中文摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5页 |
縮略语/符号说明 | 第9-11页 |
前言 | 第11-15页 |
研究现状、成果 | 第11-13页 |
研究目的、方法 | 第13-15页 |
一、TN-Nkx6.2 基因在神经细胞的表达 | 第15-23页 |
1.1 实验对象 | 第15-17页 |
1.1.1 菌株、载体和实验动物 | 第15-16页 |
1.1.2 工具酶及分子量标志物 | 第16页 |
1.1.3 主要化学试剂 | 第16页 |
1.1.4 实验仪器 | 第16-17页 |
1.1.5 培养液 | 第17页 |
1.2 试验方法 | 第17-19页 |
1.2.1 分离并培养大鼠神经细胞 | 第17-18页 |
1.2.2 pET-28a-TN-Nkx6.2转染神经细胞 | 第18-19页 |
1.2.3 细胞免疫荧光检测pET-28a-TN-Nkx6.2在神经细胞的表达 | 第19页 |
1.3 实验结果 | 第19-21页 |
1.3.1 pET-28a-TN-Nkx6.2鉴定 | 第19页 |
1.3.2 细胞免疫荧光检测pET-28a-TN-Nkx6.2在神经细胞的表达 | 第19-21页 |
1.4 讨论 | 第21-22页 |
1.4.1 免疫荧光细胞化学技术 | 第21页 |
1.4.2 神经细胞培养 | 第21页 |
1.4.3 阳离子脂质体介导的转染 | 第21-22页 |
1.5 小结 | 第22-23页 |
二、TN-Nkx6.2 融合蛋白在小鼠脑中分布的鉴定 | 第23-33页 |
2.1 对象和方法 | 第23-24页 |
2.1.1 实验动物 | 第23页 |
2.1.2 主要试剂及试剂盒 | 第23-24页 |
2.1.3 实验仪器 | 第24页 |
2.2 实验方法 | 第24-27页 |
2.2.1 Cy7 NHS标记融合蛋白TN-Nkx6.2 | 第24-25页 |
2.2.2 标记效率F/P值计算 | 第25页 |
2.2.3 活体荧光成像系统分析TN-Nkx6.2在小鼠脑内分布 | 第25页 |
2.2.4 免疫荧光组化观察TN-Nkx6.2在小鼠脑组织分布情况 | 第25-26页 |
2.2.5 TUNEL试剂盒染色 | 第26页 |
2.2.6 观察指标和统计方法 | 第26-27页 |
2.3 结果 | 第27-30页 |
2.3.1 Cy7-TN-Nkx6.2融合蛋白在脑中的动态分布 | 第27-29页 |
2.3.2 荧光免疫组化染色观察TN-Nkx6.2在小鼠脑组织分布 | 第29页 |
2.3.3 各组小鼠大脑皮层细胞凋亡指数比较 | 第29-30页 |
2.4 讨论 | 第30-32页 |
2.4.1 荧光成像技术及在神经科学中的应用 | 第30-31页 |
2.4.2 KODAK活体动物成像系统 | 第31-32页 |
2.5 小结 | 第32-33页 |
三、融合蛋白TN-Nkx6.2对神经干细胞分化的影响 | 第33-43页 |
3.1 实验对象 | 第33-34页 |
3.1.1 实验动物 | 第33页 |
3.1.2 主要仪器 | 第33页 |
3.1.3 实验试剂 | 第33页 |
3.1.4 部分试剂的配制 | 第33-34页 |
3.2 实验方法 | 第34-36页 |
3.2.1 提取并培养神经干细胞 | 第34-35页 |
3.2.2 免疫荧光细胞化学检测分化情况 | 第35-36页 |
3.2.3 统计学方法 | 第36页 |
3.3 结果 | 第36-41页 |
3.3.1 神经干细胞的形态 | 第36页 |
3.3.2 神经干细胞分化鉴定 | 第36-38页 |
3.3.3 Nkx-6.2蛋白对神经干细胞分化的影响 | 第38-41页 |
3.4 讨论 | 第41-42页 |
3.5 小结 | 第42-43页 |
结论 | 第43-44页 |
参考文献 | 第44-48页 |
发表论文和参加科研情况说明 | 第48-49页 |
附录 | 第49-54页 |
综述 同源盒基因Nkxs对低典大鼠甲低影响的研究进展 | 第54-64页 |
综述参考文献 | 第58-64页 |
致谢 | 第64页 |