| 摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-11页 |
| 缩略词表 | 第12-13页 |
| 1 前言 | 第13-24页 |
| 1.1 乳房炎的研究进展 | 第13-16页 |
| 1.1.1 乳房炎的危害 | 第13页 |
| 1.1.2 乳房炎的致病机理 | 第13-14页 |
| 1.1.3 乳房炎的防治措施 | 第14-15页 |
| 1.1.4 乳房炎抗病育种研究进展 | 第15-16页 |
| 1.2 奶牛乳腺上皮细胞脂多糖(LPS)炎症模型 | 第16-20页 |
| 1.2.1 LPS诱导乳腺上皮细胞炎症反应机制 | 第16-19页 |
| 1.2.2 奶牛乳腺上皮细胞脂多糖(LPS)炎症模型研究进展 | 第19-20页 |
| 1.3 候选基因FABP3研究进展 | 第20-24页 |
| 1.3.1 FABPs概述 | 第20-21页 |
| 1.3.2 FABP3研究进展 | 第21-23页 |
| 1.3.3 其他重要FABPs调控炎症反应研究进展 | 第23-24页 |
| 2 研究目的与意义 | 第24-25页 |
| 3 材料与方法 | 第25-42页 |
| 3.1 实验材料 | 第25-29页 |
| 3.1.1 实验细胞、菌株 | 第25页 |
| 3.1.2 载体与质粒 | 第25-26页 |
| 3.1.3 工具酶与主要试剂 | 第26页 |
| 3.1.4 抗体、siRNA及主要化学试剂 | 第26-27页 |
| 3.1.5 培养基与抗生素及其配制 | 第27页 |
| 3.1.6 主要缓冲液与相关试剂及其配制 | 第27-28页 |
| 3.1.7 主要实验仪器及设备 | 第28-29页 |
| 3.1.8 分子生物学分析软件 | 第29页 |
| 3.2 实验方法 | 第29-42页 |
| 3.2.1 牛外周血白细胞(PBL)分离 | 第29页 |
| 3.2.2 牛乳腺上皮细胞(bMECs)复苏与培养 | 第29页 |
| 3.2.3 LPS、脂肪酸处理 | 第29-31页 |
| 3.2.4 RNA提取及反转录 | 第31-32页 |
| 3.2.5 检测FABPs表达水平 | 第32-33页 |
| 3.2.6 实时荧光定量PCR(qRT-PCR) | 第33-34页 |
| 3.2.7 免疫印迹 | 第34-36页 |
| 3.2.8 牛乳腺上皮细胞bMECs凋亡检测 | 第36-37页 |
| 3.2.9 FABP3基因沉默对LPS诱导的bMECs炎症反应的影响 | 第37-38页 |
| 3.2.10 过表达FABP3基因对LPS诱导的bMECs炎症反应的影响 | 第38-42页 |
| 3.2.11 统计学方法 | 第42页 |
| 4 结果与分析 | 第42-57页 |
| 4.1 奶牛PBL细胞和bMECs细胞中,FABPs基因mRNA表达水平分析 | 第42-43页 |
| 4.1.1 FABP3和FABP5在奶牛PBL细胞中高效表达 | 第42-43页 |
| 4.1.2 FABP3和FABP4在奶牛bMECs细胞中高效表达 | 第43页 |
| 4.2 LPS刺激对奶牛PBL细胞和bMECs细胞中FABP3表达的影响 | 第43-47页 |
| 4.2.1 LPS刺激显著促进奶牛PBL细胞中FABP3的表达 | 第43-44页 |
| 4.2.2 LPS奶牛乳腺上皮细胞(bMECs)炎症模型的构建 | 第44-46页 |
| 4.2.3 LPS刺激显著促进奶牛bMECs细胞中FABP3的表达 | 第46-47页 |
| 4.3 FABP3在LPS诱导的bMECs细胞炎症反应中的调控作用 | 第47-53页 |
| 4.3.1 干扰FABP3基因抑制LPS诱导的bMECs细胞炎症反应 | 第47-49页 |
| 4.3.2 FABP3超表达促进LPS诱导的bMECs细胞炎症反应 | 第49-51页 |
| 4.3.3 干扰FABP3可显著促进PPARα表达,抑制NF-κB信号通路的激活 | 第51-53页 |
| 4.4 脂肪酸对奶牛bMECs细胞中FABP3表达及LPS诱导的炎症反应的作用 | 第53-57页 |
| 4.4.1 不同脂肪酸对FABP3表达及炎症因子表达的作用 | 第53-55页 |
| 4.4.2 不同脂肪酸对LPS诱导的bMECs细胞炎症因子表达的作用 | 第55-57页 |
| 5 讨论 | 第57-63页 |
| 5.1 LPS诱导奶牛bMECs细胞炎症反应及上调FABP3的表达 | 第57-58页 |
| 5.2 FABP3对LPS诱导的乳腺上皮细胞炎症反应的影响 | 第58-60页 |
| 5.3 不同脂肪酸对FABP3表达及LPS诱导的乳腺上皮细胞炎症反应的影响 | 第60-63页 |
| 6 小结 | 第63-64页 |
| 6.1 结论 | 第63页 |
| 6.2 研究特色与创新 | 第63页 |
| 6.3 进一步研究内容 | 第63-64页 |
| 参考文献 | 第64-70页 |
| 致谢 | 第70页 |
