摘要 | 第5-7页 |
ABSTRACT | 第7-8页 |
英文缩略词表 | 第12-13页 |
第一章 绪论 | 第13-27页 |
1.1 蛋白酶概述 | 第13-15页 |
1.1.1 蛋白酶的来源及分类 | 第13-14页 |
1.1.2 蛋白酶的应用 | 第14页 |
1.1.3 重组米曲霉中性蛋白酶(rNpI)的研究概况 | 第14-15页 |
1.2 生物活性肽研究及其进展 | 第15-16页 |
1.2.1 生物活性肽的概述 | 第15页 |
1.2.2 生物活性肽研究进展 | 第15-16页 |
1.3 抗氧化肽的研究 | 第16-19页 |
1.3.1 抗氧化肽的概述 | 第16页 |
1.3.2 抗氧化肽的作用机制 | 第16-17页 |
1.3.3 抗氧化性的测定方法 | 第17-19页 |
1.3.3.1 氧自由基清除能力(ORAC)法 | 第17页 |
1.3.3.2 DPPH自由基清除能力法 | 第17-18页 |
1.3.3.3 还原力法 | 第18页 |
1.3.3.4 铁原子还原抗氧化剂能力法(FRAP) | 第18页 |
1.3.3.5 ABTS法 | 第18-19页 |
1.3.4 酶解法生产抗氧化活性肽 | 第19页 |
1.4 ACE抑制活性肽的研究 | 第19-24页 |
1.4.1 ACE抑制肽概述 | 第19-20页 |
1.4.2 ACE抑制肽的制备方法 | 第20-22页 |
1.4.3 ACE抑制肽的作用机制及其构效关系 | 第22-23页 |
1.4.4 ACE抑制肽的研究方法 | 第23-24页 |
1.4.5 ACE抑制肽的研究进展 | 第24页 |
1.5 课题意义及研究内容 | 第24-27页 |
1.5.1 课题意义 | 第24-25页 |
1.5.2 研究内容 | 第25-27页 |
第二章 rNpI体外蛋白水解、苦味评价及其在水产饲料添加中的研究 | 第27-43页 |
2.1 实验器材 | 第27-28页 |
2.1.1 菌株 | 第27页 |
2.1.2 蛋白质底物 | 第27页 |
2.1.3 酶与其他主要试剂 | 第27-28页 |
2.1.4 培养基及储液 | 第28页 |
2.1.5 主要实验仪器与设备 | 第28页 |
2.2 实验方法 | 第28-34页 |
2.2.1 重组米曲霉中性蛋白酶(rNpI)在毕赤酵母中的表达 | 第28-29页 |
2.2.2 酶活的测定 | 第29-30页 |
2.2.3 蛋白水解液的制备 | 第30页 |
2.2.3.1 大豆蛋白水解液的制备 | 第30页 |
2.2.3.2 酪蛋白水解液的制备 | 第30页 |
2.2.3.3 花生蛋白水解液的制备 | 第30页 |
2.2.4 甲醛滴定法测水解度(DH) | 第30-31页 |
2.2.5 蛋白水解产物苦味评价的方法 | 第31页 |
2.2.6 大豆蛋白水解产物肽分子量测定 | 第31页 |
2.2.7 BCA法测定蛋白质浓度 | 第31-32页 |
2.2.7.1 BCA法测定蛋白浓度实验原理 | 第31-32页 |
2.2.7.2 BCA法测定蛋白浓度实验步骤 | 第32页 |
2.2.8 在鲫鱼饲料中添加rNpI的研究 | 第32-34页 |
2.3 结果与分析 | 第34-41页 |
2.3.1 蛋白水解产物水解度的测定结果 | 第34-36页 |
2.3.2 蛋白水解产物苦味评价结果 | 第36-38页 |
2.3.2.1 大豆蛋白水解产物苦味评价结果 | 第36-37页 |
2.3.2.2 酪蛋白水解产物苦味评价结果 | 第37页 |
2.3.2.3 花生蛋白水解产物苦味评价结果 | 第37-38页 |
2.3.3 水解大豆蛋白产物肽分子量分布测定结果 | 第38-40页 |
2.3.4 在鲫鱼饲料中添加rNpI的研究结果 | 第40-41页 |
2.4 本章小结 | 第41-43页 |
第三章 rNpI水解大豆蛋白产物抗氧化性研究 | 第43-52页 |
3.1 实验器材 | 第44页 |
3.1.1. 蛋白水解物 | 第44页 |
3.1.2 主要试剂及材料 | 第44页 |
3.1.3 主要实验仪器与设备 | 第44页 |
3.2 实验方法 | 第44-46页 |
3.2.1 rNpI水解大豆蛋白产物抗氧化分析 | 第44-46页 |
3.2.1.1 氧自由基清除能力(ORAC) | 第44-45页 |
3.2.1.2 DPPH自由基清除能力 | 第45-46页 |
3.2.1.3 还原力的测定 | 第46页 |
3.2.2 rNpI水解大豆多肽组分的抗氧化性测定 | 第46页 |
3.3 结果与分析 | 第46-50页 |
3.3.1 rNpI水解大豆蛋白产物抗氧化性结果 | 第46-49页 |
3.3.1.1 rNpI水解大豆蛋白产物氧自由基清除能力(ORAC)结果 | 第46-47页 |
3.3.1.2 rNpI水解大豆蛋白产物DPPH自由基清除能力结果 | 第47-48页 |
3.3.1.3 rNpI水解大豆蛋白产物还原力分析结果 | 第48-49页 |
3.3.2 rNpI水解大豆蛋白产物抗氧化性与分子量大小的关系 | 第49-50页 |
3.4 本章小结 | 第50-52页 |
第四章 rNpI水解大豆蛋白产物ACE抑制活性的研究 | 第52-60页 |
4.1 实验器材 | 第52-53页 |
4.1.1 大豆蛋白和酪蛋白水解液 | 第52页 |
4.1.2 主要实验试剂 | 第52-53页 |
4.1.3 其他实验材料 | 第53页 |
4.1.4 主要实验仪器与设备 | 第53页 |
4.2 实验方法 | 第53-55页 |
4.2.1 兔肺中提取ACE | 第53页 |
4.2.2 马尿酸线性关系的测定 | 第53页 |
4.2.3 ACE活性的测定 | 第53-54页 |
4.2.4 ACE抑制率的测定 | 第54-55页 |
4.2.5 ACE半抑制浓度IC50的测定 | 第55页 |
4.3 实验结果与分析 | 第55-59页 |
4.3.1 rNpI大豆水解产物浓度对ACE抑制率的影响 | 第55-56页 |
4.3.2 rNpI水解酪蛋白产物ACE抑制率及其IC50的确定 | 第56-58页 |
4.3.3 rNpI水解大豆蛋白E/S对ACE抑制活性(IC50)的影响 | 第58-59页 |
4.4 本章小结 | 第59-60页 |
结论与展望 | 第60-62页 |
一、本文的结论 | 第60-61页 |
二、本论文的创新性 | 第61页 |
三、展望 | 第61-62页 |
参考文献 | 第62-70页 |
攻读硕士学位期间取得的研究成果 | 第70-71页 |
致谢 | 第71-72页 |
附件 | 第72页 |