中文摘要 | 第8-10页 |
Abstract | 第10-11页 |
1 前言 | 第12-28页 |
1.1 茎端分生组织的结构与功能 | 第12-13页 |
1.1.1 茎端分生组织的结构 | 第12页 |
1.1.2 茎端分生组织调控的分子机制 | 第12-13页 |
1.2 细胞分裂素研究进展 | 第13-19页 |
1.2.1 细胞分裂素的合成代谢 | 第14-16页 |
1.2.2 细胞分裂素的信号转导 | 第16-18页 |
1.2.3 B类ARR作用机制 | 第18-19页 |
1.3 茎端分生组织的重塑 | 第19-23页 |
1.3.1 茎端分生组织重塑的分子机制 | 第19-21页 |
1.3.2 激素调控茎端分生组织重塑的机制 | 第21-23页 |
1.4 WOX家族基因研究进展 | 第23-26页 |
1.4.1 WOX家族基因的结构特征 | 第24-25页 |
1.4.2 WOX家族基因功能研究进展 | 第25-26页 |
1.5 本研究的目的意义 | 第26-28页 |
2 材料与方法 | 第28-47页 |
2.1 实验材料 | 第28-29页 |
2.1.1 植物材料 | 第28页 |
2.1.2 载体与菌株 | 第28页 |
2.1.3 试剂和仪器 | 第28-29页 |
2.1.4 实验引物 | 第29页 |
2.2 实验方法 | 第29-47页 |
2.2.1 CTAB法提取植物基因组DNA | 第29-30页 |
2.2.2 CTAB法提取植物总RNA | 第30-32页 |
2.2.2.1 检测RNA的质量和浓度 | 第31页 |
2.2.2.2 cDNA第一链的合成 | 第31-32页 |
2.2.3 目的基因的扩增 | 第32页 |
2.2.4 DNA回收 | 第32-33页 |
2.2.5 质粒提取 | 第33页 |
2.2.6 大肠杆菌感受态细胞的制备(热击法) | 第33-34页 |
2.2.7 大肠杆菌细胞的转化 | 第34页 |
2.2.8 目的片段和质粒DNA的酶切、连接与转化 | 第34-35页 |
2.2.9 GV3101农杆菌感受态的制备 | 第35页 |
2.2.10 农杆菌感受态细胞的转化(冻融法) | 第35-36页 |
2.2.11 农杆菌介导的杨树转化及再生 | 第36-37页 |
2.2.12 农杆菌介导的拟南芥转化 | 第37页 |
2.2.13 GUS染色及石蜡切片 | 第37-39页 |
2.2.13.1 GUS染色 | 第37-38页 |
2.2.13.2 材料脱水、透明、浸蜡和包埋 | 第38页 |
2.2.13.3 切片 | 第38页 |
2.2.13.4 脱蜡 | 第38-39页 |
2.2.14 实时定量PCR分析 | 第39-40页 |
2.2.15 原位杂交分析 | 第40-45页 |
2.2.15.1 固定材料 | 第40页 |
2.2.15.2 包埋材料 | 第40页 |
2.2.15.3 切片 | 第40-41页 |
2.2.15.4 探针制备 | 第41-42页 |
2.2.15.5 探针半定量 | 第42-43页 |
2.2.15.6 脱蜡、消化、乙酰化和杂交 | 第43-44页 |
2.2.15.7 杂交后处理(DNA水平) | 第44-45页 |
2.2.16 染色质免疫共沉淀 | 第45-46页 |
2.2.17 萌发种子 | 第46-47页 |
3 结果与分析 | 第47-61页 |
3.1 杨树芽再生过程中生长素和细胞分裂素响应信号的分布模式 | 第47-48页 |
3.2 细胞分裂素反应调节因子PtRR13正调控杨树芽再生 | 第48-51页 |
3.3 杨树PtWUS基因正调控芽再生 | 第51-58页 |
3.3.1 杨树PtWUS基因的同源性分析 | 第51-53页 |
3.3.2 杨树PtWUS基因的表达模式分析 | 第53-54页 |
3.3.3 杨树中PtWUS1的功能分析 | 第54-58页 |
3.4 PtRR13直接结合在PtWUS的启动子上正调控其表达 | 第58-61页 |
3.4.1 PtRR13对PtWUS1有正调控作用 | 第58-59页 |
3.4.2 PtRR13直接结合在PtWUS1和PtWUS2的启动子上 | 第59-61页 |
4 讨论 | 第61-64页 |
4.1 生长素和细胞分裂素响应信号分布模式在杨树与拟南芥之间存在保守性 | 第61页 |
4.2 杨树PtWUS1和PtWUS2的表达模式存在差异 | 第61-62页 |
4.3 PtRR13和PtWUS1对芽再生的调控作用依赖于基因表达模式 | 第62-63页 |
4.4 PtRR13直接调控PtWUS1转录 | 第63-64页 |
5 结论 | 第64-65页 |
参考文献 | 第65-79页 |
致谢 | 第79-80页 |
攻读学位期间发表的论文及成果 | 第80页 |