| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-34页 |
| ·引言 | 第14-16页 |
| ·盐生植物及植物耐盐性研究进展 | 第16-25页 |
| ·盐生植物 | 第16-17页 |
| ·盐胁迫对植物的毒害 | 第17页 |
| ·植物耐盐机理 | 第17-18页 |
| ·渗透调节机理 | 第18页 |
| ·离子区隔化 | 第18页 |
| ·植物耐盐相关基因 | 第18-25页 |
| ·渗透调节基因 | 第18-20页 |
| ·离子区隔化相关基因 | 第20-23页 |
| ·耐盐相关转录因子 | 第23-24页 |
| ·抗氧化相关酶基因 | 第24-25页 |
| ·导入总DNA耐盐育种研究进展 | 第25-29页 |
| ·花粉管通道法技术的提出与建立 | 第25-26页 |
| ·花粉管通道法的可行性与分子证据 | 第26-27页 |
| ·导入总DNA耐盐育种 | 第27-29页 |
| ·紫花苜蓿耐盐育种研究进展 | 第29-32页 |
| ·紫花苜蓿耐盐杂交育种 | 第29-31页 |
| ·紫花苜蓿耐盐基因工程研究 | 第31-32页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第32-34页 |
| 第二章 用花粉管通道法导入红树总DNA创建紫花苜蓿耐盐新种质 | 第34-58页 |
| ·材料与方法 | 第34-41页 |
| ·材料 | 第34页 |
| ·红树基因组DNA的提取 | 第34-35页 |
| ·外源DNA的导入 | 第35页 |
| ·紫花苜蓿阿尔冈金品种种子发芽期耐盐性分析 | 第35页 |
| ·紫花苜蓿阿尔冈金品种苗期耐盐性分析 | 第35页 |
| ·T_0代植株的盐胁迫筛选 | 第35页 |
| ·耐盐性T_0代植株DNA的提取 | 第35页 |
| ·RAPD分析 | 第35-36页 |
| ·RAPD条带的序列分析 | 第36页 |
| ·T_1代种子获得 | 第36页 |
| ·T_1代耐盐性植株获得 | 第36页 |
| ·T_1代耐盐性植株相关生化指标分析 | 第36-40页 |
| ·叶绿素含量测定 | 第37页 |
| ·丙二醛含量测定 | 第37页 |
| ·脯氨酸含量测定 | 第37-38页 |
| ·超氧化物歧化酶测定 | 第38-39页 |
| ·过氧化物酶活性测定 | 第39-40页 |
| ·过氧化氢酶活性测定 | 第40页 |
| ·T_2代种子盆栽耐盐筛选 | 第40-41页 |
| ·紫花苜蓿盆栽耐盐性分析 | 第40-41页 |
| ·T_2代植株耐盐性筛选 | 第41页 |
| ·结果与分析 | 第41-56页 |
| ·红树基因组DNA的提取 | 第41页 |
| ·外源DNA的导入 | 第41-42页 |
| ·T_0代种子获得 | 第42页 |
| ·紫花苜蓿阿尔冈金品种种子发芽期耐盐性分析 | 第42页 |
| ·紫花苜蓿阿尔冈金品种苗期耐盐性分析 | 第42-43页 |
| ·T_0代植株耐盐性筛选 | 第43页 |
| ·耐盐性T_0代植株DNA的提取 | 第43-44页 |
| ·RAPD分析 | 第44-45页 |
| ·RAPD条带的序列分析 | 第45-48页 |
| ·T_1代种子获得 | 第48页 |
| ·T_1代耐盐性植株获得 | 第48-50页 |
| ·T_1代耐盐性植株耐盐相关生化指标分析 | 第50-54页 |
| ·叶绿素含量分析 | 第50页 |
| ·丙二醛含量分析 | 第50-51页 |
| ·脯氨酸含量分析 | 第51-52页 |
| ·SOD活性分析 | 第52页 |
| ·POD、CAT活性分析 | 第52-54页 |
| ·T_2代种子盆栽耐盐筛选 | 第54-56页 |
| ·讨论 | 第56-58页 |
| 第三章 转化Na~+/H~+逆向转运蛋白基因创建耐盐紫花苜蓿新种质资源 | 第58-78页 |
| ·材料与方法 | 第58-66页 |
| ·材料 | 第58-59页 |
| ·SeNHX1基因的PCR扩增 | 第59页 |
| ·表达载体的构建 | 第59-60页 |
