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前列腺癌中多重信号通路的表达检测

摘要第4-5页
ABSTRACT第5-6页
目录第7-9页
1 绪论第9-12页
2 材料与方法第12-30页
    2.1 实验材料第12-14页
        2.1.1 组织标本收集第12页
        2.1.2 主要实验仪器第12-13页
        2.1.3 主要实验试剂第13-14页
    2.2 荧光定量RT—PCR检测PCA中信号通路相关基因第14-21页
        2.2.1 总RNA提取第14-15页
        2.2.2 总RNA纯化第15-16页
        2.2.3 总RNA纯度及浓度检测第16页
        2.2.4 cDNA合成第16-18页
        2.2.5 实时荧光定量PCR第18-20页
        2.2.6 RT~2 PROFILER PCR ARRAY实验流程图第20-21页
    2.3 荧光定量RT—PCR检测BPH与PCA中目的基因的表达差异第21-28页
        2.3.1 引物设计合成第22-23页
        2.3.2 组织总RNA提取与纯化第23-25页
        2.3.3 总RNA纯度、浓度以及完整性检测第25-26页
        2.3.4 逆转录反应第26-27页
        2.3.5 荧光定量PCR反应第27-28页
    2.4 数据处理与统计学分析第28-30页
        2.4.1 荧光定量PCR数据处理第29页
        2.4.2 统计分析第29-30页
3 结果第30-49页
    3.1 总RNA浓度及完整性鉴定结果第30页
    3.2 荧光定量PCR扩增结果第30-34页
        3.2.1 PCA和BPH组荧光定量PCR动力学曲线图第30-32页
        3.2.2 PCA和BPH组荧光定量PCR融解曲线图第32-33页
        3.2.3 BPH和PCA组荧光定量PCR的CT值第33-34页
    3.3 PCRARRAY数据分析软件对原始CT值分析结果第34-45页
        3.3.1 96基因在PCA与BPH中的相对表达及评价结果第35-43页
        3.3.2 96基因在PCA与BPH组中构成的散点图第43页
        3.3.3 84关键基因在PCA与BPH组中构成的热图第43-44页
        3.3.4 17兴趣基因在PCA与BPH组中构成的柱形图第44-45页
    3.4 GNCPRO数据分析软件模拟兴趣基因的交互网络第45-46页
    3.5 统计结果第46-49页
        3.5.1 BPH和PCA组的MANN—-WHITNEY U检验结果第46-47页
        3.5.2 8个关联基因在BPH与PCA中的相对表达量比较第47-49页
4 讨论第49-60页
    4.1 改良法提取组织总RNA第49-52页
        4.1.1 RNEAS YMINI KIT试剂盒提取组织总RNA第49页
        4.1.2 TRIZOL法提取组织总RNA第49-50页
        4.1.3 TRIZOL法提取组织总RNA后用试剂盒纯化第50-52页
    4.2 前列腺癌相关信号通路基因的网络调控第52-60页
        4.2.1 17兴趣基因在BPH和PCA的表达及其意义第53-54页
        4.2.2 8个关联基因在PCA中的表达及其意义第54-57页
        4.2.3 EGFR/PI3K/AKT信号通路在PCA中的网络调控作用第57-60页
5 结论第60-61页
参考文献第61-69页
综述第69-81页
    参考文献第76-81页
附录一第81-82页
附录二第82-83页
攻读学位期间主要的研究成果第83-84页
致谢第84页

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