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转录因子SP1调控小鼠原始卵泡形成的机制研究

摘要第3-4页
Abstract第4页
缩略词表第5-8页
第一章 文献综述第8-53页
    1.1 PGCs的形成与迁移第9-12页
        1.1.1 PGCs的分化第9-10页
        1.1.2 PGCs的迁移与增殖第10-12页
    1.2 性别决定与分化第12-14页
    1.3 原始卵泡形成第14-47页
        1.3.1 卵母细胞的减数分裂第14-17页
        1.3.2 生殖细胞合胞体形成第17-19页
        1.3.3 细胞粘连第19-22页
        1.3.4 前颗粒细胞募集第22-24页
        1.3.5 合胞体破裂与原始卵泡形成第24-42页
        1.3.6 卵母细胞存活第42-47页
    1.4 转录因子SP1第47-51页
        1.4.1 转录因子与组织发育第47页
        1.4.2 SP1简介第47-48页
        1.4.3 SP1的具体作用机制第48-51页
        1.4.4 SP1的组织特异性功能第51页
    1.5 本研究的目的和意义第51-53页
第二章 实验材料和方法第53-81页
    2.1 实验动物第53页
    2.2 主要实验仪器、材料和试剂第53-56页
        2.2.1 主要实验仪器第53-54页
        2.2.2 主要实验材料第54页
        2.2.3 主要实验试剂第54-56页
        2.2.4 主要实验试剂盒第56页
    2.3 主要实验试剂配制第56-67页
        2.3.1 卵巢体外培养相关试剂第56-58页
        2.3.2 卵巢切片和免疫荧光相关试剂第58-59页
        2.3.3 染色体铺展相关试剂第59-61页
        2.3.4 载体构建相关试剂第61页
        2.3.5 蛋白免疫印迹相关试剂第61-64页
        2.3.6 染色质免疫共沉淀相关试剂第64-67页
    2.4 实验方法第67-81页
        2.4.1 胚胎和新生小鼠卵巢的获得和培养第67页
        2.4.2 慢病毒制备和卵巢注射第67-68页
        2.4.3 组织学分析第68-69页
        2.4.4 小鼠卵巢的肾被膜移植第69-70页
        2.4.5 染色体铺展及核相统计第70-72页
        2.4.6 原始卵泡体外重构第72-73页
        2.4.7 免疫荧光第73-74页
        2.4.8 TUNEL原位凋亡检测第74页
        2.4.9 蛋白免疫印迹(Western blotting)第74-76页
        2.4.10 实时荧光定量PCR (Real time PCR)第76-77页
        2.4.11 染色质免疫共沉淀(ChIP)第77-80页
        2.4.12 载体构建及荧光素酶活性测定第80页
        2.4.13 统计分析第80-81页
第三章 结果与分析第81-109页
    3.1 SP1调控合胞体破裂和原始卵泡形成第81-85页
    3.2 敲降Sp1对原始卵泡形成中卵母细胞的发育没有明显影响第85-89页
    3.3 SP1调控FOXL2阳性前颗粒细胞的发育第89-91页
    3.4 SP1调控FOXIL2阳性前颗粒细胞的募集与维持第91-94页
    3.5 前颗粒细胞特异性敲降Sp1抑制合胞体破裂和卵母细胞凋亡第94-96页
    3.6 Notch2介导了SP1在原始卵泡形成中的作用第96-102页
    3.7 SP1结合于Notch2启动子区调控其转录第102-105页
    3.8 敲降Sp1导致卵母细胞在青春期前大量丢失第105-109页
第四章 讨论第109-114页
    4.1 SP1通过控制前颗粒细胞发育调控原始卵泡形成第110-111页
    4.2 原始卵泡形成与卵母细胞凋亡之间的关系第111-112页
    4.3 前颗粒细胞发育与卵巢早衰之间的关系第112-113页
    4.4 SP1与其他转录因子之间的关系第113-114页
第五章 结论与展望第114-115页
    5.1 结论第114页
    5.2 展望第114-115页
参考文献第115-145页
致谢第145-148页
附录第148-157页
作者简介第157-158页

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