| 摘要 | 第4-7页 |
| abstract | 第7-10页 |
| 第一章 前言 | 第15-23页 |
| 第二章 人源DC细胞交叉呈递长肽抗原活化CTL细胞的研究 | 第23-55页 |
| 引言 | 第23页 |
| 2.1 实验材料 | 第23-25页 |
| 2.1.1 样本 | 第23页 |
| 2.1.2 细胞系 | 第23-24页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第24-25页 |
| 2.1.4 仪器 | 第25页 |
| 2.2 实验方法 | 第25-36页 |
| 2.2.1 人外周血淋巴细胞的分离 | 第26页 |
| 2.2.2 DC细胞的体外诱导和培养 | 第26-27页 |
| 2.2.3 DC细胞的形态学观察和表型检测 | 第27页 |
| 2.2.4 未成熟DC细胞对长肽抗原的吞噬作用 | 第27-28页 |
| 2.2.5 未成熟DC细胞交叉提呈抗原肽刺激初始T细胞 | 第28-29页 |
| 2.2.6 成熟DC细胞提呈抗原肽刺激初始T细胞 | 第29页 |
| 2.2.7 ELISA检测抗原体外刺激后T淋巴细胞IFN-γ的分泌 | 第29-30页 |
| 2.2.8 蛋白酶体抑制剂对长肽抗原交叉提呈的作用 | 第30-31页 |
| 2.2.9 钙黄绿素检测抗原体外刺激后T淋巴细胞杀伤活性 | 第31页 |
| 2.2.10 RT-PCR检测DC细胞CCL17的表达 | 第31-35页 |
| 2.2.11 ELISA检测DC培养过程中CCL17的分泌 | 第35-36页 |
| 2.2.12 趋化因子CCL17在DC细胞对抗原肽交叉提呈过程中的含量测定 | 第36页 |
| 2.3 实验结果 | 第36-48页 |
| 2.3.1 人外周血DC细胞的形态学观察 | 第36-37页 |
| 2.3.2 人外周血DC细胞的表型检测 | 第37-38页 |
| 2.3.3 荧光检测未成熟DC细胞对长肽抗原的吞噬作用 | 第38-39页 |
| 2.3.4 流式检测未成熟DC细胞对长肽抗原的吞噬作用 | 第39-40页 |
| 2.3.5 ELISA检测抗原体外刺激后T淋巴细胞IFN-γ的分泌 | 第40-41页 |
| 2.3.6 蛋白酶体抑制剂对长肽抗原交叉提呈的作用 | 第41-42页 |
| 2.3.7 体外刺激的CTL细胞对负载肽T2细胞的杀伤作用 | 第42-43页 |
| 2.3.8 体外刺激的CTL细胞对肝癌细胞的杀伤作用 | 第43-45页 |
| 2.3.9 DC细胞中CCL17蛋白的mRNA表达检测 | 第45页 |
| 2.3.10 DC细胞培养过程中CCL17的分泌情况 | 第45-46页 |
| 2.3.11 DC细胞成熟过程中CCL17的分泌情况 | 第46-47页 |
| 2.3.12 趋化因子CCL17在DC细胞对抗原肽交叉提呈过程中的含量 | 第47-48页 |
| 2.4 讨论 | 第48-52页 |
| 2.5 小结 | 第52-55页 |
| 第三章 趋化因子CCL17对DC细胞介导的交叉提呈抗原反应的影响 | 第55-81页 |
| 引言 | 第55页 |
| 3.1 实验材料 | 第55-57页 |
| 3.1.1 样本 | 第55-56页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第56页 |
| 3.1.3 仪器 | 第56-57页 |
| 3.2 实验方法 | 第57-63页 |
| 3.2.1 人外周血淋巴细胞的分离 | 第57页 |
| 3.2.2 DC细胞的体外诱导和培养 | 第57页 |
| 3.2.3 趋化因子CCL17中和抗体对DC细胞吞噬抗原肽的影响 | 第57-58页 |
| 3.2.4 趋化因子CCL17中和抗体对DC细胞交叉活化CTL的影响 | 第58页 |
| 3.2.5 趋化因子CCL17中和抗体对交叉提呈诱导的CTL的影响 | 第58-59页 |
| 3.2.6 利用CRISPR敲除DC中CCL17基因后对交叉提呈诱导CTL的影响 | 第59-62页 |
| 3.2.7 流式细胞仪检测趋化因子CCL17对交叉提呈诱导CTL细胞表型的影响 | 第62-63页 |
| 3.2.8 体外诱导的CTL细胞的趋化实验 | 第63页 |
| 3.3 实验结果 | 第63-76页 |
| 3.3.1 趋化因子CCL17中和抗体对DC细胞吞噬作用的影响 | 第63-64页 |
| 3.3.2 趋化因子CCL17中和抗体对CTL细胞分泌IFN-γ的影响 | 第64-65页 |
| 3.3.3 趋化因子CCL17中和抗体对交叉提呈诱导CTL细胞杀伤作用的影响 | 第65-66页 |
| 3.3.4 pX458-CCL17敲除质粒的构建 | 第66-69页 |
| 3.3.5 趋化因子CCL17敲除质粒电转DC细胞的效率 | 第69-70页 |
| 3.3.6 电转敲除质粒后DC细胞对抗原长肽的吞噬能力 | 第70-71页 |
| 3.3.7 电转敲除质粒后DC细胞对活化CTL细胞分泌IFN-γ的影响 | 第71-72页 |
| 3.3.8 敲除趋化因子CCL17对DC细胞交叉提呈功能的影响 | 第72-73页 |
| 3.3.9 趋化因子CCL17对交叉提呈诱导CTL细胞表型的影响 | 第73-74页 |
| 3.3.10 趋化因子CCL17对交叉提呈诱导CTL细胞趋化作用的影响 | 第74-76页 |
| 3.4 讨论 | 第76-78页 |
| 3.5 小结 | 第78-81页 |
| 第四章 总结与展望 | 第81-85页 |
| 参考文献 | 第85-90页 |
| 附录一 英文缩略词表 | 第90-91页 |
| 致谢 | 第91页 |
