虎纹捕鸟蛛毒素Ⅺ突变体真核表达及鉴定
| 中英文缩略词表 | 第1-5页 |
| 中文摘要 | 第5-7页 |
| ABSTRACT | 第7-13页 |
| 第一章 蜘蛛多肽毒素的基因工程表达 | 第13-24页 |
| ·大肠杆菌表达系统 | 第14-15页 |
| ·酵母表达系统 | 第15-17页 |
| ·杆状病毒/昆虫细胞表达系统 | 第17-19页 |
| ·哺乳动物细胞表达系统 | 第19-20页 |
| ·蜘蛛多肽毒素表达体系的选择 | 第20-22页 |
| ·本论文研究的背景和意义 | 第22-24页 |
| 第二章 HWTX-Ⅺ突变体的真核表达及活性鉴定 | 第24-43页 |
| ·前言 | 第24-27页 |
| ·材料 | 第27-28页 |
| ·真核表达质粒与菌株 | 第27页 |
| ·试剂及其他材料 | 第27-28页 |
| ·真核表达培养基 | 第28页 |
| ·方法 | 第28-35页 |
| ·引物设计 | 第28-29页 |
| ·突变体基因的克隆 | 第29-30页 |
| ·融合蛋白的表达 | 第30-31页 |
| ·蛋白的纯化 | 第31页 |
| ·质谱鉴定 | 第31-32页 |
| ·野生型HWTX-Ⅺ及其突变体的功能测定 | 第32-35页 |
| ·结果 | 第35-41页 |
| ·HWTX-Ⅺ突变体的设计与克隆 | 第35-36页 |
| ·HWTX-Ⅺ突变体的表达与纯化 | 第36-38页 |
| ·表达HWTX-Ⅺ及其突变体的活性鉴定 | 第38-41页 |
| ·讨论 | 第41-43页 |
| 第三章 HWTX-Ⅺ真核表达条件摸索 | 第43-51页 |
| ·材料 | 第43-44页 |
| ·方法 | 第44-45页 |
| ·HWTX-Ⅺ-优化蛋白的表达 | 第44页 |
| ·起始pH对HWTX-Ⅺ发酵的影响 | 第44-45页 |
| ·不同培养温度和时间对HWTX-Ⅺ发酵的影响 | 第45页 |
| ·实验结果 | 第45-49页 |
| ·基因合成 | 第45页 |
| ·HWTX-Ⅺ-优化酶切鉴定 | 第45-46页 |
| ·HWTX-Ⅺ-优化的表达和分离纯化 | 第46-47页 |
| ·起始pH对HWTX-Ⅺ发酵的影响 | 第47-48页 |
| ·温度对HWTX-Ⅺ发酵的影响 | 第48-49页 |
| ·讨论 | 第49-51页 |
| 第四章 HWTX-Ⅺ原核表达载体的构建和诱导表达 | 第51-60页 |
| ·材料与方法 | 第51-55页 |
| ·材料 | 第51-52页 |
| ·方法 | 第52-55页 |
| ·结果 | 第55-58页 |
| ·HWTX-Ⅺ基因克隆的鉴定 | 第55-56页 |
| ·阳性克隆的DNA测序 | 第56页 |
| ·诱导表达结果 | 第56-57页 |
| ·融合蛋白纯化及SDS-PAGE鉴定 | 第57-58页 |
| ·讨论 | 第58-60页 |
| 参考文献 | 第60-66页 |
| 致谢 | 第66-68页 |
