摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
0 前言 | 第13-26页 |
0.1 细菌感染及抗生素治疗困境 | 第13页 |
0.2 细菌群体感应调控系统及研究进展 | 第13-16页 |
0.2.1 细菌群体感应现象的提出 | 第13-14页 |
0.2.2 细菌群体感应调控系统的分类 | 第14-15页 |
0.2.3 群体感应信号分子特征 | 第15-16页 |
0.3 铜绿假单胞菌群体感应调控系统 | 第16-19页 |
0.3.1 铜绿假单胞菌群体感应调控系统组成 | 第16页 |
0.3.2 铜绿假单胞菌群体感应调控网路 | 第16-17页 |
0.3.3 铜绿假单胞群体感应调控与细菌感染关系 | 第17-19页 |
0.4 铜绿假单胞菌喹诺酮信号系统 | 第19-22页 |
0.4.1 铜绿假单胞菌喹诺酮信号系统信号分子合成及调节 | 第19-20页 |
0.4.2 铜绿假单胞菌喹诺酮信号系统研究意义 | 第20-22页 |
0.5 群体感应调控系统抑制剂研究进展 | 第22-24页 |
0.5.1 群体感应抑制剂作用途径 | 第22-23页 |
0.5.2 群体感应系统抑制剂筛选模型 | 第23-24页 |
0.5.3 铜绿假单胞菌群体感应抑制剂研究进展 | 第24页 |
0.6 本文研究目的及意义 | 第24-26页 |
1. 喹诺酮信号系统抑制剂筛选模型的构建及灵敏性测试 | 第26-44页 |
1.1 实验材料、试剂及仪器 | 第26-28页 |
1.1.1 酶和试剂盒 | 第26页 |
1.1.2 试剂及溶液成分 | 第26-27页 |
1.1.3 菌株和质粒 | 第27-28页 |
1.1.4 设备 | 第28页 |
1.2 实验方法 | 第28-37页 |
1.2.1 构建筛选模型质粒pPQSI1 | 第28-33页 |
1.2.2 模型质粒pPQSI2的构建 | 第33-34页 |
1.2.3 构建模型菌株PQSI1及PQSI2 | 第34-36页 |
1.2.4 PQSI1筛选模型条件确定及灵敏性检测 | 第36页 |
1.2.5 PQSI2筛选模型条件确定及灵敏性检测 | 第36-37页 |
1.3 实验结果 | 第37-43页 |
1.3.1 筛选模型质粒pPQSI1及pPQSI2的构建 | 第37-40页 |
1.3.2 模型菌株PQSI1及PQSI2的构建 | 第40-41页 |
1.3.3 PQSI1筛选模型条件确定及灵敏性检测结果 | 第41-42页 |
1.3.4 PQSI2筛选模型条件确定及灵敏性检测 | 第42-43页 |
1.4 讨论 | 第43页 |
小结 | 第43-44页 |
2. 中药粗提物群体感应抑制活性检测及抑制剂分离纯化 | 第44-63页 |
2.1 实验材料、试剂及仪器 | 第44-45页 |
2.1.1 实验材料及试剂 | 第44-45页 |
2.1.2 实验设备 | 第45页 |
2.1.3 检测使用筛选模型菌株构建方法见1.2.3 | 第45页 |
2.2 实验方法 | 第45-50页 |
2.2.1 中药粗提物的制备 | 第45页 |
2.2.2 中药粗提物的群体感应抑制活性检测 | 第45-46页 |
2.2.3 中药羌活对群体感应抑制活性分析 | 第46-48页 |
2.2.4 中药羌活粗提物中群体感应抑制活性化合物的分离纯化 | 第48-49页 |
2.2.5 群体感应抑制活性化合物F3-20-4结构鉴定 | 第49-50页 |
2.3 实验结果 | 第50-62页 |
2.3.1 中药粗提物制备 | 第50页 |
2.3.2 中药粗提物群体感应抑制活性筛选结果 | 第50-51页 |
2.3.3 中药羌活甲醇粗提物群体感应抑制活性的确定 | 第51-53页 |
2.3.4 中药羌活中群体感应抑制活性化合物的分析 | 第53-55页 |
2.3.5 羌活中群体感应抑制活性化合物的分离纯化 | 第55-58页 |
2.3.6 活性化合物F3-20-4结构鉴定 | 第58-62页 |
2.4 讨论 | 第62页 |
小结 | 第62-63页 |
3. 法卡林二醇群体感应抑制活性评价 | 第63-83页 |
3.1 实验材料、试剂及仪器 | 第63-65页 |
3.1.1 酶和试剂盒 | 第63-64页 |
3.1.2 试剂及溶液成分 | 第64-65页 |
3.1.3 菌株和质粒 | 第65页 |
3.1.4 设备 | 第65页 |
3.2 实验方法 | 第65-73页 |
3.2.1 法卡林二醇对铜绿假单胞菌PAOI亚抑菌浓度的测定 | 第65-66页 |
3.2.2 铜绿假单胞菌PAOI对法卡林二醇的生长曲线测定 | 第66页 |
3.2.3 法卡林二醇对铜绿假单胞菌las群体感应系统抑制活性的检测 | 第66页 |
3.2.4 检测法卡林二醇对铜绿假单胞菌喹诺酮群体感应系统抑制活性 | 第66页 |
3.2.5 铜绿假单胞菌毒力因子检测方法 | 第66-69页 |
3.2.6 铜绿假单胞菌生物被膜测定 | 第69页 |
3.2.7 法卡林二醇对铜绿假单胞菌Swarming运动影响检测 | 第69页 |
3.2.8 法卡林二醇对PAOI群体感应las及pqs系统的异源抑制作用检测 | 第69-70页 |
3.2.9 RT-PCR检测法卡林二醇对群体感应调控相关基因表达的影响 | 第70-72页 |
3.2.10 检测法卡林二醇对紫色杆菌群体感应抑制活性 | 第72-73页 |
3.3 实验结果 | 第73-82页 |
3.3.1 法卡林二醇对铜绿假单胞菌PAOI亚抑菌浓度测定结果 | 第73页 |
3.3.2 法卡林二醇对铜绿假单胞菌PAOI生长曲线的绘制 | 第73页 |
3.3.3 法卡林二醇对铜绿假单胞菌las系统抑制活性 | 第73-74页 |
3.3.4 法卡林二醇对铜绿假单胞菌喹诺酮信号系统抑制活性检测结果 | 第74页 |
3.3.5 法卡林二醇对铜绿假单胞菌PAOI毒力因子产量的影响 | 第74-77页 |
3.3.6 法卡林二醇对PAOI生物被膜形成的影响 | 第77-78页 |
3.3.7 法卡林二醇对swarming运动的影响 | 第78页 |
3.3.8 异源检测法卡林二醇对铜绿假单胞菌1as及pqs系统的抑制作用结果 | 第78-79页 |
3.3.9 法卡林二醇对PAOI群体感应相关基因表达的影响 | 第79-81页 |
3.3.10 法卡林二醇对紫色杆菌群体感应抑制作用结果 | 第81-82页 |
3.4 讨论 | 第82页 |
小结 | 第82-83页 |
4 总结与展望 | 第83-84页 |
4.1 本课题研究主要取得以下几个方面的研究成果 | 第83页 |
4.2 工作展望 | 第83-84页 |
参考文献 | 第84-89页 |
致谢 | 第89-90页 |
个人简历、在学期间发表的学术论文与研究成果 | 第90页 |