| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 第一章 引言 | 第11-29页 |
| 1 Pt5e的概述 | 第11-13页 |
| 1.1 鱼类的母源性免疫 | 第11页 |
| 1.2 卵黄高磷蛋白的抑菌活性 | 第11-12页 |
| 1.3 抗菌肽Pt5及其突变体Pt5e | 第12-13页 |
| 2 抗菌肽 | 第13-22页 |
| 2.1 抗菌肽的概述 | 第13-14页 |
| 2.2 抗菌肽的生产方式 | 第14-15页 |
| 2.3 抗菌肽表达的异源系统 | 第15-22页 |
| 2.3.1 细菌系统 | 第16-18页 |
| 2.3.2 酵母系统 | 第18-20页 |
| 2.3.3 植物系统 | 第20-22页 |
| 3 类弹性蛋白(ELP) | 第22-27页 |
| 3.1 ELP的概述 | 第22-24页 |
| 3.2 ELP的相变机理 | 第24页 |
| 3.3 ELP标签在重组蛋白分离纯化中的应用 | 第24-27页 |
| 3.3.1 ELP标签的选择 | 第25页 |
| 3.3.2 目的蛋白的选择 | 第25-26页 |
| 3.3.3 ELP标签与目的蛋白的相对位置 | 第26页 |
| 3.3.4 ELP融合蛋白的表达 | 第26页 |
| 3.3.5 ELP标签的切除方法 | 第26-27页 |
| 4 研究目的和技术路线 | 第27-29页 |
| 4.1 研究目的 | 第27页 |
| 4.2 技术路线 | 第27-29页 |
| 第二章 抗菌肽Pt5e高表达、纯化及其对多重耐药性细菌的抑菌活性研究 | 第29-63页 |
| 1 前言 | 第29-30页 |
| 2 材料与方法 | 第30-52页 |
| 2.1 实验材料 | 第30-38页 |
| 2.1.1 实验试剂及耗材 | 第30-31页 |
| 2.1.2 溶液及培养基 | 第31-34页 |
| 2.1.3 实验仪器 | 第34-35页 |
| 2.1.4 质粒与酶 | 第35-36页 |
| 2.1.5 菌株 | 第36-37页 |
| 2.1.6 DNA测序、合成及引物合成 | 第37-38页 |
| 2.2 实验方法 | 第38-52页 |
| 2.2.1 His标签法表达纯化Pt5e | 第38-44页 |
| 2.2.2 CELP基因的低聚化 | 第44-48页 |
| 2.2.3 融合表达载体的构建 | 第48-50页 |
| 2.2.4 融合蛋白的自诱导表达 | 第50页 |
| 2.2.5 ITC法分离纯化融合蛋白 | 第50-51页 |
| 2.2.6 融合蛋白消化和Pt5e的纯化 | 第51页 |
| 2.2.7 Pt5e对MDR菌株的抑制活性测定 | 第51-52页 |
| 2.2.8 Pt5e对MDR菌株的透射电镜实验 | 第52页 |
| 3 实验结果 | 第52-60页 |
| 3.1 表达载体的构建 | 第52-53页 |
| 3.2 融合蛋白的表达 | 第53-54页 |
| 3.3 融合蛋白的分离纯化 | 第54-55页 |
| 3.4 Pt5e的分离纯化 | 第55页 |
| 3.5 CELP标签法与His标签法产量比较 | 第55-56页 |
| 3.6 抑菌活性测试 | 第56-58页 |
| 3.7 透射电镜观察 | 第58-60页 |
| 4 讨论 | 第60-63页 |
| 总结 | 第63-64页 |
| 参考文献 | 第64-73页 |
| 附录 | 第73-74页 |
| 致谢 | 第74-75页 |
| 个人简历 | 第75页 |