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二化螟取食诱导蛋白酶抑制剂基因OsLTPL164和OsLTPL151的表达模式及干扰载体构建

摘要第11-12页
Abstract第12-13页
第一章 文献综述第14-27页
    1.1 二化螟的危害及防治现状第14-17页
        1.1.1 二化螟的危害第14-15页
        1.1.2 二化螟的分布第15-16页
        1.1.3 二化螟的防治技术第16-17页
    1.2 植物对昆虫的防御机制第17-19页
        1.2.1 组成型防御第18页
        1.2.2 诱导型防御第18-19页
    1.3 植物蛋白酶抑制剂基因第19-21页
        1.3.1 植物蛋白酶抑制剂基因的分布和分类第19页
        1.3.2 植物α-淀粉酶/胰蛋白酶抑制剂家族的结构第19页
        1.3.3 植物蛋白酶抑制剂的抗虫机制研究第19-20页
        1.3.4 植物非特异性脂质转移蛋白家族的结构和功能第20-21页
        1.3.5 植物LTP家族基因的表达模式第21页
    1.4 植物α-淀粉酶的研究进展第21-22页
        1.4.1 植物α-淀粉酶的功能介绍第21-22页
        1.4.2 逆境下水稻α-淀粉酶活性变化研究第22页
    1.5 RNA干扰技术和超表达在基因功能研究中的应用第22-24页
        1.5.1 RNA干扰技术的机制第22-23页
        1.5.2 RNA干扰技术在基因功能中的研究进展第23-24页
        1.5.3 基因超表达的原理及在水稻中的研究进展第24页
    1.6 本文的研究思路第24-27页
        1.6.1 研究目的与意义第24-25页
        1.6.2 研究内容与方法第25-26页
        1.6.3 研究技术路线第26-27页
第二章 水稻蛋白酶抑制剂基因OsLTPL164和OsLTPL151的二级结构预测及表达模式分析第27-41页
    2.1 材料与方法第28-32页
        2.1.1 供试水稻第28页
        2.1.2 供试昆虫第28页
        2.1.3 试验所需仪器设备及试剂第28-29页
        2.1.4 水稻种植第29页
        2.1.5 二化螟接虫处理第29页
        2.1.6 机械损伤处理第29页
        2.1.7 基因OsLTPL164和OsLTPL151的二级结构与结构域分析第29页
        2.1.8 总RNA的提取与cDNA第一链的合成第29-31页
        2.1.9 实时荧光定量PCR分析第31-32页
        2.1.10 数据分析第32页
    2.2 结果与分析第32-38页
        2.2.1 OsLTPL164和OsLTPL151基因的二级结构及结构域分析第32-33页
        2.2.2 蛋白酶抑制剂基因OsLTPL164的组成型表达分析第33-34页
        2.2.3 蛋白酶抑制剂基因OsLTPL151的组成型表达分析第34-35页
        2.2.4 蛋白酶抑制剂基因OsLTPL164的诱导型表达分析第35-37页
        2.2.5 蛋白酶抑制剂基因OsLTPL151的诱导型表达分析第37-38页
    2.3 结论与讨论第38-41页
第三章 二化螟取食和机械损伤下水稻α-淀粉酶的活性分析第41-47页
    3.1 材料与方法第41-43页
        3.1.1 供试材料第41页
        3.1.2 试验所需仪器设备及试剂第41-42页
        3.1.3 二化螟取食和机械损伤下水稻α-淀粉酶的测定第42-43页
        3.1.4 α-淀粉酶的计算方法第43页
        3.1.5 数据统计分析第43页
    3.2 结果与分析第43-45页
        3.2.1 三个水稻品系本体的α-淀粉酶的活性分析第43-44页
        3.2.2 二化螟取食下三个水稻品系α-淀粉酶的活性分析第44-45页
        3.2.3 机械损伤下三个水稻品系水稻α-淀粉酶的活性分析第45页
    3.3 结论与讨论第45-47页
第四章 OsLTPL164和OsLTPL151基因沉默和超表达载体构建第47-63页
    4.1 材料与方法第47-58页
        4.1.1 供试材料第47页
        4.1.2 菌株和质粒第47-48页
        4.1.3 试验所需仪器设备及试剂第48-49页
        4.1.4 总RNA的提取与cDNA第一链的合成第49-50页
        4.1.5 干扰目的片段和ORF片段的RT-PCR扩增第50-51页
        4.1.6 OsLTPL164和OsLTPL151基因沉默载体的构建第51-54页
        4.1.7 OsLTPL164和OsLTPL151基因超表达载体的构建第54-56页
        4.1.8 根癌农杆菌感受态细胞的制备及电转化第56页
        4.1.9 根癌农杆菌介导的水稻遗传转化第56-58页
    4.2 结果与分析第58-61页
        4.2.1 OsLTPL164和OsLTPL151基因的克隆第58页
        4.2.2 OsLTPL164和OsLTPL151基因沉默载体和超表达载体的构建第58-60页
        4.2.3 根癌农杆菌介导的遗传转化第60-61页
    4.3 结论与讨论第61-63页
第五章 全文总结第63-64页
    5.1 水稻蛋白酶抑制剂基因OsLTPL164和OsLTPL151的二级结构预测及表达谱分析第63页
    5.2 二化螟取食和机械损伤下水稻α-淀粉酶的活性分析第63页
    5.3 OsLTPL164和OsLTPL151基因沉默载体和超表达载体构建第63-64页
参考文献第64-74页
附录第74-80页
    附图第74-75页
    附表第75-80页
致谢第80-82页
攻读硕士学位期间发表文章第82-83页

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