哈维弧菌T6SS中rbsB、vgrG、hcp基因的表达及功能分析
| 摘要 | 第4-7页 |
| abstract | 第7-10页 |
| 第一章 引言 | 第14-22页 |
| 1.1 哈维弧菌概述 | 第14-16页 |
| 1.1.1 生物学地位及生理生化特征 | 第14-15页 |
| 1.1.2 流行病学 | 第15页 |
| 1.1.3 毒力因子 | 第15-16页 |
| 1.2 Ⅵ型分泌系统概述 | 第16-20页 |
| 1.2.1 Ⅵ型分泌系统简介 | 第16-17页 |
| 1.2.2 结构与作用机制 | 第17-19页 |
| 1.2.3 调控机制 | 第19-20页 |
| 1.2.4 生物学功能研究进展 | 第20页 |
| 1.3 本研究的目的与意义 | 第20-22页 |
| 第二章 rbsB基因表达分析研究 | 第22-38页 |
| 2.1 材料与方法 | 第22-29页 |
| 2.1.1 实验菌株和质粒 | 第22页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第22-24页 |
| 2.1.3 实验方法 | 第24-29页 |
| 2.2 结果 | 第29-36页 |
| 2.2.1 rbsB的cDNA序列特征 | 第29-32页 |
| 2.2.2 重组质粒在大肠杆菌中表达结果 | 第32页 |
| 2.2.3 温度胁迫下rbsB基因的表达量变化 | 第32-33页 |
| 2.2.4 盐度胁迫下rbsB基因的表达量变化 | 第33-34页 |
| 2.2.5 pH对rbsB表达的影响 | 第34页 |
| 2.2.6 铁离子对rbsB表达的影响 | 第34-35页 |
| 2.2.7 铜离子对rbsB基因表达的影响 | 第35-36页 |
| 2.3 讨论 | 第36-38页 |
| 第三章 vgrG基因表达分析研究 | 第38-48页 |
| 3.1 材料与方法 | 第38-39页 |
| 3.2 结果 | 第39-46页 |
| 3.2.1 vgrG的cDNA序列特征 | 第39-42页 |
| 3.2.2 重组质粒在大肠杆菌中表达结果 | 第42页 |
| 3.2.3 温度胁迫下vgrG基因的表达量变化 | 第42-43页 |
| 3.2.4 盐度胁迫下vgrG基因的表达量变化 | 第43-44页 |
| 3.2.5 pH对vgrG表达的影响 | 第44页 |
| 3.2.6 铁离子对vgrG表达的影响 | 第44-45页 |
| 3.2.7 铜离子对vgrG表达的影响 | 第45-46页 |
| 3.3 讨论 | 第46-48页 |
| 第四章 hcp基因表达分析研究 | 第48-57页 |
| 4.1 材料与方法 | 第48页 |
| 4.2 实验结果 | 第48-55页 |
| 4.2.1 hcp的cDNA序列特征 | 第48-51页 |
| 4.2.2 重组质粒在大肠杆菌中表达结果 | 第51-52页 |
| 4.2.3 温度胁迫下hcp基因的表达量变化 | 第52页 |
| 4.2.4 盐度胁迫下hcp基因的表达量变化 | 第52-53页 |
| 4.2.5 pH对hcp基因表达的影响 | 第53页 |
| 4.2.6 铁离子对hcp基因表达的影响 | 第53-54页 |
| 4.2.7 铜离子对hcp基因表达的影响 | 第54-55页 |
| 4.3 讨论 | 第55-57页 |
| 第五章 哈维弧菌T6SS相关基因的敲除与功能研究 | 第57-70页 |
| 5.1 材料与方法 | 第57-63页 |
| 5.1.1 材料 | 第57-58页 |
| 5.1.2 方法 | 第58-63页 |
| 5.2 结果 | 第63-68页 |
| 5.2.1 质粒与目的基因上下游片段扩增结果 | 第63-64页 |
| 5.2.2 同源重组质粒的构建、转化与检测 | 第64页 |
| 5.2.3 哈维弧菌基因缺失株检测 | 第64-65页 |
| 5.2.4 hcpmRNA表达量变化 | 第65-66页 |
| 5.2.5 敲除株运动性能力探究 | 第66-67页 |
| 5.2.6 敲除株生物膜形成能力对比 | 第67-68页 |
| 5.2.7 敲除株对大肠杆菌的拮抗作用的影响 | 第68页 |
| 5.3 讨论 | 第68-70页 |
| 全文总结 | 第70-71页 |
| 参考文献 | 第71-79页 |
| 附录 | 第79-80页 |
| 致谢 | 第80页 |
