| 摘要 | 第5-8页 |
| Abstract | 第8-11页 |
| 中英文缩略词对照表 | 第15-17页 |
| 第1章 文献综述 | 第17-38页 |
| 1.1 过继性免疫细胞疗法的发展历程 | 第18-21页 |
| 1.2 CIK细胞的生物学特性 | 第21-24页 |
| 1.2.1 CIK细胞的免疫表型 | 第21页 |
| 1.2.2 CIK细胞的抗肿瘤机制 | 第21-24页 |
| 1.3 CIK细胞的临床应用 | 第24页 |
| 1.4 CIK细胞的体外扩增 | 第24-30页 |
| 1.4.1 体外培养模式 | 第25-28页 |
| 1.4.2 细胞密度 | 第28页 |
| 1.4.3 营养物及其代谢副产物 | 第28-29页 |
| 1.4.4 培养基和细胞因子 | 第29-30页 |
| 1.5 T细胞代谢特性与其体外扩增的关系 | 第30-36页 |
| 1.5.1 T细胞代谢特性 | 第30-34页 |
| 1.5.2 T细胞代谢特性与其体外扩增的关系 | 第34-36页 |
| 1.6 本文主要研究内容及其目的和意义 | 第36-38页 |
| 第2章 材料与方法 | 第38-51页 |
| 2.1 实验仪器设备 | 第38页 |
| 2.2 实验材料与试剂 | 第38-41页 |
| 2.2.1 脐血与外周血细胞分离试剂 | 第38-39页 |
| 2.2.2 肿瘤细胞系 | 第39页 |
| 2.2.3 血清与培养基 | 第39页 |
| 2.2.4 细胞因子 | 第39页 |
| 2.2.5 流式细胞术检测用试剂 | 第39-40页 |
| 2.2.6 免疫印迹实验(Western blotting)检测用试剂 | 第40-41页 |
| 2.2.7 荧光定量PCR分析所用试剂 | 第41页 |
| 2.3 实验方法 | 第41-51页 |
| 2.3.1 MNC细胞的分离 | 第41页 |
| 2.3.2 CD3~+细胞分离 | 第41页 |
| 2.3.3 CIK细胞的体外培养 | 第41-42页 |
| 2.3.4 细胞计数 | 第42页 |
| 2.3.5 细胞表型分析 | 第42页 |
| 2.3.6 CIK细胞杀伤活性检测 | 第42-43页 |
| 2.3.7 胞内颗粒酶B及穿孔素测定 | 第43页 |
| 2.3.8 细胞的IFN-γ和TNF-α分泌能力 | 第43-44页 |
| 2.3.9 培养物中CD107a~+细胞比例测定 | 第44页 |
| 2.3.10 细胞活化水平测定 | 第44页 |
| 2.3.11 凋亡细胞比例的测定 | 第44-45页 |
| 2.3.12 培养上清中代谢物含量测定 | 第45-46页 |
| 2.3.13 GLUT1基因表达水平测定 | 第46页 |
| 2.3.14 细胞表面GLUT1蛋白和CD98分子表达水平测定 | 第46-47页 |
| 2.3.15 免疫印迹法测定ASCT2、SNAT1和SNAT2蛋白表达水平 | 第47页 |
| 2.3.16 关键代谢酶的酶活测定 | 第47-48页 |
| 2.3.17 葡萄糖摄取能力测定 | 第48页 |
| 2.3.18 细胞胞内的代谢物浓度测定 | 第48-49页 |
| 2.3.19 胞外酸化速率和氧比消耗速率的测定 | 第49-50页 |
| 2.3.20 培养液pH和渗透压测定 | 第50页 |
| 2.3.21 计算流体动力学(CFD)模拟氧传质系数(k_L) | 第50页 |
| 2.3.22 统计学分析 | 第50-51页 |
| 第3章 培养模式对CIK细胞体外扩增特性及生理功能的影响 | 第51-64页 |
| 3.1 实验设计 | 第51-52页 |
| 3.2 培养模式对CIK细胞体外扩增特性的影响 | 第52-58页 |
| 3.2.1 总细胞扩增 | 第52-55页 |
| 3.2.2 各亚型细胞的比例和扩增 | 第55-57页 |
| 3.2.3 细胞活化水平 | 第57-58页 |
| 3.3 培养模式对扩增后CIK细胞生理功能的影响 | 第58-63页 |
| 3.4 讨论 | 第63页 |
| 3.5 本章小结 | 第63-64页 |
| 第4章 培养模式对CIK细胞代谢特性的影响及其机制 | 第64-87页 |
| 4.1 培养模式对CIK细胞物质代谢特性的影响及其机制 | 第64-76页 |
| 4.1.1 培养模式对葡萄糖代谢的影响及其机制 | 第64-71页 |
| 4.1.2 培养模式对谷氨酰胺代谢的影响及其机制 | 第71-76页 |
| 4.2 培养模式对CIK细胞能量代谢特性的影响及其机制 | 第76-82页 |
| 4.2.1 胞内ATP含量及ATP合成能力 | 第76-79页 |
| 4.2.2 氧化还原力 | 第79-82页 |
| 4.3 培养模式对理化环境的影响 | 第82-84页 |
| 4.3.1 pH和渗透压 | 第82-83页 |
| 4.3.2 氧 | 第83-84页 |
| 4.4 讨论 | 第84-85页 |
| 4.5 本章小结 | 第85-87页 |
| 第5章 动态培养模式下PB-CIK细胞的体外扩增 | 第87-95页 |
| 5.1 PB-CIK细胞的体外扩增特性 | 第87-91页 |
| 5.1.1 总细胞扩增 | 第87-88页 |
| 5.1.2 各亚型细胞的比例和扩增 | 第88-91页 |
| 5.2 扩增后PB-CIK细胞的生理功能 | 第91-93页 |
| 5.3 讨论 | 第93-94页 |
| 5.4 本章小结 | 第94-95页 |
| 第6章 全文总结与展望 | 第95-100页 |
| 6.1 全文总结 | 第95-98页 |
| 6.2 本文创新点 | 第98页 |
| 6.3 建议与展望 | 第98-100页 |
| 参考文献 | 第100-112页 |
| 致谢 | 第112-113页 |
| 研究成果 | 第113页 |
