| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-17页 |
| 第一章 引言 | 第17-22页 |
| 第二章 miR-520b和miR-520e对乳腺癌细胞CDC的影响 | 第22-65页 |
| 第一节 实验材料 | 第22-24页 |
| ·材料 | 第22页 |
| ·主要试剂 | 第22-23页 |
| ·主要仪器及设备 | 第23-24页 |
| 第二节 实验方法 | 第24-43页 |
| ·细胞培养及传代 | 第24-25页 |
| ·细胞复苏 | 第25页 |
| ·细胞冻存 | 第25页 |
| ·细胞系总RNA提取及cDNA反转录合成 | 第25-29页 |
| ·报告基因载体构建 | 第29-35页 |
| ·基因转染 | 第35-36页 |
| ·反转录PCR | 第36页 |
| ·实时定量PCR | 第36-37页 |
| ·细胞总蛋白提取 | 第37页 |
| ·Bradford法测定蛋白质浓度 | 第37-38页 |
| ·Western blot免疫印记分析 | 第38-40页 |
| ·双荧光素酶报告基因分析 | 第40-41页 |
| ·苔盼兰吸光法检测细胞毒性试验 | 第41-42页 |
| ·酶联免疫吸附试验(ELISA) | 第42-43页 |
| ·统计分析 | 第43页 |
| 第三节 实验结果 | 第43-62页 |
| ·CD46 3’UTR报告基因载体鉴定 | 第43-49页 |
| ·miR-520b和miR-520e在乳腺细胞和乳腺癌细胞中的表达差异 | 第49-51页 |
| ·miR-520b和miR-520e影响乳腺癌细胞C D C作用 | 第51-56页 |
| ·miR-520b和miR-520e对CD46基因及蛋白质表达的影响 | 第56-58页 |
| ·miR-520b和miR-520e对CD46 3’UTR的作用 | 第58-60页 |
| ·miR-520b和miR-520e对乳腺癌细胞的调理作用 | 第60-62页 |
| 第四节 讨论 | 第62-65页 |
| 第三章 miR-520b靶向HBXIP对乳腺癌CDC的影响 | 第65-113页 |
| 第一节 实验材料 | 第65-68页 |
| ·材料 | 第65-66页 |
| ·主要试剂 | 第66-67页 |
| ·主要仪器及设备 | 第67-68页 |
| 第二节 实验方法 | 第68-78页 |
| ·细胞培养及传代 | 第68页 |
| ·细胞系总RNA提取cDNA合成 | 第68页 |
| ·细胞系基因组DNA提取 | 第68-69页 |
| ·载体构建 | 第69-73页 |
| ·反转录PCR | 第73-74页 |
| ·实时定量PCR | 第74-75页 |
| ·基因转染 | 第75-76页 |
| ·细胞总蛋白提取 | 第76页 |
| ·细胞核蛋白提取 | 第76页 |
| ·蛋白质浓度测定 | 第76页 |
| ·Western blot免疫印记分析 | 第76-77页 |
| ·双荧光素酶报告基因分析 | 第77页 |
| ·免疫荧光染色 | 第77页 |
| ·苔盼兰吸光法检测细胞毒性试验 | 第77页 |
| ·统计分析 | 第77-78页 |
| 第三节 实验结果 | 第78-109页 |
| ·CD46和CD59双荧光素酶报告基因载体鉴定 | 第78-81页 |
| ·HBXIP 3’UTR双荧光素酶报告基因载体鉴定 | 第81-85页 |
| ·乳腺癌细胞对补体介导的细胞毒作用的敏感性 | 第85页 |
| ·补体调节蛋白在乳腺癌细胞中的表达水平 | 第85-86页 |
| ·HBXIP的表达与mCRPs表达的相关性及其对CDC的影响 | 第86-89页 |
| ·HBXIP对mCRPs表达的影响 | 第89-94页 |
| ·HBXIP激活ERK1/2/NF-κB信号途径上调mCRPs | 第94-107页 |
| ·miR-520b在乳腺癌细胞中的表达及其对HBXIP的靶向作用 | 第107-109页 |
| 第四节 讨论 | 第109-113页 |
| 第四章 小结 | 第113-114页 |
| 参考文献 | 第114-124页 |
| 文献综述 | 第124-142页 |
| 参考文献 | 第134-142页 |
| 致谢 | 第142-143页 |
| 附录 | 第143-148页 |
| 个人简历及在学期间发表学术论文与科研成果 | 第148页 |
