| 摘要 | 第8-10页 |
| 前言 | 第10-14页 |
| 文献综述 | 第14-20页 |
| 1 黑色素生成相关研究 | 第14-16页 |
| 1.1 黑色素细胞 | 第14页 |
| 1.2 黑色素生成 | 第14-16页 |
| 2 GPNMB和PMEL的研究进展 | 第16-20页 |
| 2.1 GPNMB和PMEL的结构和区别 | 第16-18页 |
| 2.2 在黑素体中GPNMB和PMEL的定位与区别 | 第18页 |
| 2.3 在黑色素细胞GPNMB和PMEL的调控 | 第18页 |
| 2.4 PKD结构域区分GPNMB和PMEL | 第18-20页 |
| 实验一 GPNMB及其同系物PMEL在不同毛色小鼠皮肤的表达与定位 | 第20-30页 |
| 1 材料与方法 | 第20-21页 |
| 1.1 实验材料 | 第20页 |
| 1.2 试验仪器与试剂 | 第20-21页 |
| 2 实验方法 | 第21-26页 |
| 2.1 免疫组织化学 | 第21-22页 |
| 2.2 总蛋白的提取 | 第22-24页 |
| 2.3 RNA的提取 | 第24-25页 |
| 2.4 cDNA的合成 | 第25页 |
| 2.5 设计引物及PCR扩增 | 第25-26页 |
| 2.6 qRT-PCR的扩增 | 第26页 |
| 3 结果 | 第26-30页 |
| 3.1 免疫组化结果 | 第26页 |
| 3.2 Western blot实验结果 | 第26页 |
| 3.3 mRNA实验结果 | 第26-30页 |
| 实验二 GPNMB及其同系物PMEL在小鼠不同毛囊时期的表达与定位 | 第30-36页 |
| 1 材料与方法 | 第30页 |
| 1.1 实验材料 | 第30页 |
| 1.2 试验仪器与试剂 | 第30页 |
| 2 实验方法 | 第30-31页 |
| 2.1 HE染色 | 第30页 |
| 2.2 免疫组织化学 | 第30页 |
| 2.3 黑色素含量测定[140] | 第30-31页 |
| 2.4 Western Blot | 第31页 |
| 2.5 qRT-PCR | 第31页 |
| 3 结果 | 第31-36页 |
| 3.1 HE染色结果 | 第31页 |
| 3.2 免疫组化学结果 | 第31-33页 |
| 3.3 黑色素含量测定 | 第33页 |
| 3.4 Western blot实验结果 | 第33-34页 |
| 3.5 mRNA实验结果 | 第34-36页 |
| 实验三 GPNMB及其同系物PMEL对黑色素生成的影响 | 第36-50页 |
| 1 材料与方法 | 第36页 |
| 1.1 实验材料 | 第36页 |
| 1.2 试验仪器与试剂 | 第36页 |
| 2 实验方法 | 第36-38页 |
| 2.1 小鼠GPNMB、PMEL以及MITF核酸序列检索和目的基因克隆 | 第36-37页 |
| 2.2 小鼠GPNMB、PMEL以及MITF克隆载体和真核表达载体构建 | 第37-38页 |
| 2.3 黑色素细胞转染 | 第38页 |
| 2.4 黑色素含量测定 | 第38页 |
| 2.5 Western blot | 第38页 |
| 2.6 qRT-PCR | 第38页 |
| 3 结果 | 第38-50页 |
| 3.1 GPNMB全长PCR扩增结果 | 第38-39页 |
| 3.2 GPNMB克隆载体构建结果 | 第39页 |
| 3.3 GPNMB表达载体构建结果 | 第39-40页 |
| 3.4 GPNMB、PMEL和MITF真核表达载体结构 | 第40页 |
| 3.5 过表达GPNMB和PMEL后黑色素细胞的形态特征及转染效率观察 | 第40-41页 |
| 3.6 转染GPNMB和PMEL后其表达量和黑色素含量的变化 | 第41-43页 |
| 3.7 转染GPNMB和PMEL后MITF表达量的变化 | 第43页 |
| 3.8 转染MITF后GPNMB和PMEL表达量的变化 | 第43页 |
| 3.9 转染GPNMB和PMEL后MC1R和β-catenin表达量的变化 | 第43页 |
| 3.10 转染GPNMB和PMEL后SLC45A2表达量的变化 | 第43-47页 |
| 3.11 转染GPNMB和PMEL后酪氨酸酶家族表达量的变化 | 第47页 |
| 3.12 转染GPNMB和PMEL后OA1表达量的变化 | 第47页 |
| 3.13 转染GPNMB后PMEL表达量的变化以及转染PMEL后GPNMB表达量的变化 | 第47-50页 |
| 实验四 UVB对黑色素细胞GPNMB及其同系物PMEL的影响 | 第50-56页 |
| 1 材料与方法 | 第50页 |
| 1.1 实验材料 | 第50页 |
| 1.2 试验仪器与试剂 | 第50页 |
| 2 实验方法 | 第50-51页 |
| 2.1 UVB辐射条件和剂量 | 第50页 |
| 2.2 黑色素细胞活力的测定(MTT法) | 第50页 |
| 2.3 黑色素细胞UVB辐射培养 | 第50-51页 |
| 3 结果 | 第51-56页 |
| 3.1 UVB辐射对黑色素细胞活性的影响 | 第51页 |
| 3.2 UVB辐射不同时间对GPNMB和PMEL的影响 | 第51-52页 |
| 3.3 不同剂量UVB辐射细胞形态发生变化时GPNMB和PMEL的变化 | 第52-56页 |
| 讨论 | 第56-62页 |
| 1 GPNMB及其同系物PMEL在不同毛色小鼠皮肤的表达与定位 | 第56页 |
| 2 GPNMB及其同系物PMEL在不同毛嚢时期小鼠皮肤的表达与定位 | 第56-58页 |
| 3 GPNMB及其同系物PMEL对黑色素生成的影响 | 第58-60页 |
| 4 UVB对小鼠细胞GPNMB及其同系物PMEL的影响 | 第60-62页 |
| 全文结论及创新点 | 第62-64页 |
| 参考文献 | 第64-74页 |
| Abstract | 第74-76页 |
| 附录 (引物序列) | 第78-80页 |
| 中英文对照及缩略表 | 第80-82页 |
| 硕士期间文章发表情况 | 第82-84页 |
| 致谢 | 第84页 |
