中文摘要 | 第10-13页 |
英文摘要 | 第13-15页 |
前言 | 第16-18页 |
第一章 玉米弯孢叶斑病菌致病机制与植物病原真菌铁离子代谢研究进展 | 第18-28页 |
1.1 玉米弯孢叶斑病菌致病机制研究进展 | 第18-20页 |
1.2 植物病原菌铁离子代谢研究进展 | 第20-26页 |
1.3 铁离子调控植物病原真菌致病力研究进展 | 第26-28页 |
第二章 非核糖体肽合成酶(NRPS)基因对玉米弯孢叶斑病菌致病力影响 | 第28-53页 |
第一节 玉米弯孢叶斑病菌NRPS生物信息学分析 | 第28-35页 |
2.1 材料与方法 | 第28-30页 |
2.2 结果与分析 | 第30-33页 |
2.2.1 核苷酸序列获得 | 第30页 |
2.2.2 ORF分析 | 第30页 |
2.2.3 理化性质分析 | 第30页 |
2.2.4 蛋白质二级结构分析 | 第30-31页 |
2.2.5 亚细胞定位预测 | 第31页 |
2.2.6 蛋白功能结构域分析 | 第31-32页 |
2.2.7 NRPS结构预测 | 第32-33页 |
2.2.8 ClNRPS进化分析 | 第33页 |
2.3 小结 | 第33-35页 |
第二节 玉米弯孢叶斑病菌非核糖体肽合成酶基因敲除载体构建 | 第35-47页 |
2.1 材料与方法 | 第35-44页 |
2.2 结果与分析 | 第44-47页 |
2.2.1 侧翼片段的获得 | 第44-45页 |
2.2.2 敲除载体构建与验证 | 第45-46页 |
2.2.3 敲除载体转入农杆菌PCR验证 | 第46-47页 |
2.3 小结 | 第47页 |
第三节 玉米弯孢叶斑病菌非核糖肽合成酶基因突变体致病力检测 | 第47-53页 |
2.1 材料与方法 | 第47-50页 |
2.2 结果与分析 | 第50-52页 |
2.2.1 ClNRPS突变体的获得 | 第50-51页 |
2.2.2 ClNRPS突变体致病力测定 | 第51-52页 |
2.3 小结 | 第52-53页 |
第三章 铁离子对玉米弯孢叶斑病菌生长发育的影响 | 第53-66页 |
3.1 材料和方法 | 第53-57页 |
3.2 结果与分析 | 第57-64页 |
3.2.1 铁离子对C.lunata生长的影响 | 第57-59页 |
3.2.2 铁离子对C.lunata分生孢子产生,萌发和芽管长度的影响 | 第59页 |
3.2.3 铁离子对C.lunata致病力的影响 | 第59-62页 |
3.2.4 铁离子对C.lunata毒素的影响 | 第62页 |
3.2.5 铁离子对离、活体细胞壁降解酶活性的影响 | 第62-64页 |
3.3 小结 | 第64-66页 |
第四章 铁载体(SIA)和还原铁(RIA)吸收途径中关键酶基因克隆及功能分析 | 第66-103页 |
第一节 ClNPS6和ClFtr1基因敲除及互补载体构建 | 第67-79页 |
4.1 材料与方法 | 第67-73页 |
4.2 结果与分析 | 第73-79页 |
4.2.1 玉米叶片铁离子含量测定 | 第73-74页 |
4.2.2 不同铁离子浓度条件下ClNPS6和ClFtr1的表达 | 第74页 |
4.2.3 ClNPS6和ClFtr1同源性分析 | 第74-76页 |
4.2.4 5'端与3'端侧翼片段的获得 | 第76-77页 |
4.2.5 侧翼片段与双元载体连接 | 第77-78页 |
4.2.6 农杆菌PCR验证 | 第78-79页 |
4.3 小结 | 第79页 |
第二节 ClNPS6和ClFtr1功能分析 | 第79-95页 |
4.1 材料与方法 | 第79-83页 |
4.2 结果与分析 | 第83-95页 |
4.2.1 突变体获得 | 第83-84页 |
4.2.2 铁载体鉴定 | 第84-85页 |
4.2.3 生长速率测定 | 第85-87页 |
4.2.4 产孢量测定 | 第87-89页 |
4.2.5 附着胞测定 | 第89页 |
4.2.6 子囊及子囊孢子测定 | 第89-90页 |
4.2.7 敏感性测定 | 第90-93页 |
4.2.8 致病力测定 | 第93-95页 |
4.3 小结 | 第95页 |
第三节 铁载体途径(SIA)转运蛋白基因克隆及功能分析 | 第95-103页 |
4.1 材料与方法 | 第95-98页 |
4.2 结果与分析 | 第98-102页 |
4.2.1 转运蛋白基因表达检测 | 第98页 |
4.2.2 敲除载体构建 | 第98-99页 |
4.2.3 突变体获得 | 第99页 |
4.2.4 突变体生长速率测定 | 第99-100页 |
4.2.5 突变体产孢量及孢子萌发测定 | 第100页 |
4.2.6 突变体附着胞产生测定 | 第100-101页 |
4.2.7 突变体致病力测定 | 第101-102页 |
4.3 小结 | 第102-103页 |
第五章 ClFtr1和ClNPS6调控玉米弯孢叶斑病菌致病力分子机制 | 第103-114页 |
第一节 转录水平分析ClFtr1和ClNPS6的调控作用 | 第103-110页 |
5.1 材料与方法 | 第103-104页 |
5.2 结果与分析 | 第104-109页 |
5.2.1 测序结果 | 第104-107页 |
5.1.2 新基因分析 | 第107页 |
5.1.3 下调差异表达基因筛选及聚类分析 | 第107-108页 |
5.1.4 qRT-PCR验证结果 | 第108-109页 |
5.3 小结 | 第109-110页 |
第二节 ClFtr1和ClNPS6调控玉米弯孢叶斑病菌致病力分子机制 | 第110-114页 |
5.1 材料与方法 | 第110页 |
5.2 结果与分析 | 第110-113页 |
5.2.1 侵染过程中ClNPS6和ClFtr1表达 | 第110-112页 |
5.2.2 侵染过程组织学观察 | 第112页 |
5.2.3 侵染过程中ClNPS6和ClFtr1对致病因子相关基因表达的影响 | 第112-113页 |
5.3 小结 | 第113-114页 |
第六章 结论与讨论 | 第114-117页 |
6.1 结论 | 第114-116页 |
6.2 有待进一步研究之处 | 第116页 |
6.3 论文创新点 | 第116-117页 |
参考文献 | 第117-126页 |
致谢 | 第126-128页 |
攻读博士学位期间发表学术论文 | 第128-129页 |