| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 1 前言 | 第11-24页 |
| 1.1 木薯概述 | 第11-12页 |
| 1.1.1 木薯的价值与栽培现状 | 第11页 |
| 1.1.2 木薯基本生物学特征与生长发育情况 | 第11-12页 |
| 1.2 植物单糖转运蛋白研究进展 | 第12-16页 |
| 1.2.1 单糖在植物体内的运输 | 第12-13页 |
| 1.2.2 植物单糖转运蛋白基因家族 | 第13-14页 |
| 1.2.3 植物单糖转运蛋白的结构和性质 | 第14-15页 |
| 1.2.4 植物单糖转运蛋白的生物学功能 | 第15-16页 |
| 1.2.5 木薯单糖转运蛋白研究进展 | 第16页 |
| 1.3 植物原生质体研究进展 | 第16-18页 |
| 1.3.1 原生质体的制备 | 第17页 |
| 1.3.2 原生质体的转化 | 第17页 |
| 1.3.3 木薯原生质体研究进展 | 第17-18页 |
| 1.4 植物抗旱耐寒研究进展 | 第18-22页 |
| 1.4.1 干旱与低温对植物的危害 | 第18-19页 |
| 1.4.2 植物抗旱机制 | 第19-21页 |
| 1.4.3 木薯抗旱研究进展 | 第21-22页 |
| 1.5 本研究的目的和意义 | 第22-23页 |
| 1.6 技术路线 | 第23-24页 |
| 2 木薯叶肉原生质体制备及目标基因瞬时表达体系的建立 | 第24-32页 |
| 2.1 材料 | 第24页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第24页 |
| 2.1.2 实验药品和试剂 | 第24页 |
| 2.2 实验方法 | 第24-27页 |
| 2.2.1 大量提取质粒 | 第24-25页 |
| 2.2.2 木薯叶肉原生质体的制备 | 第25页 |
| 2.2.3 木薯叶肉原生质体的计数与活力检测 | 第25页 |
| 2.2.4 木薯叶肉原生质体的转化与瞬时表达转化率的测定 | 第25-26页 |
| 2.2.5 GFP在木薯叶肉原生质体上的亚细胞定位 | 第26-27页 |
| 2.3 结果分析 | 第27-31页 |
| 2.3.1 酶解液组合对木薯叶肉原生质体产量和活力的影响 | 第27-28页 |
| 2.3.2 木薯叶肉原生质体的形态大小 | 第28-29页 |
| 2.3.3 PEG4000浓度与转化时间对木薯原生质体转化效率的影响 | 第29-30页 |
| 2.3.4 GFP在木薯叶肉原生质体上的定位分析 | 第30-31页 |
| 2.4 讨论 | 第31-32页 |
| 2.4.1 木薯叶肉原生质体的制备 | 第31页 |
| 2.4.2 木薯原生质体的遗传转化与基因的瞬时表达 | 第31-32页 |
| 3 木薯单糖转运蛋白基因MeSTP7的克隆与功能验证 | 第32-59页 |
| 3.1 材料 | 第32页 |
| 3.1.1 植物材料 | 第32页 |
| 3.1.2 载体和菌株 | 第32页 |
| 3.1.3 主要实验药品和试剂 | 第32页 |
| 3.2 方法 | 第32-43页 |
| 3.2.1 干旱与低温胁迫下木薯己糖转运蛋白基因家族的表达模式分析 | 第32-33页 |
| 3.2.2 胁迫处理下木薯总RNA提取及cDNA合成 | 第33-35页 |
| 3.2.3 检测木薯己糖转运蛋白基因家族在干旱与低温胁迫下的表达 | 第35页 |
| 3.2.4 MeSTP7的克隆 | 第35-38页 |
| 3.2.5 MeSTP7基因的生物信息学分析 | 第38页 |
| 3.2.6 MeSTP7在酿酒酵母突变体中的异源表达 | 第38-40页 |
| 3.2.7 MeSTP7的亚细胞定位分析 | 第40页 |
| 3.2.8 植物过表达载体pCAMBIA99-1-MeSTP7的构建 | 第40-41页 |
| 3.2.9 MeSTP7在木薯中的表达模式分析 | 第41页 |
| 3.2.10 MeSTP7基因启动子的扩增 | 第41页 |
| 3.2.11 组织定位载体pMeSTP7-GUS的构建 | 第41-43页 |
| 3.3 结果分析 | 第43-56页 |
| 3.3.1 干旱与低温胁迫下木薯幼苗叶片的表型变化 | 第43页 |
| 3.3.2 木薯叶片总RNA提取与cDNA质量检测 | 第43-44页 |
| 3.3.3 干旱胁迫下木薯己糖转运蛋白基因家族的表达分析 | 第44页 |
| 3.3.4 低温温胁迫下木薯己糖转运蛋白基因家族的表达分析 | 第44-46页 |
| 3.3.5 MeSTP7的克隆 | 第46-47页 |
| 3.3.6 MeSTP7的基本生物学性质分析 | 第47页 |
| 3.3.7 MeSTP7的系统进化树分析 | 第47-48页 |
| 3.3.8 MeSTP7在酵母突变体中的异源表达 | 第48-49页 |
| 3.3.9 MeSTP7的亚细胞定位分析 | 第49-51页 |
| 3.3.10 植物过表达载体pCAMBIA99-1-MeSTP7的构建 | 第51页 |
| 3.3.11 MeSTP7的表达分析 | 第51-53页 |
| 3.3.12 MeSTP7基因启动子的克隆与组织定位载体的构建 | 第53-56页 |
| 3.4 讨论 | 第56-59页 |
| 3.4.1 响应干旱或低温胁迫的木薯己糖转运蛋白 | 第56页 |
| 3.4.2 MeSTP7在酵母突变体中的功能验证 | 第56-57页 |
| 3.4.3 MeSTP7的亚细胞定位 | 第57页 |
| 3.4.5 MeSTP7的表达分析 | 第57-58页 |
| 3.4.6 MeSTP7的抗旱性分析 | 第58-59页 |
| 4 结论 | 第59-60页 |
| 5 后续研究 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-69页 |
| 附录 | 第69-76页 |
| 附录一 实验主要仪器设备 | 第69-70页 |
| 附录二 实验常用培养基及成分 | 第70-71页 |
| 附录三 论文中所用定量引物序列 | 第71页 |
| 附录四 木薯己糖转运蛋白基因MeSTP7序列 | 第71-73页 |
| 附录五 不同物种上的单糖转运蛋白及其GenBank登录号 | 第73页 |
| 附录六 木薯己糖转运蛋白基因MeSTP7启动子序列 | 第73-75页 |
| 附录七 个人简介 | 第75-76页 |
| 致谢 | 第76页 |
