| CONTENTS | 第6-10页 |
| 摘要 | 第10-12页 |
| Abstract | 第12-13页 |
| 1 引言 | 第14-25页 |
| 1.1 PED的流行与危害 | 第14-15页 |
| 1.2 PED临床症状与剖检变化 | 第15页 |
| 1.3 PEDV的病原性特征 | 第15-17页 |
| 1.3.1 PEDV的分类地位 | 第15页 |
| 1.3.2 PEDV的形态学特征 | 第15-16页 |
| 1.3.3 PEDV的培养特性 | 第16-17页 |
| 1.3.4 PEDV的理化特性 | 第17页 |
| 1.4 PEDV分子生物学的研究进展 | 第17-21页 |
| 1.4.1 PEDV基因组结构 | 第17-18页 |
| 1.4.2 PEDV主要结构基因及其编码蛋白的功能 | 第18-21页 |
| 1.5 PED的实验室诊断技术 | 第21-24页 |
| 1.5.1 病原学诊断 | 第21-22页 |
| 1.5.2 血清学诊断 | 第22-23页 |
| 1.5.3 分子生物学诊断 | 第23-24页 |
| 1.6 研究的目的和意义 | 第24-25页 |
| 2 材料与方法 | 第25-38页 |
| 2.1 试验材料 | 第25-28页 |
| 2.1.1 病料 | 第25页 |
| 2.1.2 细胞 | 第25页 |
| 2.1.3 试验动物 | 第25页 |
| 2.1.4 试验中用到的引物 | 第25-27页 |
| 2.1.5 主要试剂 | 第27页 |
| 2.1.6 主要试剂配制 | 第27-28页 |
| 2.1.7 主要仪器设备 | 第28页 |
| 2.2 试验方法 | 第28-38页 |
| 2.2.1 病料的处理、鉴定及结构基因的扩增 | 第28-32页 |
| 2.2.2 病毒的分离 | 第32-33页 |
| 2.2.3 PEDV NJ细胞培养毒的鉴定 | 第33-36页 |
| 2.2.4 动物回归试验 | 第36-38页 |
| 3 结果 | 第38-57页 |
| 3.1 病料的鉴定 | 第38页 |
| 3.2 病毒的分离培养与鉴定 | 第38-41页 |
| 3.2.1 PEDV NJ接种IEC细胞 | 第38-39页 |
| 3.2.2 PEDV NJ接种猪肾原代细胞 | 第39-40页 |
| 3.2.3 PEDV NJ接种仔猪小肠组织 | 第40页 |
| 3.2.4 PEDV NJ细胞培养毒RT-nested-PCR检测结果 | 第40-41页 |
| 3.3 PEDV NJ细胞培养毒TCID50的测定 | 第41-42页 |
| 3.4 间接免疫荧光检测结果 | 第42-43页 |
| 3.4.1 间接免疫荧光检测IEC细胞病毒培养物 | 第42页 |
| 3.4.2 间接免疫荧光检测猪肾原代细胞病毒培养物 | 第42-43页 |
| 3.4.3 间接免疫荧光检测仔猪小肠组织病毒培养物 | 第43页 |
| 3.5 间接ELISA检测结果 | 第43-44页 |
| 3.6 直接负染电镜法观察病毒结果 | 第44页 |
| 3.7 免疫电镜观察结果 | 第44-45页 |
| 3.8 超薄切片电镜观察结果 | 第45-46页 |
| 3.8.1 IEC细胞病毒培养物超薄切片电镜观察结果 | 第45页 |
| 3.8.2 猪肾原代细胞病毒培养物超薄切片电镜观察结果 | 第45-46页 |
| 3.9 S、N和ORF3基因序列分析结果 | 第46-50页 |
| 3.9.1 S基因的同源性分析 | 第46-47页 |
| 3.9.2 S基因的系统发育进化分析 | 第47-48页 |
| 3.9.3 N基因的同源性分析 | 第48页 |
| 3.9.4 N基因的系统发育进化分析 | 第48-49页 |
| 3.9.5 ORF3基因的同源性分析 | 第49页 |
| 3.9.6 ORF3基因的系统发育进化分析 | 第49-50页 |
| 3.10 PEDV NJ细胞培养毒M基因序列分析结果 | 第50-52页 |
| 3.10.1 细胞培养毒M基因同源性分析 | 第50-51页 |
| 3.10.2 细胞培养毒M基因系统发育进化分析 | 第51-52页 |
| 3.10.3 细胞培养毒M蛋白氨基酸序列分析 | 第52页 |
| 3.11 不同代次细胞培养毒M基因部分序列分析结果 | 第52-53页 |
| 3.12 动物回归试验检测结果 | 第53-57页 |
| 3.12.1 临床症状及剖检病变 | 第53-54页 |
| 3.12.2 RT-nested-PCR方法检测病料 | 第54-55页 |
| 3.12.3 间接免疫荧光法检测攻毒仔猪小肠组织 | 第55-57页 |
| 4 讨论 | 第57-61页 |
| 4.1 PEDV NJ毒株分离培养的研究 | 第57-58页 |
| 4.2 PEDV NJ毒株细胞培养物鉴定的研究 | 第58-59页 |
| 4.3 PEDV NJ毒株遗传变异性的研究 | 第59-61页 |
| 5 结论 | 第61-62页 |
| 致谢 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-70页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第70页 |
