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家蚕发育相关microRNA let-7和miR-2的功能研究

摘要第4-7页
Abstract第7-10页
缩略语表第11-15页
第一章 绪论第15-37页
    1.1 引言第15-16页
    1.2 家蚕作为空间生物学模式生物的研究进展第16-17页
    1.3 返回式卫星约束条件的地面匹配试验第17-19页
    1.4 miRNA的发现历史第19-20页
    1.5 昆虫miRNA的鉴定第20-25页
        1.5.1 果蝇第21页
        1.5.2 蚊子第21-22页
        1.5.3 蜜蜂第22-23页
        1.5.4 蚜虫第23页
        1.5.5 蝗虫第23页
        1.5.6 赤拟谷盗第23-24页
        1.5.7 家蚕第24-25页
    1.6 miRNA的生物合成和作用机制第25-27页
    1.7 昆虫miRNA在发育中的作用第27-31页
        1.7.1 生殖细胞发育相关miRNA第29页
        1.7.2 翅发育相关miRNA第29-30页
        1.7.3 肌肉发育相关miRNA第30-31页
        1.7.4 神经发生相关miRNA第31页
        1.7.5 细胞凋亡相关miRNA第31页
    1.8 miRNAlet-7研究进展第31-34页
    1.9 miR-2研究进展第34-36页
    1.10 本章小结第36-37页
第二章 基于miRNAsponge技术的家蚕let-7功能研究第37-67页
    2.1 引言第37-38页
    2.2 材料与方法第38-54页
        2.2.1 实验材料第38页
        2.2.2 miRNAsponge技术第38-40页
        2.2.3 质粒构建第40-44页
        2.2.4 转基因sponge家蚕品系的建立第44-47页
        2.2.5 细胞验证实验第47-50页
        2.2.6 miRNA的表达验证第50-52页
        2.2.7 靶基因预测软件第52-53页
        2.2.8 靶基因表达量验证第53-54页
        2.2.9 数据分析第54页
    2.3 结果第54-63页
        2.3.1 BmLet-7sponge转基因载体构建第54-56页
        2.3.2 转基因品系建立和插入位点分析第56-58页
        2.3.3 表型分析第58-59页
        2.3.4 靶基因预测分析第59-60页
        2.3.5 sponge效果验证和靶基因分析第60-62页
        2.3.6 细胞验证第62-63页
    2.4 讨论第63-66页
    2.5 本章小结第66-67页
第三章 家蚕miR-2对翅发育的调控作用第67-97页
    3.1 引言第67-68页
    3.2 材料与方法第68-79页
        3.2.1 实验材料第68页
        3.2.2 miRNA过表达质粒的构建第68-70页
        3.2.3 miRNA的表达验证第70-71页
        3.2.4 靶基因预测软件第71页
        3.2.5 靶基因的表达验证第71-74页
        3.2.6 细胞验证第74-76页
        3.2.7 CRISPR/Cas9技术第76-79页
    3.3 结果第79-94页
        3.3.1 miR-2cluster过表达品系的构建第79-81页
        3.3.2 转基因品系插入位点检测第81-82页
        3.3.3 表型观察第82-84页
        3.3.4 miRNA过表达检测第84-85页
        3.3.5 靶基因预测分析第85-87页
        3.3.6 靶基因的细胞验证第87-89页
        3.3.7 靶基因的体内验证第89-91页
        3.3.8 靶基因敲除品系的表型及相关分析第91-94页
    3.4 讨论第94-95页
    3.5 本章小结第95-97页
第四章 结论和展望第97-99页
    4.1 结论第97页
    4.2 展望第97-99页
参考文献第99-117页
附录一 分子克隆序列第117-119页
附录二 实验主要仪器设备第119-121页
致谢第121-123页
攻读博士学位期间发表的学术论文和参加科研情况第123-126页

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