| 摘要 | 第10-12页 |
| Abstract | 第12-13页 |
| 第一章 可溶性白细胞介素6受体 | 第14-20页 |
| 1.1 sIL-6R的发现 | 第14页 |
| 1.2 sIL-6R的功能 | 第14-16页 |
| 1.3 sIL-6R相关蛋白 | 第16-20页 |
| 1.3.1 IL-6 | 第16-17页 |
| 1.3.2 gp130 | 第17-18页 |
| 1.3.3 IL-27 p28 | 第18-20页 |
| 第二章 干扰素 | 第20-31页 |
| 2.1 干扰素基因 | 第20页 |
| 2.2 Ⅰ型干扰素基因的转录调控机制 | 第20-22页 |
| 2.3 Ⅲ型干扰素的转录调控机制 | 第22-23页 |
| 2.4 干扰素受体 | 第23-25页 |
| 2.5 干扰素基因的表达调节 | 第25-31页 |
| 2.5.1 TLR途径 | 第25-28页 |
| 2.5.2 RLR途径 | 第28-29页 |
| 2.5.3 NLR途径 | 第29-30页 |
| 2.5.4 IFN-λ基因的表达调节 | 第30-31页 |
| 第三章 sIL-6R/p28融合蛋白介导的抗病毒反应和干扰素应答 | 第31-47页 |
| 3.1 实验材料 | 第31-32页 |
| 3.1.1 细胞和病毒 | 第31页 |
| 3.1.2 质粒 | 第31-32页 |
| 3.1.3 试剂 | 第32页 |
| 3.1.4 耗材和仪器 | 第32页 |
| 3.2 实验方法 | 第32-41页 |
| 3.2.1 细胞培养与转染 | 第32-34页 |
| 3.2.2 质粒构建和提取 | 第34-35页 |
| 3.2.3 总RNA的提取和逆转录 | 第35-37页 |
| 3.2.4 荧光定量PCR | 第37-38页 |
| 3.2.5 蛋白质免疫印迹(Western blot) | 第38-39页 |
| 3.2.6 荧光素酶启动子实验 | 第39页 |
| 3.2.7 流感病毒的扩增和效价测定 | 第39-40页 |
| 3.2.8 HBV复制中间体的检测 | 第40-41页 |
| 3.3 实验结果 | 第41-45页 |
| 3.3.1 sIL-6R/p28融合表达蛋白的构建 | 第41-42页 |
| 3.3.2 sIL-6R/p28 FP介导的抗病毒作用 | 第42-43页 |
| 3.3.3 sIL-6R/p28 FP对干扰素的影响 | 第43-45页 |
| 3.3.4 sIL-6R/p28 FP对炎症因子的影响 | 第45页 |
| 3.4 讨论 | 第45-47页 |
| 第四章 sIL-6R在病毒诱导的免疫反应中的必需性研究 | 第47-54页 |
| 4.1 实验材料 | 第47页 |
| 4.1.1 细胞和病毒 | 第47页 |
| 4.1.2 质粒 | 第47页 |
| 4.1.3 试剂 | 第47页 |
| 4.2 实验方法 | 第47-50页 |
| 4.2.1 细胞培养与转染 | 第47-48页 |
| 4.2.2 总RNA的提取和逆转录 | 第48页 |
| 4.2.3 荧光定量PCR | 第48页 |
| 4.2.4 蛋白质免疫印迹(Western Blot) | 第48页 |
| 4.2.5 IL-6R敲除细胞系的构建 | 第48-50页 |
| 4.3 实验结果 | 第50-52页 |
| 4.3.1 IL-6R敲除细胞系中病毒复制水平升高、干扰素应答被抑制 | 第50-51页 |
| 4.3.2 sIL-6R回复表达后病毒复制被抑制、干扰素应答重新被诱导 | 第51-52页 |
| 4.4 讨论 | 第52-54页 |
| 第五章 sIL-6R/p28 FP通过与MAVS和TRAF6相互作用激活天然免疫反应 | 第54-63页 |
| 5.1 实验材料 | 第54-55页 |
| 5.1.1 细胞和病毒 | 第54页 |
| 5.1.2 质粒 | 第54-55页 |
| 5.1.3 试剂 | 第55页 |
| 5.1.4 耗材和仪器 | 第55页 |
| 5.2 实验方法 | 第55-57页 |
| 5.2.1 细胞培养与转染 | 第55页 |
| 5.2.2 质粒构建 | 第55页 |
| 5.2.3 蛋白质免疫印迹(Western Blot) | 第55页 |
| 5.2.4 荧光素酶启动子实验 | 第55页 |
| 5.2.5 蛋白质免疫共沉淀实验 | 第55-56页 |
