| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4页 |
| 第一章 绪论 | 第7-16页 |
| 1.1 GLP-1及其类似物的研究进展 | 第7-9页 |
| 1.1.1 GLP-1简介 | 第7-8页 |
| 1.1.2 GLP-1及其类似物相关性研究 | 第8-9页 |
| 1.2 多肽蛋白类药物口服给药的概述 | 第9-13页 |
| 1.2.1 多肽蛋白类药物的简介 | 第9-10页 |
| 1.2.2 多肽蛋白类药物口服给药的优势和障碍 | 第10页 |
| 1.2.3 提高多肽蛋白类药物口服吸收的策略 | 第10-13页 |
| 1.2.4 GLP-1类似物口服给药的研究进展 | 第13页 |
| 1.3 Caco-2细胞模型的简介 | 第13-14页 |
| 1.4 立题背景及研究内容 | 第14-16页 |
| 第二章 材料与方法 | 第16-26页 |
| 2.1 实验材料 | 第16-18页 |
| 2.1.1 质粒和细胞株 | 第16页 |
| 2.1.2 实验试剂 | 第16-17页 |
| 2.1.3 实验耗材与仪器 | 第17-18页 |
| 2.1.4 培养基与相关溶液的配制 | 第18页 |
| 2.2 实验方法 | 第18-26页 |
| 2.2.1 细胞的培养 | 第18-19页 |
| 2.2.2 质粒(pEGFP-N1/hGLP-1R-EGFP)的构建 | 第19页 |
| 2.2.3 GLP-1类似物活性检测CHO细胞模型的建立 | 第19页 |
| 2.2.4 细胞模型的流式细胞术分析验证 | 第19页 |
| 2.2.5 激光共聚焦实验检测绿色荧光分布 | 第19-20页 |
| 2.2.6 细胞模型的RT-PCR验证 | 第20页 |
| 2.2.7 单克隆细胞模型稳定性实验 | 第20页 |
| 2.2.8 GLP-1类似物的细胞模型活性检测 | 第20页 |
| 2.2.9 FBS及其单一组分BSA对GLP-1-类似物细胞模型活性检测的影响 | 第20-21页 |
| 2.2.10 Caco-2单层细胞模型的构建 | 第21页 |
| 2.2.11 Caco-2细胞建模过程中跨膜电阻的变化 | 第21页 |
| 2.2.12 AP侧与BL侧碱性磷酸酶的表达差异 | 第21页 |
| 2.2.13 酚红通透性实验 | 第21-22页 |
| 2.2.14 透射式电子显微镜观察Caco-2细胞AP侧微绒毛结构 | 第22页 |
| 2.2.15 免疫荧光染色观察Caco-2细胞的紧密连接 | 第22页 |
| 2.2.16 胃肠道高吸收的6种药物对Caco-2细胞的毒理实验 | 第22-23页 |
| 2.2.17 药物跨膜转运实验 | 第23页 |
| 2.2.18 药物分子的结构修饰与验证 | 第23-24页 |
| 2.2.19 不同粒径纳米金的制备 | 第24页 |
| 2.2.20 不同粒径纳米金的表征 | 第24页 |
| 2.2.21 纳米金的药物分子修饰分析 | 第24-25页 |
| 2.2.22 药物修饰纳米金跨膜转运实验 | 第25-26页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第26-42页 |
| 3.1 GLP-1类似物活性检测细胞模型的建立与其功能分析 | 第26-32页 |
| 3.1.1 pEGFP-N1/hGLP-1R-EGFP的构建与验证 | 第26页 |
| 3.1.2 单克隆细胞模型的构建 | 第26-28页 |
| 3.1.3 单克隆细胞模型验证及其稳定性测定 | 第28-31页 |
| 3.1.4 FBS及其单一组分BSA对GLP-1-类似物活性检测的影响 | 第31-32页 |
| 3.2 Caco-2细胞模型的构建与验证 | 第32-34页 |
| 3.2.1 Caco-2细胞模型的构建 | 第32-33页 |
| 3.2.2 苯酚红的通透性实验 | 第33-34页 |
| 3.2.3 免疫荧光染色观察Caco-2细胞的紧密连接 | 第34页 |
| 3.3 口服高吸收药物分子的筛选与结构修饰 | 第34-36页 |
| 3.3.1 筛选的口服高吸收药物对Caco-2细胞的毒性作用 | 第34-35页 |
| 3.3.2 药物跨膜转运效率再验证 | 第35-36页 |
| 3.3.3 药物分子结构修饰 | 第36页 |
| 3.4 纳米金的药物修饰与Caco-2细胞模型的跨膜验证 | 第36-42页 |
| 3.4.1 不同粒径纳米金的制备与表征 | 第36-37页 |
| 3.4.2 纳米金的药物分子修饰分析 | 第37-39页 |
| 3.4.3 药物修饰纳米金跨膜转运效率的探索 | 第39-42页 |
| 主要结论与展望 | 第42-44页 |
| 主要结论 | 第42-43页 |
| 展望 | 第43-44页 |
| 致谢 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-49页 |
| 附录一:药物修饰分子的核磁验证 | 第49-51页 |
| 附录二:作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第51页 |
