| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 第1章 文献综述 | 第13-27页 |
| 1.1 七鳃鳗——脊椎动物发育和进化的模式动物 | 第13-17页 |
| 1.1.1 七鳃鳗的进化地位与研究意义 | 第13页 |
| 1.1.2 生活史 | 第13-15页 |
| 1.1.3 形态性状 | 第15页 |
| 1.1.4 我国七鳃鳗的种类 | 第15-16页 |
| 1.1.5 七鳃鳗资源保护 | 第16-17页 |
| 1.2 七鳃鳗人工繁殖 | 第17-18页 |
| 1.3 七鳃鳗早期发育 | 第18-21页 |
| 1.3.1 胚胎发育 | 第18-19页 |
| 1.3.2 卵黄囊期仔鱼的发育 | 第19-20页 |
| 1.3.3 幼鱼发育 | 第20-21页 |
| 1.4 显微操作技术在基因功能研究中进展 | 第21-23页 |
| 1.5 HMGB1、LIP和VLRB研究进展 | 第23-25页 |
| 1.5.1 HMGB1研究进展 | 第23-24页 |
| 1.5.2 LIP研究进展 | 第24页 |
| 1.5.3 VLRB研究进展 | 第24-25页 |
| 1.6本研究的目的和意义 | 第25-27页 |
| 第2章 七鳃鳗基因操作平台建立 | 第27-93页 |
| 2.1 材料 | 第27页 |
| 2.1.1 日本七鳃鳗和东北七鳃鳗胚胎、卵黄囊期仔鱼、幼鱼、成体 | 第27页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第27页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第27页 |
| 2.2 方法 | 第27-36页 |
| 2.2.1 七鳃鳗室内养殖管理 | 第27-28页 |
| 2.2.2 七鳃鳗的形态性状和体质量的测量方法 | 第28页 |
| 2.2.3 七鳃鳗繁殖方法 | 第28-29页 |
| 2.2.4 七鳃鳗早期发育 | 第29-31页 |
| 2.2.5 七鳃鳗发育过程中免疫相关基因的检测 | 第31-32页 |
| 2.2.6 L-HMGB1、LIP、C1Q和C3在幼鱼的表达 | 第32-33页 |
| 2.2.7 七鳃鳗显微注射方法 | 第33-35页 |
| 2.2.8 数据统计与分析 | 第35-36页 |
| 2.3 结果 | 第36-80页 |
| 2.3.1 七鳃鳗形态性状对体质量的影响 | 第36-42页 |
| 2.3.2 性成熟七鳃鳗亲本形态性状和繁殖行为 | 第42-46页 |
| 2.3.3 七鳃鳗繁殖结果 | 第46-47页 |
| 2.3.4 七鳃鳗胚胎发育和胚后发育 | 第47-71页 |
| 2.3.5 七鳃鳗发育过程中免疫相关基因的表达 | 第71-76页 |
| 2.3.6 利用吗啉反义寡核苷酸技术沉默七鳃鳗L-HMGB1、LIP和VLRB基因 | 第76-79页 |
| 2.3.7 利用siRNA技术沉默七鳃鳗脑中L-HMGB1基因 | 第79-80页 |
| 2.4 讨论 | 第80-93页 |
| 2.4.1 影响东北七鳃鳗和日本七鳃鳗体质量的主要形态性状 | 第80页 |
| 2.4.2 七鳃鳗的副性征和繁殖行为 | 第80-81页 |
| 2.4.3 七鳃鳗人工繁殖 | 第81-82页 |
| 2.4.4 七鳃鳗胚胎发育 | 第82-84页 |
| 2.4.5 日本七鳃鳗卵黄囊期仔鱼异速生长分析 | 第84-85页 |
| 2.4.6 七鳃鳗幼鱼发育 | 第85-87页 |
| 2.4.7 L-HMGB1、LIP和VLRB在七鳃鳗胚胎、幼体和成体中表达 | 第87-90页 |
| 2.4.8 七鳃鳗基因操作平台的有效性 | 第90-93页 |
| 第3章 沉默L-HMGB1、L/P和VLRB基因转录组研究 | 第93-131页 |
| 3.1 材料 | 第93-94页 |
| 3.1.1 沉默L-HMGB1、LIP和VLRB基因七鳃鳗 | 第93-94页 |
| 3.2 方法 | 第94-98页 |
| 3.2.1 转录组测序 | 第94-96页 |
| 3.2.2 Agilent定制七鳃鳗4X44K芯片 | 第96-98页 |
| 3.3 结果 | 第98-122页 |
| 3.3.1 沉默L-HMGB1基因转录组结果 | 第99-112页 |
| 3.3.2 沉默LIP基因芯片结果 | 第112-116页 |
| 3.3.3 沉默VLRB基因芯片结果 | 第116-122页 |
| 3.4 讨论 | 第122-131页 |
| 3.4.1 沉默L-HMGB1基因转录组分析 | 第122-124页 |
| 3.4.2 沉默LIP基因芯片分析 | 第124-128页 |
| 3.4.3 沉默VLRB基因芯片分析 | 第128-131页 |
| 第4章 沉默L-HMGB1基因胚胎中发育和免疫相关基因变化 | 第131-143页 |
| 4.1 材料 | 第131-132页 |
| 4.1.1 沉默和挽救试验的胚胎 | 第131页 |
| 4.1.2 主要试剂 | 第131页 |
| 4.1.3 主要仪器 | 第131-132页 |
| 4.2 方法 | 第132-133页 |
| 4.2.1 沉默L-HMGB1基因胚胎RNA提取 | 第132页 |
| 4.2.2 检测沉默L-HMGB1基因胚胎中发育和免疫相关基因相对表达 | 第132页 |
| 4.2.3 检测沉默L-HMGB1基因胚胎中L-HMGB1和VLRB蛋白表达 | 第132-133页 |
| 4.3 结果 | 第133-138页 |
| 4.3.1 沉默L-HMGB1基因胚胎中发育和免疫相关基因的变化 | 第133页 |
| 4.3.2 沉默L-HMGB1基因后CDA1/CDA2和VLR变化 | 第133-137页 |
| 4.3.3 L-HMGB1蛋白挽救 | 第137-138页 |
| 4.4 讨论 | 第138-143页 |
| 4.4.1 沉默L-HMGB1基因胚胎中发育和免疫相关基因的变化 | 第138-140页 |
| 4.4.2 L-HMGB1调控VLRB表达 | 第140-143页 |
| 第5章 结论 | 第143-145页 |
| 本论文的创新点 | 第145-146页 |
| 本论文的不足之处及下一步工作计划 | 第146-147页 |
| 参考文献 | 第147-165页 |
| 附录1 | 第165-166页 |
| 附录2 | 第166-167页 |
| 附录3 | 第167页 |
| 附录4 | 第167-168页 |
| 攻读博士学位期间发表学术论文情况 | 第168-169页 |
| 攻读博士学位期间参与项目 | 第169-170页 |
| 致谢 | 第170页 |
