| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 缩略语表(Abbreviation) | 第10-12页 |
| 1.前言 | 第12-31页 |
| 1.1 狂犬病毒 | 第12-15页 |
| 1.1.1 狂犬病毒简介 | 第12-13页 |
| 1.1.2 狂犬病毒在神经环路研究的应用 | 第13-15页 |
| 1.1.3 其他相关嗜神经病毒 | 第15页 |
| 1.2 单细胞测序技术 | 第15-26页 |
| 1.2.1 单细胞测序技术简介 | 第15-17页 |
| 1.2.2 单细胞测序技术的发展 | 第17-19页 |
| 1.2.3 单细胞RNA-seq相关技术 | 第19-22页 |
| 1.2.4 单细胞RNA-seq技术的应用 | 第22-26页 |
| 1.3 大脑连接组 | 第26-29页 |
| 1.3.1 神经环路与连接组 | 第26-27页 |
| 1.3.2 神经环路示踪技术 | 第27-28页 |
| 1.3.3 PVN-LHA神经环路 | 第28-29页 |
| 1.4 实验设计 | 第29-30页 |
| 1.5 研究目的与意义 | 第30-31页 |
| 2.材料与方法 | 第31-46页 |
| 2.1 实验材料 | 第31-33页 |
| 2.1.1 实验动物 | 第31页 |
| 2.1.2 质粒、菌株、毒株与细胞 | 第31页 |
| 2.1.3 主要药品和试剂 | 第31页 |
| 2.1.4 主要培养基及其配制 | 第31-32页 |
| 2.1.5 主要缓冲液及其配制 | 第32页 |
| 2.1.6 主要实验设备 | 第32-33页 |
| 2.1.7 生信分析软件 | 第33页 |
| 2.2 实验方法 | 第33-46页 |
| 2.2.1 蛋白的诱导与表达 | 第33-34页 |
| 2.2.2 蛋白的纯化、组装与活性检测 | 第34-36页 |
| 2.2.3 细胞培养与传代 | 第36-37页 |
| 2.2.4 Smart-seq2建库 | 第37-43页 |
| 2.2.5 小鼠大脑立体注射 | 第43-44页 |
| 2.2.6 小鼠神经元分离 | 第44-45页 |
| 2.2.7 RNA-seq数据分析 | 第45页 |
| 2.2.8 脑片免疫组织化学实验 | 第45-46页 |
| 3.结果与分析 | 第46-57页 |
| 3.1 Tn5片段化酶的应用 | 第46-48页 |
| 3.1.1 Tn5的诱导表达 | 第46-47页 |
| 3.1.2 Tn5的纯化 | 第47页 |
| 3.1.3 Tn5的活性检测 | 第47-48页 |
| 3.2 Smart-seq2技术的建立 | 第48-50页 |
| 3.2.1 Smart-seq2在培养细胞上的应用 | 第48-49页 |
| 3.2.2 Smart-seq2在环路神经元上的应用 | 第49-50页 |
| 3.3 单细胞RNA-seq技术在PVN-LHA神经环路的应用 | 第50-57页 |
| 3.3.1 PVN-LHA神经环路的标记 | 第50-51页 |
| 3.3.2 PVN-LHA环路神经元单细胞测序分析 | 第51-54页 |
| 3.3.3 神经元类型的鉴定 | 第54-57页 |
| 4.讨论与展望 | 第57-60页 |
| 4.1 狂犬病毒对神经环路的示踪和标记 | 第57-58页 |
| 4.2 单细胞测序技术 | 第58页 |
| 4.3 课题展望 | 第58-60页 |
| 参考文献 | 第60-66页 |
| 致谢 | 第66页 |