| 5.2.6 免疫荧光实验 | 第56-57页 |
| 5.3 实验结果 | 第57-61页 |
| 5.3.1 sIL-6R参与到MAVS相关的RIG-Ⅰ信号通路中 | 第57-58页 |
| 5.3.2 sIL-6R/p28 FP和MAVS/TRAF6相互作用 | 第58-59页 |
| 5.3.3 内源sIL-6R和p28在细胞内与TRAF6和MAVS共定位 | 第59-61页 |
| 5.4 讨论 | 第61-63页 |
| 第六章 sIL-6R/p28 FP和MAVS和TRAF6复合物影响IFN-λ1的表达 | 第63-72页 |
| 6.1 实验材料 | 第63-64页 |
| 6.1.1 细胞和病毒 | 第63页 |
| 6.1.2 质粒 | 第63页 |
| 6.1.3 试剂 | 第63-64页 |
| 6.2 实验方法 | 第64-68页 |
| 6.2.1 细胞培养与转染 | 第64页 |
| 6.2.2 质粒构建 | 第64页 |
| 6.2.3 总RNA的提取和逆转录 | 第64页 |
| 6.2.4 荧光定量PCR | 第64页 |
| 6.2.5 蛋白质免疫印迹(Western Blot) | 第64页 |
| 6.2.6 稳定敲减细胞系的构建 | 第64-66页 |
| 6.2.7 染色质免疫共沉淀(ChIP)实验 | 第66-68页 |
| 6.3 实验结果 | 第68-70页 |
| 6.3.1 sIL-6R/p28 FP既通过Ⅰ型干扰素也通过Ⅲ型干扰素介导抗病毒作用 | 第68-69页 |
| 6.3.2 sIL-6R/p28 FP通过Ⅲ型干扰素介导的抗病毒作用是MAVS依赖的 | 第69-70页 |
| 6.3.3 sIL-6R可以通过NF-κB和ISRE结合位点在转录水平调控IFN-λ1基因的表达 | 第70页 |
| 6.4 讨论 | 第70-72页 |
| 第七章 c-Fos和ATF1是IFN-λ1基因表达的重要转录调控因子 | 第72-80页 |
| 7.1 实验材料 | 第72-73页 |
| 7.1.1 细胞和病毒 | 第72页 |
| 7.1.2 质粒 | 第72-73页 |
| 7.1.3 试剂 | 第73页 |
| 7.2 实验方法 | 第73-75页 |
| 7.2.1 细胞培养与转染 | 第73页 |
| 7.2.2 质粒构建 | 第73-74页 |
| 7.2.3 总RNA的提取和逆转录 | 第74页 |
| 7.2.4 荧光定量PCR | 第74页 |
| 7.2.5 蛋白质免疫印迹(Western Blot) | 第74页 |
| 7.2.6 荧光素酶启动子实验 | 第74页 |
| 7.2.7 染色质免疫共沉淀(ChIP)实验 | 第74-75页 |
| 7.3 实验结果 | 第75-78页 |
| 7.3.1 c-Fos/ATF1上调IFN-λ1启动子活性 | 第75-76页 |
| 7.3.2 病毒感染诱导c-Fos和ATF1的转录活性 | 第76-77页 |
| 7.3.3 c-Fos和ATF1在IFN-λ1启动子上结合位置的确定 | 第77-78页 |
| 7.4 讨论 | 第78-80页 |
| 第八章 sIL-6R/p28 FP通过p38 MAPK通路调控IFN-λ1的表达 | 第80-85页 |
| 8.1 实验材料 | 第80页 |
| 8.1.1 细胞和病毒 | 第80页 |
| 8.1.2 质粒 | 第80页 |
| 8.1.3 试剂 | 第80页 |
| 8.2 实验方法 | 第80-81页 |
| 8.2.1 细胞培养与转染 | 第80-81页 |
| 8.2.2 总RNA的提取和逆转录 | 第81页 |
| 8.2.3 荧光定量PCR | 第81页 |
| 8.2.4 蛋白质免疫印迹(Western Blot) | 第81页 |
| 8.2.5 染色质免疫共沉淀(ChIP)实验 | 第81页 |
| 8.3 实验结果 | 第81-83页 |
| 8.3.1 sIL-6R/p28 FP和p38 MAPK通过ATF1和c-Fos调控IFN-λ1的表达 | 第81-82页 |
| 8.3.2 sIL-6R/p28 FP通过p38 MAPK通路促进IFN-λ1的表达 | 第82-83页 |
| 8.4 讨论 | 第83-85页 |
| 第九章 研究总结 | 第85-88页 |
| 参考文献 | 第88-99页 |
| 博士期间发表的论文 | 第99-100页 |
| 致谢 | 第100-101页 |
