| 中文摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 英文缩略名词对照表 | 第7-11页 |
| 第一部分 文献综述 | 第11-20页 |
| 1 布鲁氏菌概况 | 第11-13页 |
| 1.1 布鲁氏菌的危害 | 第11页 |
| 1.2 布鲁氏菌病原特点及分类 | 第11-12页 |
| 1.3 布鲁氏菌流行情况 | 第12-13页 |
| 1.4 布鲁氏菌的传播途径 | 第13页 |
| 2 布鲁氏菌感染过程及胞内存活机制 | 第13-14页 |
| 3 布鲁氏菌毒力因子 | 第14-19页 |
| 3.1 脂多糖 | 第14-15页 |
| 3.2 四型分泌系统 | 第15-16页 |
| 3.3 BvrR-BvrS双组分系统 | 第16页 |
| 3.4 环β-葡聚糖 | 第16-17页 |
| 3.5 超氧化物歧化酶 | 第17页 |
| 3.6 碱基切除修复(BER) | 第17-18页 |
| 3.7 过氧化氢酶 | 第18页 |
| 3.8 其他毒力因子 | 第18-19页 |
| 4 本研究的目的和意义 | 第19-20页 |
| 第二部分 实验内容 | 第20-57页 |
| 第一章 ：荧光定量PCR验证布鲁氏菌胞内诱导基因 | 第20-30页 |
| 1 材料 | 第20-21页 |
| 1.1 菌株与细胞 | 第20页 |
| 1.2 主要试剂 | 第20页 |
| 1.3 主要仪器 | 第20-21页 |
| 1.4 溶液配制 | 第21页 |
| 2 方法 | 第21-25页 |
| 2.1 细胞感染方法 | 第21页 |
| 2.2 流产布鲁氏菌S2308胞内存活曲线 | 第21-22页 |
| 2.3 巨噬细胞内细菌样品的分离 | 第22页 |
| 2.4 细菌RNA的提取 | 第22页 |
| 2.5 RNA的反转录 | 第22-23页 |
| 2.6 引物设计及标准曲线构建 | 第23-24页 |
| 2.7 鉴定细菌胞内诱导基因转录水平 | 第24-25页 |
| 3 结果 | 第25-28页 |
| 3.1 流产布鲁氏菌胞内增殖曲线 | 第25页 |
| 3.2 细菌RNA质量鉴定 | 第25-26页 |
| 3.3 细菌标准曲线测定 | 第26-27页 |
| 3.4 胞内诱导基因鉴定结果 | 第27-28页 |
| 4 讨论 | 第28-30页 |
| 第二章 ：流产布鲁氏菌bab2_1152缺失株构建及致病性分析 | 第30-43页 |
| 1 材料 | 第30-31页 |
| 1.1 菌株与细胞 | 第30页 |
| 1.2 主要试剂 | 第30页 |
| 1.3 主要仪器 | 第30页 |
| 1.4 溶液配制 | 第30-31页 |
| 1.5 引物设计 | 第31页 |
| 2 方法 | 第31-36页 |
| 2.1 流产布鲁氏菌bab2_1152生物信息学分析 | 第31-32页 |
| 2.2 pSC质粒构建 | 第32-33页 |
| 2.3 布鲁氏菌S2308基因组的提取 | 第33-34页 |
| 2.4 pSC-△1152自杀性质粒的构建 | 第34页 |
| 2.5 感受态细胞的制备 | 第34-35页 |
| 2.6 缺失株的构建 | 第35页 |
| 2.7 缺失株鉴定 | 第35页 |
| 2.8 粘附与入侵试验 | 第35-36页 |
| 2.9 胞内存活试验 | 第36页 |
| 3 结果 | 第36-41页 |
| 3.1 bab2_1152基因生物信息学分析 | 第36-37页 |
| 3.2 pSC质粒构建结果 | 第37-38页 |
| 3.3 自杀性质粒的构建结果 | 第38-39页 |
| 3.4 缺失株构建结果 | 第39页 |
| 3.5 粘附入侵结果 | 第39-40页 |
| 3.6 胞内存活结果 | 第40-41页 |
| 4 讨论 | 第41-43页 |
| 第三章 ：流产布鲁氏菌bab2_1118和bab1_1222的免疫学特性分析 | 第43-57页 |
| 1 材料 | 第43-45页 |
| 1.1 菌株 | 第43页 |
| 1.2 载体 | 第43页 |
| 1.3 实验动物 | 第43页 |
| 1.4 试剂 | 第43-44页 |
| 1.5 仪器 | 第44页 |
| 1.6 溶液配制 | 第44-45页 |
| 2 方法 | 第45-50页 |
| 2.1 hpcd、phoA基因的PCR扩增和克隆 | 第45-48页 |
| 2.2 Hpcd、PhoA蛋白表达载体的构建 | 第48-49页 |
| 2.3 Hpcd、PhoA蛋白的表达、纯化及抗原性检测 | 第49-50页 |
| 3 结果 | 第50-55页 |
| 3.1 hpcd、phoA基因的PCR结果 | 第50-51页 |
| 3.2 重组质粒pMD19-Hpcd、pMD19-PhoA酶切鉴定 | 第51-52页 |
| 3.3 蛋白表达载体构建 | 第52页 |
| 3.4 重组蛋白的表达、纯化及抗原性检测结果 | 第52-55页 |
| 4 讨论 | 第55-57页 |
| 全文结论 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-65页 |
| 致谢 | 第65-67页 |
| 附录：攻读硕士学位期间发表的论文 | 第67-68页 |
