| 摘要 | 第6-7页 |
| ABSTRACT | 第7-8页 |
| 目录 | 第9-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-25页 |
| 1.1 紫花苜蓿抗旱和耐盐性研究概述 | 第13-16页 |
| 1.1.1 紫花苜蓿抗旱生理研究 | 第13-15页 |
| 1.1.2 紫花苜蓿耐盐生理研究 | 第15-16页 |
| 1.2 植物基因的克隆方法 | 第16-18页 |
| 1.2.1 同源克隆法 | 第16-17页 |
| 1.2.2 电子克隆 | 第17页 |
| 1.2.3 图位克隆法 | 第17-18页 |
| 1.2.4 mRNA差别显示技术 | 第18页 |
| 1.2.5 抑制性差减杂交 | 第18页 |
| 1.3 紫花苜蓿转基因研究进展 | 第18-23页 |
| 1.3.1 紫花苜蓿转基因方法 | 第19-21页 |
| 1.3.2 紫花苜蓿转基因研究现状 | 第21-23页 |
| 1.3.3 苜蓿转基因应用前景 | 第23页 |
| 1.4 试验目的和意义 | 第23-25页 |
| 第二章 紫花苜蓿MsDUF基因的克隆及序列分析 | 第25-34页 |
| 2.1 材料与方法 | 第25-29页 |
| 2.1.1 试验材料 | 第25-26页 |
| 2.1.2 试验方法 | 第26-29页 |
| 2.2 结果与分析 | 第29-32页 |
| 2.2.1 RNA的提取及cDNA合成 | 第29-30页 |
| 2.2.2 RACE法克隆得到紫花苜蓿MsDUF全长 | 第30页 |
| 2.2.3 MsDUF全长的菌落PCR鉴定 | 第30-31页 |
| 2.2.4 MsDUF核苷酸及氨基酸序列分析 | 第31-32页 |
| 2.2.5 MsDUF的亲疏水性分析 | 第32页 |
| 2.2.6 MsDUF的二级结构分析 | 第32页 |
| 2.3 讨论 | 第32-33页 |
| 2.4 小结 | 第33-34页 |
| 第三章 MsDUF基因的表达分析 | 第34-39页 |
| 3.1 材料与方法 | 第34-35页 |
| 3.1.1 植物材料与处理 | 第34页 |
| 3.1.2 引物设计 | 第34页 |
| 3.1.3 实验仪器 | 第34页 |
| 3.1.4 实时荧光定量检测MsDUF基因 | 第34-35页 |
| 3.2 结果与分析 | 第35-37页 |
| 3.2.1 MsDUF基因的组织特异性表达 | 第35页 |
| 3.2.2 不同时间PEG胁迫下MsDUF基因的变化 | 第35-36页 |
| 3.2.3 不同时间NaCl胁迫下MsDUF基因的变化 | 第36页 |
| 3.2.4 不同时间ABA诱导下MsDUF基因的变化 | 第36-37页 |
| 3.2.5 不同时间GA3诱导下MsDUF基因的变化 | 第37页 |
| 3.3 讨论 | 第37-38页 |
| 3.4 小结 | 第38-39页 |
| 第四章 MsDUF基因表达载体的构建及对烟草的遗传转化 | 第39-50页 |
| 4.1 材料与方法 | 第39-44页 |
| 4.1.1 材料 | 第39-40页 |
| 4.1.2 方法 | 第40-44页 |
| 4.2 结果与分析 | 第44-48页 |
| 4.2.1 MsDUF基因瞬时表达载体的构建与鉴定 | 第44-45页 |
| 4.2.2 MsDUF基因的亚细胞定位 | 第45页 |
| 4.2.3 MsDUF基因超表达载体的构建与鉴定 | 第45-46页 |
| 4.2.4 转基因植株的获得 | 第46-47页 |
| 4.2.5 转基因烟草的PCR检测 | 第47-48页 |
| 4.2.6 转基因烟草的RT-PCR检测 | 第48页 |
| 4.3 讨论 | 第48-49页 |
| 4.4 小结 | 第49-50页 |
| 第五章 MsDUF转基因烟草的抗逆性检测 | 第50-58页 |
| 5.1 材料与方法 | 第50-51页 |
| 5.1.1 材料 | 第50页 |
| 5.1.2 方法 | 第50页 |
| 5.1.3 指标测定 | 第50-51页 |
| 5.1.4 数据处理 | 第51页 |
| 5.2 结果与分析 | 第51-57页 |
| 5.2.1 转基因烟草抗旱性检测 | 第51-54页 |
| 5.2.2 转基因烟草耐盐性检测 | 第54-57页 |
| 5.3 讨论 | 第57页 |
| 5.4 小结 | 第57-58页 |
| 第六章 农杆菌介导的MsDUF基因对紫花苜蓿的转化及分子鉴定 | 第58-62页 |
| 6.1 材料与方法 | 第58-59页 |
| 6.1.1 材料 | 第58页 |
| 6.1.2 方法 | 第58-59页 |
| 6.2 结果与分析 | 第59-61页 |
| 6.2.1 转基因苜蓿的获得 | 第59-60页 |
| 6.2.2 转基因苜蓿的PCR检测 | 第60页 |
| 6.2.3 转基因苜蓿的RT-PCR检测 | 第60-61页 |
| 6.3 讨论 | 第61页 |
| 6.4 小结 | 第61-62页 |
| 第七章 MsDUF转基因苜蓿的抗逆性检测 | 第62-70页 |
| 7.1 材料与方法 | 第62-63页 |
| 7.1.1 植物材料 | 第62页 |
| 7.1.2 方法 | 第62页 |
| 7.1.3 指标测定 | 第62页 |
| 7.1.4 数据处理 | 第62-63页 |
| 7.2 结果与分析 | 第63-68页 |
| 7.2.1 转基因苜蓿抗旱性检测 | 第63-65页 |
| 7.2.2 转基因苜蓿耐盐性检测 | 第65-68页 |
| 7.3 讨论 | 第68页 |
| 7.4 小结 | 第68-70页 |
| 第八章 结论 | 第70-71页 |
| 本文创新点 | 第71-72页 |
| 参考文献 | 第72-81页 |
| 附录 | 第81-89页 |
| 致谢 | 第89-90页 |
| 作者简介 | 第90-91页 |
