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重组米曲霉中性蛋白酶(rNpI)在蛋白质水解中的应用研究

摘要第5-7页
ABSTRACT第7-8页
英文缩略词表第12-13页
第一章 绪论第13-27页
    1.1 蛋白酶概述第13-15页
        1.1.1 蛋白酶的来源及分类第13-14页
        1.1.2 蛋白酶的应用第14页
        1.1.3 重组米曲霉中性蛋白酶(rNpI)的研究概况第14-15页
    1.2 生物活性肽研究及其进展第15-16页
        1.2.1 生物活性肽的概述第15页
        1.2.2 生物活性肽研究进展第15-16页
    1.3 抗氧化肽的研究第16-19页
        1.3.1 抗氧化肽的概述第16页
        1.3.2 抗氧化肽的作用机制第16-17页
        1.3.3 抗氧化性的测定方法第17-19页
            1.3.3.1 氧自由基清除能力(ORAC)法第17页
            1.3.3.2 DPPH自由基清除能力法第17-18页
            1.3.3.3 还原力法第18页
            1.3.3.4 铁原子还原抗氧化剂能力法(FRAP)第18页
            1.3.3.5 ABTS法第18-19页
        1.3.4 酶解法生产抗氧化活性肽第19页
    1.4 ACE抑制活性肽的研究第19-24页
        1.4.1 ACE抑制肽概述第19-20页
        1.4.2 ACE抑制肽的制备方法第20-22页
        1.4.3 ACE抑制肽的作用机制及其构效关系第22-23页
        1.4.4 ACE抑制肽的研究方法第23-24页
        1.4.5 ACE抑制肽的研究进展第24页
    1.5 课题意义及研究内容第24-27页
        1.5.1 课题意义第24-25页
        1.5.2 研究内容第25-27页
第二章 rNpI体外蛋白水解、苦味评价及其在水产饲料添加中的研究第27-43页
    2.1 实验器材第27-28页
        2.1.1 菌株第27页
        2.1.2 蛋白质底物第27页
        2.1.3 酶与其他主要试剂第27-28页
        2.1.4 培养基及储液第28页
        2.1.5 主要实验仪器与设备第28页
    2.2 实验方法第28-34页
        2.2.1 重组米曲霉中性蛋白酶(rNpI)在毕赤酵母中的表达第28-29页
        2.2.2 酶活的测定第29-30页
        2.2.3 蛋白水解液的制备第30页
            2.2.3.1 大豆蛋白水解液的制备第30页
            2.2.3.2 酪蛋白水解液的制备第30页
            2.2.3.3 花生蛋白水解液的制备第30页
        2.2.4 甲醛滴定法测水解度(DH)第30-31页
        2.2.5 蛋白水解产物苦味评价的方法第31页
        2.2.6 大豆蛋白水解产物肽分子量测定第31页
        2.2.7 BCA法测定蛋白质浓度第31-32页
            2.2.7.1 BCA法测定蛋白浓度实验原理第31-32页
            2.2.7.2 BCA法测定蛋白浓度实验步骤第32页
        2.2.8 在鲫鱼饲料中添加rNpI的研究第32-34页
    2.3 结果与分析第34-41页
        2.3.1 蛋白水解产物水解度的测定结果第34-36页
        2.3.2 蛋白水解产物苦味评价结果第36-38页
            2.3.2.1 大豆蛋白水解产物苦味评价结果第36-37页
            2.3.2.2 酪蛋白水解产物苦味评价结果第37页
            2.3.2.3 花生蛋白水解产物苦味评价结果第37-38页
        2.3.3 水解大豆蛋白产物肽分子量分布测定结果第38-40页
        2.3.4 在鲫鱼饲料中添加rNpI的研究结果第40-41页
    2.4 本章小结第41-43页
第三章 rNpI水解大豆蛋白产物抗氧化性研究第43-52页
    3.1 实验器材第44页
        3.1.1. 蛋白水解物第44页
        3.1.2 主要试剂及材料第44页
        3.1.3 主要实验仪器与设备第44页
    3.2 实验方法第44-46页
        3.2.1 rNpI水解大豆蛋白产物抗氧化分析第44-46页
            3.2.1.1 氧自由基清除能力(ORAC)第44-45页
            3.2.1.2 DPPH自由基清除能力第45-46页
            3.2.1.3 还原力的测定第46页
        3.2.2 rNpI水解大豆多肽组分的抗氧化性测定第46页
    3.3 结果与分析第46-50页
        3.3.1 rNpI水解大豆蛋白产物抗氧化性结果第46-49页
            3.3.1.1 rNpI水解大豆蛋白产物氧自由基清除能力(ORAC)结果第46-47页
            3.3.1.2 rNpI水解大豆蛋白产物DPPH自由基清除能力结果第47-48页
            3.3.1.3 rNpI水解大豆蛋白产物还原力分析结果第48-49页
        3.3.2 rNpI水解大豆蛋白产物抗氧化性与分子量大小的关系第49-50页
    3.4 本章小结第50-52页
第四章 rNpI水解大豆蛋白产物ACE抑制活性的研究第52-60页
    4.1 实验器材第52-53页
        4.1.1 大豆蛋白和酪蛋白水解液第52页
        4.1.2 主要实验试剂第52-53页
        4.1.3 其他实验材料第53页
        4.1.4 主要实验仪器与设备第53页
    4.2 实验方法第53-55页
        4.2.1 兔肺中提取ACE第53页
        4.2.2 马尿酸线性关系的测定第53页
        4.2.3 ACE活性的测定第53-54页
        4.2.4 ACE抑制率的测定第54-55页
        4.2.5 ACE半抑制浓度IC50的测定第55页
    4.3 实验结果与分析第55-59页
        4.3.1 rNpI大豆水解产物浓度对ACE抑制率的影响第55-56页
        4.3.2 rNpI水解酪蛋白产物ACE抑制率及其IC50的确定第56-58页
        4.3.3 rNpI水解大豆蛋白E/S对ACE抑制活性(IC50)的影响第58-59页
    4.4 本章小结第59-60页
结论与展望第60-62页
    一、本文的结论第60-61页
    二、本论文的创新性第61页
    三、展望第61-62页
参考文献第62-70页
攻读硕士学位期间取得的研究成果第70-71页
致谢第71-72页
附件第72页

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