| 摘要 | 第5-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 第一章 绪论 | 第11-21页 |
| 1.1 1,2,4-丁三醇的基本特性 | 第11页 |
| 1.2 1,2,4-丁三醇合成的研究进展 | 第11-14页 |
| 1.2.1 1,2,4-丁三醇合成的化学法 | 第11-12页 |
| 1.2.2 1,2,4-丁三醇合成的生物法 | 第12-14页 |
| 1.3 丁三醇合成途径的代谢工程分析及改造策略的提出 | 第14-19页 |
| 1.3.1 混合碳源 | 第15-18页 |
| 1.3.2 由木糖合成 1,2,4-丁三醇代谢途径的分析 | 第18页 |
| 1.3.3 辅因子调控 | 第18-19页 |
| 1.4 课题研究目的、内容 | 第19-20页 |
| 1.4.1 研究目的 | 第19页 |
| 1.4.2 研究内容 | 第19-20页 |
| 1.5 论文创新点 | 第20-21页 |
| 第二章 培养条件对重组菌株合成D-1,2,4-丁三醇的影响 | 第21-29页 |
| 2.1 引言 | 第21页 |
| 2.2 材料与方法 | 第21-24页 |
| 2.2.1 菌株及质粒 | 第21页 |
| 2.2.2 主要工具酶及试剂盒 | 第21页 |
| 2.2.3 试剂 | 第21-22页 |
| 2.2.4 实验仪器 | 第22-23页 |
| 2.2.5 培养基与发酵条件 | 第23页 |
| 2.2.6 检测方法 | 第23-24页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第24-28页 |
| 2.3.1 葡萄糖的添加对细胞生长的影响 | 第24-25页 |
| 2.3.2 接种量对D-1,2,4-丁三醇合成的影响 | 第25页 |
| 2.3.3 诱导时间对D-1,2,4-丁三醇合成的影响 | 第25-26页 |
| 2.3.4 培养温度对D-1,2,4-丁三醇合成的影响 | 第26页 |
| 2.3.5 装液量对D-1,2,4-丁三醇合成的影响 | 第26页 |
| 2.3.6 培养过程中pH的控制对丁三醇合成的影响 | 第26-28页 |
| 2.4 小结 | 第28-29页 |
| 第三章 D-1,2,4-丁三醇合成与生长的耦联 | 第29-43页 |
| 3.1 引言 | 第29页 |
| 3.2 材料与方法 | 第29-33页 |
| 3.2.1 菌株、质粒和引物 | 第29-30页 |
| 3.2.2 仪器及试剂 | 第30页 |
| 3.2.3 重组质粒的构建 | 第30页 |
| 3.2.4 Red基因敲除技术 | 第30-32页 |
| 3.2.5 重组菌株的发酵和产物检测 | 第32-33页 |
| 3.2.6 检测方法 | 第33页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第33-41页 |
| 3.3.1 碳源的供给方式对 1,2,4-丁三醇合成的影响 | 第33-34页 |
| 3.3.2 葡萄糖浓度对D-1,2,4-丁三醇合成的影响 | 第34页 |
| 3.3.3 强化木糖转运对 1,2,4-丁三醇的影响 | 第34-35页 |
| 3.3.4 D-1,2,4-丁三醇合成与细胞生长的耦联 | 第35-39页 |
| 3.3.5 MG403k-1 小罐发酵合成丁三醇 | 第39-41页 |
| 3.4 小结 | 第41-43页 |
| 第四章 增大D-1,2,4-丁三醇的合成通量 | 第43-51页 |
| 4.1 引言 | 第43页 |
| 4.2 材料与方法 | 第43-45页 |
| 4.2.1 菌株、质粒和引物 | 第43页 |
| 4.2.2 仪器及试剂 | 第43页 |
| 4.2.3 重组质粒的构建 | 第43-45页 |
| 4.2.4 重组菌株的摇瓶发酵和产物检测 | 第45页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第45-50页 |
| 4.3.1 底物消耗及中间代谢产物积累情况分析 | 第45-46页 |
| 4.3.2 木糖酸内酯酶xyl C对木糖酸内酯的水解作用 | 第46-48页 |
| 4.3.3 同时表达木糖酸内酯酶xylC和木糖酸脱水酶xylD对 1,2,4-丁三醇合成的影响 | 第48-49页 |
| 4.3.4 木糖酸脱水酶xyl D单独表达对D-1,2,4-丁三醇合成的影响 | 第49-50页 |
| 4.4 小结 | 第50-51页 |
| 第五章 D-1,2,4-丁三醇合成与NADH的关系 | 第51-57页 |
| 5.1 引言 | 第51页 |
| 5.2 材料与方法 | 第51-52页 |
| 5.2.1 菌株、质粒和引物 | 第51页 |
| 5.2.2 仪器及试剂 | 第51页 |
| 5.2.3 基因敲除方法 | 第51-52页 |
| 5.2.4 重组菌株的摇瓶发酵和产物检测 | 第52页 |
| 5.3 结果与讨论 | 第52-55页 |
| 5.3.1 不同还原态碳源对D-1,2,4-丁三醇合成的影响 | 第52-53页 |
| 5.3.2 ldhA敲除对D-1,2,4-丁三醇合成的影响 | 第53-55页 |
| 5.3.3 三种策略的结合 | 第55页 |
| 5.4 小结 | 第55-57页 |
| 结论与展望 | 第57-59页 |
| 结论 | 第57-58页 |
| 展望 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-67页 |
| 攻读学位期间发表论文与研究成果清单 | 第67-69页 |
| 致谢 | 第69页 |
