摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
第1章 引言 | 第11-20页 |
1.1 核糖体失活蛋白的研究进展 | 第11-18页 |
1.1.1 茶树核糖体失活蛋白的发现 | 第11-12页 |
1.1.2 核糖体失活蛋白的分布 | 第12-14页 |
1.1.3 茶树核糖体失活蛋白的功能 | 第14-18页 |
1.2 茶树核糖体失活蛋白的概述 | 第18-20页 |
第2章 茶树CsRIP2基因克隆及生化活性分析 | 第20-43页 |
2.1 实验材料 | 第20-25页 |
2.1.1 植物材料 | 第20页 |
2.1.2 质粒与菌种 | 第20-21页 |
2.1.3 主要仪器 | 第21页 |
2.1.4 主要试剂与配制 | 第21-25页 |
2.2 试验方法 | 第25-34页 |
2.2.1 引物设计 | 第25-26页 |
2.2.2 茶树种子总RNA的提取和cDNA的克隆 | 第26-31页 |
2.2.3 CsRIP2 A蛋白的表达纯化 | 第31-32页 |
2.2.4 抗体制备 | 第32-33页 |
2.2.5 CsRIP2 A对无细胞蛋白质合成抑制活性的测定 | 第33页 |
2.2.6 茶树种子蛋白的提取 | 第33-34页 |
2.3 结果与分析 | 第34-40页 |
2.3.1 CsRIP2的cDNA克隆 | 第34-35页 |
2.3.2 CsRIP2基因序列测定及序列分析 | 第35-36页 |
2.3.3 CsRIP2 A链蛋白表达分析 | 第36-37页 |
2.3.4 CsRIP2 A链蛋白纯化 | 第37-38页 |
2.3.5 CsRIP2基因的表达分析 | 第38-39页 |
2.3.6 CsRIP2A链对无细胞蛋白质合成抑制活性的测定 | 第39-40页 |
2.4 讨论 | 第40-43页 |
第3章 CsRIP2 A链蛋白对MCF-7增殖及凋亡的影响 | 第43-59页 |
3.1 实验材料和仪器 | 第43-46页 |
3.1.1 细胞材料 | 第43页 |
3.1.2 主要仪器设备 | 第43-44页 |
3.1.3 主要试剂与配制 | 第44-46页 |
3.2 试验方法 | 第46-50页 |
3.2.1 CsRIP2 A链蛋白的表达与纯化 | 第46页 |
3.2.2 MCF-7细胞的培养 | 第46页 |
3.2.3 MCF-7细胞的复苏 | 第46页 |
3.2.4 MCF-7细胞的传代 | 第46页 |
3.2.5 细胞冻存 | 第46-47页 |
3.2.6 MTT法检测CsRIP2 A链对MCF-7细胞存活的影响 | 第47页 |
3.2.7 CsRIP2 A链对癌细胞细胞增殖抑制的影响 | 第47-48页 |
3.2.8 流式细胞仪检测CsRIP2 A链对MCF-7细胞周期的影响 | 第48页 |
3.2.9 CsRIP2 A链对癌细胞细胞核形态的影响 | 第48-49页 |
3.2.10 CsRIP2 A链对MCF-7细胞细胞凋亡的影响 | 第49-50页 |
3.3 结果 | 第50-57页 |
3.3.1 不同浓度CsRIP2 A链对MCF-7细胞的抑制效应 | 第50-51页 |
3.3.2 流式细胞仪检测CsRIP2 A链蛋白对MCF-7细胞周期的影响 | 第51-53页 |
3.3.3 不同时间点CsRIP2 A链蛋白对MCF-7细胞的抑制分析 | 第53-54页 |
3.3.4 荧光显微镜观察CsRIP2 A链蛋白对MCF-7细胞核形态的影响 | 第54页 |
3.3.5 CsRIP2 A链对MCF-7细胞形态学的影响 | 第54-55页 |
3.3.6 Hochest33342-PI双染观察细胞凋亡 | 第55-56页 |
3.3.7 CsRIP2 A链蛋白对MCF-7细胞内caspase活性的影响 | 第56-57页 |
3.4 讨论 | 第57-59页 |
第4章 结论 | 第59-60页 |
致谢 | 第60-61页 |
参考文献 | 第61-68页 |
攻读学位期间获得与学位论文相关的科研成果目录 | 第68页 |