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家蚕体内活性氧代谢及相关基因表达调控

摘要第6-8页
ABSTRACT第8-9页
第一章 文献综述第13-22页
    1.1 昆虫免疫第13-21页
        1.1.1 昆虫系统免疫第13-15页
        1.1.2 昆虫肠道免疫第15-17页
        1.1.3 昆虫ROS代谢相关基因的研究第17-19页
        1.1.4 昆虫抗菌肽研究第19-20页
        1.1.5 昆虫细胞免疫第20-21页
    1.2 研究的目的及意义第21-22页
第二章 细菌感染诱导家蚕体内活性氧产生及相关基因转录水平的分析第22-37页
    2.1 实验材料第22页
        2.1.1 供试昆虫第22页
        2.1.2 供试菌种第22页
        2.1.3 主要仪器第22页
        2.1.4 主要试剂第22页
    2.2 实验方法第22-29页
        2.2.1 家蚕饲养第22-23页
        2.2.2 细菌培养第23页
        2.2.3 喂食感染第23页
        2.2.4 注射感染第23页
        2.2.5 家蚕解剖第23页
        2.2.6 中肠及血腔中H_2O_2含量检测第23-25页
        2.2.7 PCR检测中肠活性氧代谢相关基因第25-29页
    2.3 结果与分析第29-35页
        2.3.1 喂食感染后家蚕中肠及血腔中H_2O_2水平第29-30页
        2.3.2 注射感染后家蚕死亡率及血腔中H_2O_2水平变化第30-32页
        2.3.3 PCR检测喂食细菌感染后家蚕中肠活性氧代谢相关基因的转录第32-35页
    2.4 讨论第35-37页
第三章 细菌诱导的家蚕中肠免疫反应研究第37-48页
    3.1 实验材料第37页
        3.1.1 供试昆虫第37页
        3.1.2 供试菌种第37页
        3.1.3 主要仪器第37页
        3.1.4 主要试剂第37页
    3.2 实验方法第37-40页
        3.2.1 家蚕饲养、细菌培养及喂食感染第37页
        3.2.2 死亡率统计第37页
        3.2.3 家蚕解剖第37页
        3.2.4 中肠CFU (colony forming units) 检验第37-38页
        3.2.5 中肠H_2O_2含量检测第38页
        3.2.6 荧光实时定量PCR (Real-time quantitative PCR) 检测中肠活性氧代谢相关基因及抗菌肽基因第38-40页
    3.3 结果与分析第40-46页
        3.3.1 两种细菌感染后家蚕存活率统计第40页
        3.3.2 细菌感染后家蚕中肠CFU检验第40-41页
        3.3.3 细菌感染后家蚕肠道内的H_2O_2及NO水平变化第41-42页
        3.3.4 荧光实时定量PCR检测活性氧及抗菌肽相关基因第42-46页
    3.4 讨论第46-48页
第四章 家蚕过氧化物酶5的表达、纯化及鉴定第48-68页
    4.1 实验材料第48-49页
        4.1.1 供试昆虫第48页
        4.1.2 供试菌种第48页
        4.1.3 主要仪器第48页
        4.1.4 主要试剂第48-49页
    4.2 实验方法第49-58页
        4.2.1 家蚕饲养第49页
        4.2.2 总RNA提取及cDNA合成第49页
        4.2.3 序列分析第49页
        4.2.4 BmPrx5的克隆第49-52页
        4.2.5 家蚕过氧化物酶 5(BmPrx5)的原核表达第52-53页
        4.2.6 重组蛋白的检测及鉴定第53-56页
        4.2.7 重组蛋白酶切及纯化第56页
        4.2.8 目的蛋白(BmPrx5)体外活性检测第56-57页
        4.2.9 家蚕细菌感染及H2O2处理第57页
        4.2.10 肠道消化液及血淋巴中的H_2O_2浓度检测第57页
        4.2.11 荧光实时定量PCR检测各组织中BmPrx5的转录情况第57-58页
    4.3 结果与分析第58-67页
        4.3.1 BmPrx5序列分析第58-60页
        4.3.2 重组蛋白BmPrx5的原核表达及纯化第60-62页
        4.3.3 BmPrx5的抗氧化活性检测第62-63页
        4.3.4 H2O2注射后BmPrx5转录水平的变化第63-65页
        4.3.5 细菌感染后BmPrx5转录水平的变化第65-67页
    4.4 讨论第67-68页
第五章 结论与讨论第68-71页
    5.1 结论第68页
    5.2 讨论第68-71页
参考文献第71-82页
附录第82-85页
缩略词第85-87页
致谢第87-88页
作者简介第88页

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