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山羊胎儿成纤维细胞的培养鉴定及其转基因核移植效率的研究

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-10页
第一章 哺乳动物核移植研究概述第10-21页
   ·核移植的程序第10-18页
     ·受体细胞的准备第10-12页
     ·供体细胞的准备第12-13页
     ·重构胚的构建第13-14页
     ·重构胚的激活第14-16页
     ·重构胚的体外培养第16-18页
   ·体细胞核移植技术的应用第18-20页
   ·结语第20-21页
第二章 山羊胎儿成纤维细胞的分离培养鉴定及细胞周期分析第21-29页
   ·试验材料和方法第22-24页
     ·原代细胞的分离,传代和冻存第22页
     ·细胞的性别鉴定第22-23页
     ·roscovitine 和DMSO 对供体细胞的同期化处理第23页
     ·实验设计第23-24页
     ·数据处理第24页
   ·实验结果与分析第24-26页
     ·细胞增殖第24-25页
     ·性别鉴定结果第25页
     ·roscovitine 和DMSO 对供体细胞的同期化处理第25-26页
   ·讨论第26-28页
   ·小结第28-29页
第三章 不同个体来源的胎儿成纤维细胞对转染效率和重构胚发育的影响第29-35页
   ·实验方法第29-31页
     ·质粒的准备第29页
     ·细胞筛选药物浓度的优化第29-30页
     ·细胞转染及筛选第30页
     ·核移植程序第30页
     ·重构胚的激活和体外培养第30页
     ·试验设计第30-31页
     ·数据分析第31页
   ·实验结果第31-33页
     ·筛选药物浓度第31页
     ·不同遗传背景的胎儿成纤维细胞株对重构胚发育能力的影响第31-32页
     ·不同遗传背景的胎儿成纤维细胞抗筛选能力的差异第32-33页
   ·讨论第33-34页
   ·小结第34-35页
第四章 序贯培养液G1/G2 对山羊核移植胚胎发育和质量的影响第35-42页
   ·材料与方法第35-37页
     ·山羊卵母细胞的采集第35-36页
     ·卵母细胞的体外成熟第36页
     ·供体细胞的准备第36页
     ·核移植程序第36页
     ·重构胚的激活和体外培养第36页
     ·囊胚凋亡染色第36页
     ·胚胎移植第36-37页
     ·克隆羊微卫星鉴定第37页
     ·数据分析第37页
   ·结果与分析第37-39页
     ·不同培养液对山羊核移植胚胎体外发育的影响第37页
     ·不同培养液对囊胚细胞凋亡的影响第37-38页
     ·不同培养液中核移植囊胚移植后的妊娠率第38-39页
     ·流产胎儿微卫星鉴定结果第39页
   ·讨论第39-41页
   ·小结第41-42页
结论第42-43页
参考文献第43-53页
附录第53-54页
致谢第54-55页
作者简介第55页

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