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即墨温泉耐热性木聚糖酶产生菌的分离及其酶学性质研究

摘要第1-5页
ABSTRACT第5-12页
1 文献综述第12-26页
   ·前言第12-13页
   ·木聚糖酶的来源第13页
   ·木聚糖酶的分类第13-14页
   ·木聚糖酶分子作用机理及其影响因素第14-17页
     ·木聚糖酶的催化残基第14-15页
     ·木聚糖酶的热稳定性第15-17页
       ·热稳定区第15页
       ·盐桥第15-16页
       ·钙离子对酶活稳定性的影响第16页
       ·纺织工业中表面活性剂对木聚糖酶活的影响第16-17页
       ·其他第17页
   ·木聚糖酶的应用第17-21页
     ·食品工业第17-19页
       ·小麦面食和果蔬加工第17-18页
       ·木聚糖酶在乙醇工业方面的应用第18页
       ·酿酒第18-19页
     ·饲料工业第19-20页
       ·家禽养殖和水产第19-20页
     ·造纸工业第20-21页
   ·耐热性木聚糖酶稳定性的优化第21-22页
     ·从极端环境中筛选耐热性木聚糖酶产生菌第21页
     ·对现有的木聚糖酶进行遗传改造第21-22页
   ·木聚糖酶活性的测定方法第22页
   ·DNS 酶活测定方法的原理第22页
   ·耐热木聚糖酶的耐热机理第22-23页
   ·木聚糖酶的评价方法第23-24页
     ·水浴法第23页
     ·干/湿热法第23-24页
 小结第24-26页
2 材料与方法第26-43页
   ·实验材料第26-29页
     ·实验水样第26页
     ·主要实验试剂第26-27页
     ·主要仪器设备第27页
     ·实验用培养基及其配方第27-28页
     ·常用存储液及其配方第28-29页
   ·实验方法第29-34页
     ·实验依据第29页
     ·半纤维素的制备第29-30页
       ·半纤维素的提取方法第29页
       ·分离培养基配制方法的改进第29-30页
     ·麸皮的去淀粉处理方法第30页
     ·细菌的分离与纯化方法第30页
       ·细菌的获得与培养第30页
       ·平板划线分离纯化第30页
       ·平板涂布获得单菌落第30页
     ·菌种保存方法第30-31页
       ·传代培养保藏法第31页
       ·液体石蜡覆盖保藏法第31页
       ·冷冻保藏法第31页
       ·冷冻干燥保藏法第31页
     ·菌种分类鉴定第31-34页
       ·菌种的常规分类鉴定第31-32页
       ·菌种的分子水平分类研究第32-34页
     ·酶的冷冻干燥第34页
   ·酶活的测定第34-36页
     ·酶活的定义第34页
     ·酶解液还原糖量的测定—3,5-二硝基水杨酸比色法第34-35页
       ·分析原理第34页
       ·分析试剂第34-35页
       ·木糖标准曲线的制定第35页
     ·酶液制备及酶活力测定方法第35-36页
       ·酶液的制备第35页
       ·酶活的测定第35-36页
   ·单因素酶学性质研究第36-38页
     ·菌株对木聚糖酶活性的影响第36页
     ·温度对木聚糖酶活性的影响第36页
     ·pH 对木聚糖酶活性的影响第36-37页
     ·不同碳源对木聚糖酶活力的影响第37页
     ·不同氮源对木聚糖酶活力的影响第37页
     ·表面活性剂对木聚糖酶活力的影响第37-38页
     ·EDTA 对木聚糖酶活性的影响第38页
     ·金属离子对木聚糖酶活性的影响第38页
     ·发酵时间对木聚糖酶活性的影响第38页
   ·发酵优化第38-39页
     ·目前微生物发酵优化方法第38页
     ·正交试验因素及其水平的确定第38-39页
   ·固态发酵优化第39-43页
     ·发酵时间对酶活的影响第39页
     ·酶作用的最适温度及热稳定性第39-40页
     ·酶作用的最适 pH 值及 pH 稳定性第40页
     ·底物浓度对酶活的影响第40页
     ·木聚糖酶的贮藏稳定性第40-41页
     ·发酵设备流程第41-43页
3 实验结果与分析第43-63页
   ·制备的半纤维素第43页
   ·去淀粉的麸皮第43-44页
   ·筛菌结果第44-49页
     ·细菌的透明圈检查(初筛)第44-46页
     ·半纤维素添加方式和添加量对透明圈大小的影响第46页
     ·D/ d 值与木聚糖酶活的关系第46-47页
     ·菌种的划线分离纯化第47-48页
     ·菌种涂板获得单菌落第48-49页
     ·菌种保存第49页
       ·菌种的短期保存第49页
       ·菌种的长久保存第49页
   ·菌种鉴定第49-51页
     ·形态观察及镜检第49-50页
     ·16SrDNA 分子水平鉴定第50-51页
       ·PCR 产物结果第50页
       ·菌株 L_2 的 16S rDNA 序列测定第50-51页
   ·酶学性质研究第51-58页
     ·单因素实验结果第51-56页
       ·菌株对酶活的影响第51-52页
       ·温度对酶活的影响第52页
       ·pH 值对酶活的影响第52-53页
       ·碳源对酶活的影响第53页
       ·氮源对酶活的影响第53-54页
       ·表面活性剂对酶活的影响第54页
       ·EDTA 对木聚糖酶的影响第54-55页
       ·金属离子对酶活的影响第55页
       ·发酵时间对酶活的影响第55-56页
     ·正交实验结果分析第56-58页
       ·酶活的计算公式第56页
       ·正交发酵结果第56-57页
       ·正交设计的极差分析第57-58页
       ·发酵条件的优化处理第58页
   ·木聚糖酶固态发酵的酶学特性研究第58-61页
     ·发酵时间对酶活的影响第58-59页
     ·温度对酶活的影响及耐热稳定性第59页
     ·pH 对酶活的影响及pH 稳定性第59-60页
     ·底物浓度对产酶的影响第60-61页
   ·实验讨论第61-63页
     ·使用自制半纤维素筛选细菌的原因第61页
     ·发酵过程遇到的问题第61-62页
     ·关于正交试验结果第62-63页
4 结论第63-64页
参考文献第64-69页
附录第69-78页
致谢第78-79页
攻读学位期间发表的学术论文目录第79-80页

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