| 摘要 | 第3-5页 |
| ABSTRACT | 第5-6页 |
| 缩略语表 | 第7-13页 |
| 第一章 前言 | 第13-23页 |
| 1.1 概述 | 第13-14页 |
| 1.2 PA和BAP的理化性质 | 第14-16页 |
| 1.2.1 PA的理化性质 | 第14页 |
| 1.2.2 BAP的理化性质 | 第14-16页 |
| 1.3 PA和BAP的分析方法 | 第16-18页 |
| 1.3.1 PA的分析方法 | 第16-17页 |
| 1.3.1.1 聚丙烯酰胺凝胶电泳法 | 第16页 |
| 1.3.1.2 放射免疫法 | 第16页 |
| 1.3.1.3 免疫比浊法 | 第16-17页 |
| 1.3.1.4 酶联免疫吸附法 | 第17页 |
| 1.3.1.5 免疫共振散射光谱法 | 第17页 |
| 1.3.2 BAP的分析方法 | 第17-18页 |
| 1.3.2.1 化学发光免疫分析法 | 第17页 |
| 1.3.2.2 电泳法 | 第17-18页 |
| 1.3.2.3 酶联免疫吸附法 | 第18页 |
| 1.3.2.4 凝集素亲和沉淀法 | 第18页 |
| 1.3.2.5 比色法 | 第18页 |
| 1.4 免疫层析技术 | 第18-21页 |
| 1.4.1 免疫层析的概述 | 第18-19页 |
| 1.4.2 免疫层析法的分类及原理 | 第19-20页 |
| 1.4.2.1 双抗夹心免疫层析法 | 第19页 |
| 1.4.2.2 竞争抑制免疫层析法 | 第19-20页 |
| 1.4.3 免疫层析技术中常用的标记材料 | 第20-21页 |
| 1.4.3.1 胶体金 | 第20页 |
| 1.4.3.2 胶体碳 | 第20-21页 |
| 1.4.3.3 量子点 | 第21页 |
| 1.4.3.4 荧光微球 | 第21页 |
| 1.5 主要研究内容及意义 | 第21-23页 |
| 第二章 抗PA抗体的配对与评价 | 第23-29页 |
| 2.1 前言 | 第23页 |
| 2.2 材料与仪器 | 第23-24页 |
| 2.2.1 主要试剂与材料 | 第23页 |
| 2.2.2 主要仪器设备 | 第23页 |
| 2.2.3 主要试剂的配制 | 第23-24页 |
| 2.3 实验方法 | 第24-27页 |
| 2.3.1 兔血清的纯化 | 第24-25页 |
| 2.3.2 抗PA多克隆抗体浓度的测定 | 第25页 |
| 2.3.3 间接ELISA法测定抗PA多克隆抗体的效价 | 第25-26页 |
| 2.3.4 SDS-PAGE电泳法测定抗PA多克隆抗体的纯度 | 第26页 |
| 2.3.5 抗体的筛选配对 | 第26-27页 |
| 2.4 结果与分析 | 第27-28页 |
| 2.4.1 抗PA多克隆抗体浓度的计算 | 第27页 |
| 2.4.2 测定抗PA多克隆抗体的效价 | 第27页 |
| 2.4.3 抗PA多克隆抗体的纯度 | 第27-28页 |
| 2.4.4 抗PA抗体的筛选配对 | 第28页 |
| 2.5 小结 | 第28-29页 |
| 第三章 PA荧光免疫层析试纸条快速定量检测方法的建立 | 第29-48页 |
| 3.1 前言 | 第29-30页 |
| 3.2 材料与仪器 | 第30-31页 |
| 3.2.1 主要试剂与材料 | 第30页 |
| 3.2.2 主要仪器设备 | 第30-31页 |
| 3.3 实验方法 | 第31-36页 |
| 3.3.1 荧光微球-抗体的标记及表征 | 第31-32页 |
| 3.3.1.1 荧光微球标记抗体 | 第31页 |
| 3.3.1.2 荧光微球-抗体标记物的表征 | 第31-32页 |