| ·pPZP221(35SNN)质粒转化农杆菌AGL1 | 第60-61页 |
| ·农杆菌AGL1感受态细胞的制备 | 第60页 |
| ·pPZP221(35SNN)质粒冻融法转化农杆菌AGL1 | 第60-61页 |
| ·转化农杆菌AGL1的PCR鉴定 | 第61页 |
| ·转化农杆菌AGL1的酶切鉴定 | 第61页 |
| ·农杆菌介导pPZP221(35SNN)转化紫花苜蓿阿尔冈金 | 第61-62页 |
| ·外植体侵染 | 第61-62页 |
| ·不定芽的获得及生根培养 | 第62页 |
| ·转化植株的鉴定 | 第62-65页 |
| ·PCR鉴定 | 第62-63页 |
| ·RT-PCR鉴定 | 第63-65页 |
| ·T_0代转基因植株的移栽及扦插扩繁 | 第65页 |
| ·T_0代转基因植株的耐盐相关生理生化指标分析 | 第65-66页 |
| ·叶绿素含量测定 | 第65页 |
| ·丙二醛含量测定 | 第65页 |
| ·脯氨酸含量测定 | 第65-66页 |
| ·超氧化物歧化酶测定 | 第66页 |
| ·过氧化物酶活性测定 | 第66页 |
| ·过氧化氢酶活性测定 | 第66页 |
| ·T_1代转基因种子的获得 | 第66页 |
| ·T_1代转基因株系的获得 | 第66页 |
| ·结果与分析 | 第66-76页 |
| ·SeNHX1基因的扩增 | 第66页 |
| ·快速提取质粒法筛选重组子pPZP221(35SNN) | 第66页 |
| ·PCR鉴定重组子pPZP221(35SNN) | 第66-67页 |
| ·重组质粒载体pPZP221(35SNN)酶切鉴定 | 第67页 |
| ·重组表达载体pPZP221(35SNN)测序鉴定 | 第67页 |
| ·转化农杆菌AGL1鉴定 | 第67-68页 |
| ·农杆菌介导pPZP221(35SNN)外植体 | 第68页 |
| ·不定芽的获得及生根培养 | 第68-69页 |
| ·转化植株的鉴定 | 第69-71页 |
| ·转化植株的PCR鉴定 | 第70-71页 |
| ·RT-PCR鉴定 | 第71页 |
| ·T_0代转基因植株的移栽及扦插 | 第71-72页 |
| ·T_0代转基因植株的耐盐相关生理生化指标分析 | 第72-75页 |
| ·叶绿素含量分析 | 第72页 |
| ·丙二醛含量分析 | 第72-73页 |
| ·脯氨酸含量分析 | 第73页 |
| ·SOD活性分析 | 第73-74页 |
| ·POD活性分析 | 第74页 |
| ·CAT活性分析 | 第74-75页 |
| ·T_1代转基因种子的获得 | 第75页 |
| ·T_1代转基因株系的获得 | 第75-76页 |
| ·讨论 | 第76-78页 |
| 第四章 盐诱导表达基因MsPRP2启动子的克隆及其驱动SeNHX1基因转化紫花苜蓿的研究 | 第78-86页 |
| ·材料与方法 | 第79-81页 |
| ·材料 | 第79页 |
| ·引物设计 | 第79页 |
| ·MsPRP2启动子PCR扩增 | 第79页 |
| ·连接反应 | 第79-80页 |
| ·重组子转化 | 第80页 |
| ·快速提取质粒法筛选重组子 | 第80页 |
| ·重组子PCR鉴定 | 第80页 |
| ·重组子酶切鉴定及测序分析 | 第80页 |
| ·表达载体构建 | 第80页 |
| ·pPZP221(MsPNN)质粒冻融法转化农杆菌AGL1 | 第80-81页 |
| ·农杆菌AGL1介导pPZP221(MsPNN)转化紫花苜蓿 | 第81页 |
| ·结果与分析 | 第81-85页 |
| ·MsPRP2启动子PCR扩增 | 第81页 |
| ·快速提取质粒法筛选重组子 | 第81页 |
| ·重组子PCR鉴定 | 第81页 |
| ·重组子酶切鉴定 | 第81-82页 |
| ·重组子测序分析 | 第82-83页 |
| ·表达载体构建 | 第83-84页 |
| ·转化pPZP221(MsPNN)再生植株的获得 | 第84-85页 |
| ·讨论 | 第85-86页 |
| 结论 | 第86-87页 |
| 参考文献 | 第87-102页 |
| 致谢 | 第102-103页 |
| 发表及已录用的论文 | 第103页 |
