| 摘要 | 第4-6页 |
| abstract | 第6-7页 |
| 缩略词（Abbreviation） | 第8-10页 |
| 第一章 文献综述 哺乳动物精卵融合研究的进展 | 第10-21页 |
| 1.1 精子获能 | 第11-12页 |
| 1.2 顶体反应 | 第12-13页 |
| 1.3 精子穿刺透明带 | 第13-14页 |
| 1.4 精卵融合及其相关蛋白分子 | 第14-21页 |
| 1.4.1 精子一侧的必需蛋白分子 | 第14-18页 |
| 1.4.2 卵子一侧的必需蛋白分子 | 第18-21页 |
| 第二章 实验研究 与大鼠CRISP2相互作用蛋白的初步筛选 | 第21-62页 |
| 2.1 引言 | 第21-24页 |
| 2.2 材料与方法 | 第24-42页 |
| 2.2.1 实验材料 | 第24-27页 |
| 2.2.2 实验方法 | 第27-42页 |
| 2.3 实验结果 | 第42-59页 |
| 2.3.1 大鼠睾丸总RNA的提取 | 第42页 |
| 2.3.2 大鼠睾丸cDNA的检测 | 第42-43页 |
| 2.3.3 大鼠crisp2的cDNA的克隆及琼脂糖凝胶电泳检测 | 第43页 |
| 2.3.4 大鼠pEASY-Blunt-crisp2重组载体的构建及双酶切鉴定 | 第43页 |
| 2.3.5 重组质粒pEASY-Blunt-crisp2测序结果的相关生物信息学分析 | 第43-48页 |
| 2.3.6 大鼠crisp2cDNA片段的亚克隆及电泳检测 | 第48页 |
| 2.3.7 过渡载体pMD19T-crisp2的构建及双酶切鉴定 | 第48-49页 |
| 2.3.8 原核表达重组质粒pGEX-crisp2的构建及鉴定 | 第49页 |
| 2.3.9 重组质粒pGEX-crisp2的原核表达及CRISP2-GST融合蛋白的SDS-PAGE鉴定 | 第49-50页 |
| 2.3.10 CRISP2-GST融合蛋白的Western-Blotting检测 | 第50-51页 |
| 2.3.11 纯化的CRISP2-GST融合蛋白的浓度测定(Bradford法) | 第51页 |
| 2.3.12 利用WesternBlotting检测小鼠抗大鼠CRISP2-GST抗血清 | 第51-52页 |
| 2.3.13 用酵母双杂交筛选大鼠卵巢cDNA文库中与CRISP2互作的蛋白 | 第52-54页 |
| 2.3.14 重组诱饵载体pGBK-crisp2的自激活检测及毒性检测 | 第54页 |
| 2.3.15 重组载体pGBK-crisp2转化酵母菌落的PCR鉴定 | 第54页 |
| 2.3.16 二缺(DDO/X/A)固体培养基初步筛选阳性克隆 | 第54-55页 |
| 2.3.17 文库筛选效率及其筛选到的克隆数目 | 第55-56页 |
| 2.3.18 四缺板(QDO/X/A)上生长的蓝色克隆 | 第56页 |
| 2.3.19 四缺(QDO/X/A)固体培养基上蓝色阳性克隆的菌落PCR鉴定 | 第56-57页 |
| 2.3.20 阳性克隆PCR产物的测序结果分析 | 第57-59页 |
| 2.4 讨论 | 第59-61页 |
| 2.5 总结 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-66页 |
| 致谢 | 第66-67页 |
| 攻读硕士期间参与的科研项目和发表的论文 | 第67页 |
