞计数 | 第33页 |
| ·细胞分离与培养 | 第33-34页 |
| ·细胞冻存 | 第34页 |
| ·细胞复苏 | 第34页 |
| ·hAMSCs表面标志分析 | 第34页 |
| ·hAMSCs在不同氧环境下的扩增 | 第34页 |
| ·hAMSCs在不同氧环境下的成骨诱导分化 | 第34-35页 |
| ·通气实验装置 | 第35页 |
| ·葡萄糖和乳酸代谢检测 | 第35-36页 |
| ·群体倍增数(Population doublings,PDs) | 第36页 |
| ·碱性磷酸酶活性测定 | 第36页 |
| ·胞外钙沉积测定 | 第36页 |
| ·茜素红染色 | 第36页 |
| ·统计学分析 | 第36页 |
| ·结果与讨论 | 第36-42页 |
| ·hAMSCs的表面标志 | 第36-38页 |
| ·体外扩增过程中氧环境对hAMSCs增殖的影响 | 第38-39页 |
| ·体外扩增过程中氧环境对hAMSCs代谢的影响 | 第39-40页 |
| ·成骨诱导分化过程中氧环境对hAMSCs成骨分化的影响 | 第40-41页 |
| ·成骨诱导分化过程中hAMSCs的代谢特性 | 第41-42页 |
| ·本章小结 | 第42-43页 |
| 第3章 乳酸对羊膜间充质干细胞体外扩增和成骨诱导分化的影响 | 第43-76页 |
| ·概述 | 第43页 |
| ·材料与方法 | 第43-47页 |
| ·胎盘与骨髓来源 | 第43页 |
| ·细胞计数 | 第43页 |
| ·细胞分离与培养 | 第43页 |
| ·在扩增过程中(常氧环境下)乳酸对hAMSCs增殖的影响 | 第43-44页 |
| ·葡萄糖和乳酸代谢检测 | 第44页 |
| ·群体倍增数 | 第44页 |
| ·集落形成能力 | 第44页 |
| ·在成骨诱导分化过程中乳酸对hAMSCs成骨分化的影响 | 第44页 |
| ·MTT细胞计数 | 第44页 |
| ·碱性磷酸酶活性测定 | 第44页 |
| ·成骨相关基因的检测 | 第44-46页 |
| ·胞外钙沉积测定 | 第46页 |
| ·茜素红染色 | 第46页 |
| ·在成脂肪诱导分化过程中乳酸对hAMSCs成脂肪分化的影响 | 第46页 |
| ·油红染色 | 第46页 |
| ·统计学分析 | 第46-47页 |
| ·结果与讨论 | 第47-75页 |
| ·体外扩增过程中乳酸对hAMSCs增殖的影响 | 第47-51页 |
| ·体外扩增过程中pH对hAMSCs增殖的影响 | 第48-49页 |
| ·体外扩增过程中乳酸盐对hAMSCs增殖的影响 | 第49-50页 |
| ·体外扩增过程中渗透压对hAMSCs增殖的影响 | 第50-51页 |
| ·体外扩增过程中乳酸对hAMSCs代谢的影响 | 第51-57页 |
| ·体外扩增过程中pH对hAMSCs代谢的影响 | 第53-54页 |
| ·体外扩增过程中乳酸盐对hAMSCs代谢的影响 | 第54-56页 |
| ·体外扩增过程中渗透压对hAMSCs代谢的影响 | 第56-57页 |
| ·乳酸对hAMSCs集落形成能力的影响 | 第57-60页 |
| ·pH对hAMSCs集落形成能力的影响 | 第58页 |
| ·乳酸盐对hAMSCs集落形成能力的影响 | 第58-59页 |
| ·渗透压对hAMSCs集落形成能力的影响 | 第59-60页 |
| ·成骨诱导分化过程中乳酸对hAMSCs成骨分化能力的影响 | 第60-75页 |
| ·成骨诱导分化过程中乳酸对Ⅰ型胶原基因表达的影响 | 第63-64页 |
| ·成骨诱导分化过程中乳酸对碱性磷酸酶活性的影响 | 第64-65页 |
| ·成骨诱导分化过程中乳酸对骨桥蛋白基因表达的影响 | 第65-66页 |
| ·成骨诱导分化过程中乳酸对骨钙素基因表达的影响 | 第66页 |
| ·成骨诱导分化过程中乳酸对转录因子Runx2和Osterix基因表达的影响 | 第66-70页 |
| ·成骨诱导分化过程中乳酸对hAMSCs增殖的影响 | 第70-72页 |
| ·成脂肪诱导分化过程中乳酸对hAMSCs成脂肪分化的影响 | 第72-75页 |
| ·本章小节 | 第75-76页 |
| 第4章 羊膜间充质干细胞在生物反应器中的扩增及成骨诱导分化 | 第76-96页 |
| ·概述 | 第76页 |
| ·材料与方法 | 第76-78页 |
| ·胎盘来源 | 第76页 |
| ·细胞计数 | 第76页 |
| ·细胞分离与培养 | 第76页 |
| ·生物反应器硅化处理 | 第76-77页 |
| ·微载体预处理 | 第77页 |
| ·hAMSCs在生物反应器中的扩增 | 第77页 |
| ·hAMSCs在生物反应器中的成骨诱导分化 | 第77页 |
| ·hAMSCs在生物反应器中扩增后细胞的收获 | 第77页 |
| ·hAMSCs在生物反应器中扩增后收获细胞的干细胞基因检测 | 第77-78页 |
| ·MTT细胞计数 | 第78页 |
| ·碱性磷酸酶活性测定 | 第78页 |
| ·成骨相关基因的检测 | 第78页 |
| ·胞外钙沉积测定 | 第78页 |
| ·茜素红染色 | 第78页 |
| ·统计学分析 | 第78页 |
| ·结果与讨论 | 第78-94页 |
| ·hAMSCs在生物反应器微载体系统中的扩增 | 第78-90页 |
| ·两种体外扩增系统中hAMSCs增殖特性的比较 | 第78-79页 |
| ·生物反应器氧环境对hAMSCs扩增的影响 | 第79-80页 |
| ·生物反应器低氧环境扩增过程中换液频率对hAMSCs扩增的影响 | 第80-82页 |
| ·生物反应器扩增条件对hAMSCs干细胞基因表达的影响 | 第82-83页 |
| ·生物反应器扩增条件对维持hAMSCs成骨分化能力的影响 | 第83-90页 |
| ·生物反应器扩增条件对Ⅰ型胶原基因表达的影响 | 第85-86页 |
| ·生物反应器扩增条件对碱性磷酸酶活性的影响 | 第86页 |
| ·生物反应器扩增条件对骨桥蛋白基因表达的影响 | 第86-87页 |
| ·生物反应器扩增条件对骨钙素基因表达的影响 | 第87-88页 |
| ·生物反应器扩增条件对Runx2和Osterix基因表达的影响 | 第88-90页 |
| ·hAMSCs在生物反应器微载体系统中的成骨诱导分化特性 | 第90-94页 |
| ·定向成骨诱导过程中hAMSCs的增殖特性 | 第90-91页 |
| ·定向成骨诱导过程中hAMSCs的成骨分化特性 | 第91-94页 |
| ·本章小结 | 第94-96页 |
| 第5章 全文总结和展望 | 第96-99页 |
| 参考文献 | 第99-110页 |
| 致谢 | 第110-111页 |
| 攻读博士学位期间研究成果 | 第111页 |
