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GLP-1类似物受体分析方法的建立及其口服给药的初步探索

摘要第3-4页
Abstract第4页
第一章 绪论第7-16页
    1.1 GLP-1及其类似物的研究进展第7-9页
        1.1.1 GLP-1简介第7-8页
        1.1.2 GLP-1及其类似物相关性研究第8-9页
    1.2 多肽蛋白类药物口服给药的概述第9-13页
        1.2.1 多肽蛋白类药物的简介第9-10页
        1.2.2 多肽蛋白类药物口服给药的优势和障碍第10页
        1.2.3 提高多肽蛋白类药物口服吸收的策略第10-13页
        1.2.4 GLP-1类似物口服给药的研究进展第13页
    1.3 Caco-2细胞模型的简介第13-14页
    1.4 立题背景及研究内容第14-16页
第二章 材料与方法第16-26页
    2.1 实验材料第16-18页
        2.1.1 质粒和细胞株第16页
        2.1.2 实验试剂第16-17页
        2.1.3 实验耗材与仪器第17-18页
        2.1.4 培养基与相关溶液的配制第18页
    2.2 实验方法第18-26页
        2.2.1 细胞的培养第18-19页
        2.2.2 质粒(pEGFP-N1/hGLP-1R-EGFP)的构建第19页
        2.2.3 GLP-1类似物活性检测CHO细胞模型的建立第19页
        2.2.4 细胞模型的流式细胞术分析验证第19页
        2.2.5 激光共聚焦实验检测绿色荧光分布第19-20页
        2.2.6 细胞模型的RT-PCR验证第20页
        2.2.7 单克隆细胞模型稳定性实验第20页
        2.2.8 GLP-1类似物的细胞模型活性检测第20页
        2.2.9 FBS及其单一组分BSA对GLP-1-类似物细胞模型活性检测的影响第20-21页
        2.2.10 Caco-2单层细胞模型的构建第21页
        2.2.11 Caco-2细胞建模过程中跨膜电阻的变化第21页
        2.2.12 AP侧与BL侧碱性磷酸酶的表达差异第21页
        2.2.13 酚红通透性实验第21-22页
        2.2.14 透射式电子显微镜观察Caco-2细胞AP侧微绒毛结构第22页
        2.2.15 免疫荧光染色观察Caco-2细胞的紧密连接第22页
        2.2.16 胃肠道高吸收的6种药物对Caco-2细胞的毒理实验第22-23页
        2.2.17 药物跨膜转运实验第23页
        2.2.18 药物分子的结构修饰与验证第23-24页
        2.2.19 不同粒径纳米金的制备第24页
        2.2.20 不同粒径纳米金的表征第24页
        2.2.21 纳米金的药物分子修饰分析第24-25页
        2.2.22 药物修饰纳米金跨膜转运实验第25-26页
第三章 结果与讨论第26-42页
    3.1 GLP-1类似物活性检测细胞模型的建立与其功能分析第26-32页
        3.1.1 pEGFP-N1/hGLP-1R-EGFP的构建与验证第26页
        3.1.2 单克隆细胞模型的构建第26-28页
        3.1.3 单克隆细胞模型验证及其稳定性测定第28-31页
        3.1.4 FBS及其单一组分BSA对GLP-1-类似物活性检测的影响第31-32页
    3.2 Caco-2细胞模型的构建与验证第32-34页
        3.2.1 Caco-2细胞模型的构建第32-33页
        3.2.2 苯酚红的通透性实验第33-34页
        3.2.3 免疫荧光染色观察Caco-2细胞的紧密连接第34页
    3.3 口服高吸收药物分子的筛选与结构修饰第34-36页
        3.3.1 筛选的口服高吸收药物对Caco-2细胞的毒性作用第34-35页
        3.3.2 药物跨膜转运效率再验证第35-36页
        3.3.3 药物分子结构修饰第36页
    3.4 纳米金的药物修饰与Caco-2细胞模型的跨膜验证第36-42页
        3.4.1 不同粒径纳米金的制备与表征第36-37页
        3.4.2 纳米金的药物分子修饰分析第37-39页
        3.4.3 药物修饰纳米金跨膜转运效率的探索第39-42页
主要结论与展望第42-44页
    主要结论第42-43页
    展望第43-44页
致谢第44-45页
参考文献第45-49页
附录一:药物修饰分子的核磁验证第49-51页
附录二:作者在攻读硕士学位期间发表的论文第51页

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