| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 1 前言 | 第10-17页 |
| 1.1 杆菌肽概述 | 第10-12页 |
| 1.1.1 杆菌肽的结构及理化性质 | 第10-11页 |
| 1.1.2 杆菌肽的合成途径 | 第11页 |
| 1.1.3 杆菌肽的作用机理 | 第11-12页 |
| 1.1.4 杆菌肽的应用 | 第12页 |
| 1.2 微生物菌种选育的研究进展 | 第12-13页 |
| 1.3 透明颤菌血红蛋白基因及其应用 | 第13-14页 |
| 1.3.1 透明颤菌血红蛋白基因简介 | 第13页 |
| 1.3.2 透明颤菌血红蛋白在生物发酵过程中的应用 | 第13-14页 |
| 1.4 杆菌肽的效价测定 | 第14-16页 |
| 1.4.1 常用的抗生素效价测定方法 | 第14-15页 |
| 1.4.2 微孔板测定法 | 第15-16页 |
| 1.5 研究目的和意义 | 第16-17页 |
| 2 材料与方法 | 第17-27页 |
| 2.1 实验材料 | 第17-20页 |
| 2.1.1 菌株与质粒 | 第17页 |
| 2.1.2 PCR引物 | 第17-18页 |
| 2.1.3 培养基、抗生素使用浓度及培养温度 | 第18页 |
| 2.1.4 工具酶及试剂 | 第18页 |
| 2.1.5 各种抽提液 | 第18-19页 |
| 2.1.6 实验仪器 | 第19-20页 |
| 2.2 实验方法 | 第20-27页 |
| 2.2.1 诱变处理 | 第20-22页 |
| 2.2.2 核酸水平操作 | 第22-23页 |
| 2.2.3 重组质粒转化 | 第23-24页 |
| 2.2.4 CO差光光谱法检测血红蛋白表达 | 第24页 |
| 2.2.5 杆菌肽摇瓶发酵培养条件 | 第24页 |
| 2.2.6 杆菌肽发酵罐分批发酵培养条件 | 第24-25页 |
| 2.2.7 微孔板测定法 | 第25-27页 |
| 3 结果与分析 | 第27-43页 |
| 3.1 诱变选育 | 第27-29页 |
| 3.1.1 紫外线诱变的致死曲线 | 第27页 |
| 3.1.2 硫酸二乙酯诱变的致死曲线 | 第27-28页 |
| 3.1.3 复合诱变 | 第28-29页 |
| 3.2 vgb基因在地衣芽胞杆菌中的表达 | 第29-38页 |
| 3.2.1 穿梭质粒pHY300-vgb构建 | 第29-30页 |
| 3.2.2 穿梭质粒的电转化 | 第30-32页 |
| 3.2.3 CO差光光谱法检测VHb在地衣芽胞杆菌中的表达 | 第32-33页 |
| 3.2.4 摇瓶发酵 | 第33-34页 |
| 3.2.5 3L发酵罐分批发酵 | 第34-36页 |
| 3.2.6 整合型质粒的构建 | 第36-38页 |
| 3.3 杆菌肽效价微孔板测定方法的建立 | 第38-43页 |
| 3.3.1 藤黄微球菌生长曲线的测定 | 第38页 |
| 3.3.2 优化指示菌的浓度和培养时间 | 第38-41页 |
| 3.3.3 精密度实验 | 第41-43页 |
| 4 结论与展望 | 第43-44页 |
| 4.1 结论 | 第43页 |
| 4.2 展望 | 第43-44页 |
| 参考文献 | 第44-51页 |
| 致谢 | 第51-52页 |
| 在读期间待发表论文 | 第52页 |