摘要 | 第4-5页 |
ABSTRACT | 第5-6页 |
中英文缩略词表 | 第9-11页 |
第一章 绪论 | 第11-31页 |
1.1. 逆转录转座子背景知识介绍 | 第11-25页 |
1.1.1. DNA转座子 | 第11-13页 |
1.1.2. 逆转录转座子 | 第13-18页 |
1.1.3. 逆转录转座子对人类基因组进化的影响 | 第18-20页 |
1.1.4. 逆转录转座子与人类疾病之间的联系 | 第20-22页 |
1.1.5. 逆转录转座子的宿主防御机制研究进展 | 第22-25页 |
1.2. APOBEC3家族蛋白介绍 | 第25-29页 |
1.2.1. APOBEC3家族蛋白简介 | 第25-28页 |
1.2.2. APOBEC3家族蛋白对HIV-1 病毒的抑制作用 | 第28-29页 |
1.3. 主要研究内容及意义 | 第29-31页 |
第二章 材料与方法 | 第31-51页 |
2.1. 材料、试剂与仪器 | 第31-36页 |
2.1.1. 菌株和细胞系 | 第31页 |
2.1.2. 质粒构建 | 第31-33页 |
2.1.3. 抗体 | 第33-34页 |
2.1.4. 主要化学试剂 | 第34-35页 |
2.1.5. 引物合成和测序 | 第35页 |
2.1.6. 主要仪器 | 第35-36页 |
2.2. 实验方法 | 第36-51页 |
2.2.1. 一般PCR反应 | 第36-37页 |
2.2.2. 定点突变PCR反应 | 第37-38页 |
2.2.3. 快速琼脂糖凝胶DNA回收 | 第38页 |
2.2.4. 连接反应 | 第38-39页 |
2.2.5. 试剂盒法提取质粒(以无内毒素小提质粒为例) | 第39页 |
2.2.6. 细胞培养 | 第39页 |
2.2.7. 贴壁细胞PEI转染法(以12孔板为例) | 第39-40页 |
2.2.8. 收集细胞分泌病毒方法 | 第40页 |
2.2.9. MAGI-CCR5细胞测定病毒感染性实验 | 第40页 |
2.2.10. 带有Flag标签的蛋白免疫共沉淀法 | 第40-41页 |
2.2.11. 蛋白质免疫印迹法(Western blot) | 第41-42页 |
2.2.12. Trizol法提取RNA、反转录及实时荧光定量PCR | 第42-44页 |
2.2.13. 免疫荧光 | 第44-45页 |
2.2.14. 亚细胞蛋白分离(以亚细胞蛋白分离试剂盒为例) | 第45页 |
2.2.15. 逆转录转座子活性实验 | 第45-47页 |
2.2.16. LEAP实验 | 第47-49页 |
2.2.17. 统计学分析 | 第49-51页 |
第三章 结果与讨论 | 第51-97页 |
3.1. APOBEC3家族蛋白调控逆转录转座子LINE-1 的机制研究 | 第51-87页 |
3.1.1. APOBEC3家族蛋白抑制LINE-1 的活性在家族间是非保守的 | 第51-59页 |
3.1.2. APOBEC3家族蛋白与LINE-1 ORF1p的相互作用 | 第59-65页 |
3.1.3. APOBEC3家族蛋白对LINE-1 ORF2p逆转录酶活性的影响 | 第65-67页 |
3.1.4. APOBEC3家族蛋白对逆转录病毒HIV-1 和逆转录转座子LINE-1 的抑制存在机制上的差异 | 第67-77页 |
3.1.5. APOBEC3H家族蛋白的亚细胞定位对抑制LINE-1 逆转座活性的影响 | 第77-81页 |
3.1.6. 讨论 | 第81-87页 |
3.1.7. 小结 | 第87页 |
3.2. APOBEC3家族蛋白调控逆转录转座子SVA的现象与初步探讨 | 第87-97页 |
3.2.1. APOBEC3家族蛋白对SVA逆转座活性的抑制具有家族保守性 | 第89-91页 |
3.2.2. APOBEC3家族蛋白可结合SVA的RNA | 第91-95页 |
3.2.3. 讨论 | 第95-96页 |
3.2.4. 小结 | 第96-97页 |
第四章 结论 | 第97-99页 |
参考文献 | 第99-113页 |
发表论文及参加科研情况 | 第113-115页 |
致谢 | 第115-116页 |