摘要 | 第4-5页 |
ABSTRACT | 第5-6页 |
目录 | 第7-9页 |
1 绪论 | 第9-12页 |
2 材料与方法 | 第12-30页 |
2.1 实验材料 | 第12-14页 |
2.1.1 组织标本收集 | 第12页 |
2.1.2 主要实验仪器 | 第12-13页 |
2.1.3 主要实验试剂 | 第13-14页 |
2.2 荧光定量RT—PCR检测PCA中信号通路相关基因 | 第14-21页 |
2.2.1 总RNA提取 | 第14-15页 |
2.2.2 总RNA纯化 | 第15-16页 |
2.2.3 总RNA纯度及浓度检测 | 第16页 |
2.2.4 cDNA合成 | 第16-18页 |
2.2.5 实时荧光定量PCR | 第18-20页 |
2.2.6 RT~2 PROFILER PCR ARRAY实验流程图 | 第20-21页 |
2.3 荧光定量RT—PCR检测BPH与PCA中目的基因的表达差异 | 第21-28页 |
2.3.1 引物设计合成 | 第22-23页 |
2.3.2 组织总RNA提取与纯化 | 第23-25页 |
2.3.3 总RNA纯度、浓度以及完整性检测 | 第25-26页 |
2.3.4 逆转录反应 | 第26-27页 |
2.3.5 荧光定量PCR反应 | 第27-28页 |
2.4 数据处理与统计学分析 | 第28-30页 |
2.4.1 荧光定量PCR数据处理 | 第29页 |
2.4.2 统计分析 | 第29-30页 |
3 结果 | 第30-49页 |
3.1 总RNA浓度及完整性鉴定结果 | 第30页 |
3.2 荧光定量PCR扩增结果 | 第30-34页 |
3.2.1 PCA和BPH组荧光定量PCR动力学曲线图 | 第30-32页 |
3.2.2 PCA和BPH组荧光定量PCR融解曲线图 | 第32-33页 |
3.2.3 BPH和PCA组荧光定量PCR的CT值 | 第33-34页 |
3.3 PCRARRAY数据分析软件对原始CT值分析结果 | 第34-45页 |
3.3.1 96基因在PCA与BPH中的相对表达及评价结果 | 第35-43页 |
3.3.2 96基因在PCA与BPH组中构成的散点图 | 第43页 |
3.3.3 84关键基因在PCA与BPH组中构成的热图 | 第43-44页 |
3.3.4 17兴趣基因在PCA与BPH组中构成的柱形图 | 第44-45页 |
3.4 GNCPRO数据分析软件模拟兴趣基因的交互网络 | 第45-46页 |
3.5 统计结果 | 第46-49页 |
3.5.1 BPH和PCA组的MANN—-WHITNEY U检验结果 | 第46-47页 |
3.5.2 8个关联基因在BPH与PCA中的相对表达量比较 | 第47-49页 |
4 讨论 | 第49-60页 |
4.1 改良法提取组织总RNA | 第49-52页 |
4.1.1 RNEAS YMINI KIT试剂盒提取组织总RNA | 第49页 |
4.1.2 TRIZOL法提取组织总RNA | 第49-50页 |
4.1.3 TRIZOL法提取组织总RNA后用试剂盒纯化 | 第50-52页 |
4.2 前列腺癌相关信号通路基因的网络调控 | 第52-60页 |
4.2.1 17兴趣基因在BPH和PCA的表达及其意义 | 第53-54页 |
4.2.2 8个关联基因在PCA中的表达及其意义 | 第54-57页 |
4.2.3 EGFR/PI3K/AKT信号通路在PCA中的网络调控作用 | 第57-60页 |
5 结论 | 第60-61页 |
参考文献 | 第61-69页 |
综述 | 第69-81页 |
参考文献 | 第76-81页 |
附录一 | 第81-82页 |
附录二 | 第82-83页 |
攻读学位期间主要的研究成果 | 第83-84页 |
致谢 | 第84页 |