摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-8页 |
符号说明 | 第12-13页 |
第一章 综述 | 第13-22页 |
1.1 鸡的脂肪沉积 | 第13-17页 |
1.1.1 脂肪的沉积过程 | 第13-14页 |
1.1.2 脂肪沉淀对肉鸡生产的影响 | 第14-15页 |
1.1.3 影响腹脂沉积的因素 | 第15-17页 |
1.2 PGC-1α基因 | 第17-20页 |
1.2.1 PGC-1α结构 | 第17-18页 |
1.2.2 PGC-1α的功能 | 第18-19页 |
1.2.3 PGC-1α与脂肪沉积 | 第19-20页 |
1.2.4 PGC-1α基因对PPARγ的调控 | 第20页 |
1.3 广西南丹瑶鸡 | 第20-21页 |
1.4 研究的目的及意义 | 第21-22页 |
第二章 广西南丹瑶鸡PGC-1α的克隆与生物信息学分析 | 第22-41页 |
2.1 试验材料 | 第22-24页 |
2.1.1 试验样品 | 第22页 |
2.1.2 菌株与载体 | 第22页 |
2.1.3 主要实验试剂 | 第22-23页 |
2.1.4 常用试剂的配制 | 第23页 |
2.1.5 实验主要仪器设备 | 第23-24页 |
2.2 试验方法 | 第24-28页 |
2.2.1 引物设计 | 第24-25页 |
2.2.2 肝脏总RNA提取方法及步骤 | 第25页 |
2.2.3 反转录成cDNA第一链 | 第25-26页 |
2.2.4 PCR扩增 | 第26-27页 |
2.2.5 目的片段的回收 | 第27页 |
2.2.6 连接载体 | 第27页 |
2.2.7 转化大肠杆菌 | 第27页 |
2.2.8 菌液PCR鉴定 | 第27-28页 |
2.2.9 生物信息学分析 | 第28页 |
2.3 结果和分析 | 第28-38页 |
2.3.1 广西南丹瑶鸡肝脏总RNA的提取 | 第28页 |
2.3.2 PGC-1α基因的PCR扩增 | 第28-29页 |
2.3.3 菌液的PCR鉴定 | 第29页 |
2.3.4 PGC-1α基因序列的生物信息学分析 | 第29-38页 |
2.4 讨论 | 第38-40页 |
2.5 小结 | 第40-41页 |
第三章 广西南丹瑶鸡PGC-1α基因646位点的多态性分析 | 第41-49页 |
3.1 材料 | 第41-42页 |
3.1.1 试验样品 | 第41页 |
3.1.2 主要实验试剂 | 第41-42页 |
3.1.3 常用试剂的配制 | 第42页 |
3.1.4 引物设计 | 第42页 |
3.1.5 主要仪器设备 | 第42页 |
3.2 方法 | 第42-45页 |
3.2.1 样品采集 | 第42页 |
3.2.2 基因组DNA提取 | 第42-43页 |
3.2.3 PCR-RFLP | 第43-44页 |
3.2.4 统计分析 | 第44-45页 |
3.3 结果与分析 | 第45-47页 |
3.3.1 鸡血基因组DNA的提取 | 第45页 |
3.3.2 PCR扩增 | 第45页 |
3.3.3 PCR-RFLP检测 | 第45-46页 |
3.3.4 统计分析 | 第46-47页 |
3.4 讨论 | 第47-48页 |
3.5 小结 | 第48-49页 |
第四章 PGC-1α和PPARγ基因在广西南丹瑶鸡PGC-1α基因646位点不同基因型中的表达 | 第49-61页 |
引言 | 第49页 |
4.1 材料 | 第49-50页 |
4.1.1 实验样品 | 第49页 |
4.1.2 实验试剂 | 第49页 |
4.1.3 实验设备 | 第49-50页 |
4.2 方法 | 第50-53页 |
4.2.1 引物的设计与合成 | 第50页 |
4.2.2 组织总RNA提取 | 第50页 |
4.2.3 反转录 | 第50-51页 |
4.2.4 qPCR反应程序和反应体系 | 第51-52页 |
4.2.5 制备标准品 | 第52-53页 |
4.2.6 数据的统计分析 | 第53页 |
4.3 结果与分析 | 第53-58页 |
4.3.1 总RNA提取 | 第53页 |
4.3.2 GAPDH、PGC-1α和PPARγ三个基因引物的扩增效率 | 第53-55页 |
4.3.3 GAPDH、PGC-1α和PPARγ三个基因的扩增曲线和熔解曲线 | 第55-56页 |
4.3.4 PGC-1α和PPARγ基因的相对定量结果 | 第56-58页 |
4.4 讨论 | 第58-60页 |
4.5 小结 | 第60-61页 |
结论 | 第61-62页 |
参考文献 | 第62-67页 |
致谢 | 第67-69页 |
攻读硕士期间发表的论文 | 第69页 |