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铁离子通道关键酶基因ClNPS6和ClFtr1调控玉米弯孢叶斑病菌致病力的分子机制

中文摘要第10-13页
英文摘要第13-15页
前言第16-18页
第一章 玉米弯孢叶斑病菌致病机制与植物病原真菌铁离子代谢研究进展第18-28页
    1.1 玉米弯孢叶斑病菌致病机制研究进展第18-20页
    1.2 植物病原菌铁离子代谢研究进展第20-26页
    1.3 铁离子调控植物病原真菌致病力研究进展第26-28页
第二章 非核糖体肽合成酶(NRPS)基因对玉米弯孢叶斑病菌致病力影响第28-53页
    第一节 玉米弯孢叶斑病菌NRPS生物信息学分析第28-35页
        2.1 材料与方法第28-30页
        2.2 结果与分析第30-33页
            2.2.1 核苷酸序列获得第30页
            2.2.2 ORF分析第30页
            2.2.3 理化性质分析第30页
            2.2.4 蛋白质二级结构分析第30-31页
            2.2.5 亚细胞定位预测第31页
            2.2.6 蛋白功能结构域分析第31-32页
            2.2.7 NRPS结构预测第32-33页
            2.2.8 ClNRPS进化分析第33页
        2.3 小结第33-35页
    第二节 玉米弯孢叶斑病菌非核糖体肽合成酶基因敲除载体构建第35-47页
        2.1 材料与方法第35-44页
        2.2 结果与分析第44-47页
            2.2.1 侧翼片段的获得第44-45页
            2.2.2 敲除载体构建与验证第45-46页
            2.2.3 敲除载体转入农杆菌PCR验证第46-47页
        2.3 小结第47页
    第三节 玉米弯孢叶斑病菌非核糖肽合成酶基因突变体致病力检测第47-53页
        2.1 材料与方法第47-50页
        2.2 结果与分析第50-52页
            2.2.1 ClNRPS突变体的获得第50-51页
            2.2.2 ClNRPS突变体致病力测定第51-52页
        2.3 小结第52-53页
第三章 铁离子对玉米弯孢叶斑病菌生长发育的影响第53-66页
    3.1 材料和方法第53-57页
    3.2 结果与分析第57-64页
        3.2.1 铁离子对C.lunata生长的影响第57-59页
        3.2.2 铁离子对C.lunata分生孢子产生,萌发和芽管长度的影响第59页
        3.2.3 铁离子对C.lunata致病力的影响第59-62页
        3.2.4 铁离子对C.lunata毒素的影响第62页
        3.2.5 铁离子对离、活体细胞壁降解酶活性的影响第62-64页
    3.3 小结第64-66页
第四章 铁载体(SIA)和还原铁(RIA)吸收途径中关键酶基因克隆及功能分析第66-103页
    第一节 ClNPS6和ClFtr1基因敲除及互补载体构建第67-79页
        4.1 材料与方法第67-73页
        4.2 结果与分析第73-79页
            4.2.1 玉米叶片铁离子含量测定第73-74页
            4.2.2 不同铁离子浓度条件下ClNPS6和ClFtr1的表达第74页
            4.2.3 ClNPS6和ClFtr1同源性分析第74-76页
            4.2.4 5'端与3'端侧翼片段的获得第76-77页
            4.2.5 侧翼片段与双元载体连接第77-78页
            4.2.6 农杆菌PCR验证第78-79页
        4.3 小结第79页
    第二节 ClNPS6和ClFtr1功能分析第79-95页
        4.1 材料与方法第79-83页
        4.2 结果与分析第83-95页
            4.2.1 突变体获得第83-84页
            4.2.2 铁载体鉴定第84-85页
            4.2.3 生长速率测定第85-87页
            4.2.4 产孢量测定第87-89页
            4.2.5 附着胞测定第89页
            4.2.6 子囊及子囊孢子测定第89-90页
            4.2.7 敏感性测定第90-93页
            4.2.8 致病力测定第93-95页
        4.3 小结第95页
    第三节 铁载体途径(SIA)转运蛋白基因克隆及功能分析第95-103页
        4.1 材料与方法第95-98页
        4.2 结果与分析第98-102页
            4.2.1 转运蛋白基因表达检测第98页
            4.2.2 敲除载体构建第98-99页
            4.2.3 突变体获得第99页
            4.2.4 突变体生长速率测定第99-100页
            4.2.5 突变体产孢量及孢子萌发测定第100页
            4.2.6 突变体附着胞产生测定第100-101页
            4.2.7 突变体致病力测定第101-102页
        4.3 小结第102-103页
第五章 ClFtr1和ClNPS6调控玉米弯孢叶斑病菌致病力分子机制第103-114页
    第一节 转录水平分析ClFtr1和ClNPS6的调控作用第103-110页
        5.1 材料与方法第103-104页
        5.2 结果与分析第104-109页
            5.2.1 测序结果第104-107页
            5.1.2 新基因分析第107页
            5.1.3 下调差异表达基因筛选及聚类分析第107-108页
            5.1.4 qRT-PCR验证结果第108-109页
        5.3 小结第109-110页
    第二节 ClFtr1和ClNPS6调控玉米弯孢叶斑病菌致病力分子机制第110-114页
        5.1 材料与方法第110页
        5.2 结果与分析第110-113页
            5.2.1 侵染过程中ClNPS6和ClFtr1表达第110-112页
            5.2.2 侵染过程组织学观察第112页
            5.2.3 侵染过程中ClNPS6和ClFtr1对致病因子相关基因表达的影响第112-113页
        5.3 小结第113-114页
第六章 结论与讨论第114-117页
    6.1 结论第114-116页
    6.2 有待进一步研究之处第116页
    6.3 论文创新点第116-117页
参考文献第117-126页
致谢第126-128页
攻读博士学位期间发表学术论文第128-129页

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