| 3.3.2 最佳标记条件的优化 | 第32-33页 |
| 3.3.2.1 EDC和MS231492抗体添加顺序的优化 | 第32页 |
| 3.3.2.2 标记pH的优化 | 第32页 |
| 3.3.2.3 标记量的优化 | 第32-33页 |
| 3.3.2.4 复溶液的优化 | 第33页 |
| 3.3.3 PA试纸条的制备和检测 | 第33-34页 |
| 3.3.3.1 试纸条的制备 | 第33-34页 |
| 3.3.3.2 PA试纸条的检测原理 | 第34页 |
| 3.3.4 NC膜最佳条件的优化 | 第34-35页 |
| 3.3.4.1 NC膜上T、C线浓度的优化 | 第34-35页 |
| 3.3.4.2 T、C线上抗体保护剂的优化 | 第35页 |
| 3.3.5 PA免疫层析试纸条的免疫动力学分析 | 第35页 |
| 3.3.6 PA免疫层析试纸条的性能评价 | 第35-36页 |
| 3.3.6.1 标准曲线的建立 | 第35页 |
| 3.3.6.2 特异性的评价 | 第35页 |
| 3.3.6.3 精密度和准确度的评价 | 第35-36页 |
| 3.3.6.4 PA免疫层析方法与免疫比浊法的比较 | 第36页 |
| 3.4 结果与分析 | 第36-46页 |
| 3.4.1 荧光微球-抗体标记物的表征 | 第36-38页 |
| 3.4.1.1 标记物的荧光特性 | 第36-37页 |
| 3.4.1.2 荧光微球-抗体标记物的紫外吸收 | 第37-38页 |
| 3.4.2 EDC和MS231492抗体添加顺序的优化 | 第38页 |
| 3.4.3 标记pH的优化 | 第38-39页 |
| 3.4.4 标记量的优化 | 第39-40页 |
| 3.4.5 复溶液的优化 | 第40页 |
| 3.4.6 NC膜上T、C线浓度的优化 | 第40-41页 |
| 3.4.7 T、C线上抗体保护剂的优化 | 第41-42页 |
| 3.4.8 PA免疫层析试纸条的免疫动力学分析 | 第42-43页 |
| 3.4.9 PA免疫层析试纸条的灵敏度及线性范围 | 第43-44页 |
| 3.4.10 特异性的评价 | 第44-45页 |
| 3.4.11 准确度的评价 | 第45页 |
| 3.4.12 PA免疫层析方法与免疫比浊法的比较 | 第45-46页 |
| 3.5 小结 | 第46-48页 |
| 第四章 BAP荧光免疫层析试纸条快速定量检测方法的建立 | 第48-65页 |
| 4.1 前言 | 第48页 |
| 4.2 材料与仪器 | 第48-49页 |
| 4.2.1 主要试剂材料 | 第48-49页 |
| 4.2.2 仪器设备 | 第49页 |
| 4.2.3 试剂的配制 | 第49页 |
| 4.3 实验方法 | 第49-54页 |
| 4.3.1 抗体的选择 | 第49-50页 |
| 4.3.2 荧光微球标记抗体及表征 | 第50页 |
| 4.3.2.1 荧光微球标记抗体 | 第50页 |
| 4.3.2.2 荧光微球-抗体标记物的表征 | 第50页 |
| 4.3.3 优化荧光微球标记抗体的实验参数 | 第50-51页 |
| 4.3.3.1 标记pH的优化 | 第50页 |
| 4.3.3.2 标记量的优化 | 第50-51页 |
| 4.3.3.3 标记物添加量的优化 | 第51页 |
| 4.3.4 BAP免疫层析试纸条的制备和检测 | 第51-52页 |
| 4.3.4.1 免疫层析试纸条的制备 | 第51-52页 |
| 4.3.4.2 试纸条的检测原理 | 第52页 |
| 4.3.5 BAP试纸条实验参数的优化 | 第52-53页 |
| 4.3.5.1 T、C线包被浓度的优化 | 第52页 |
| 4.3.5.2 样本稀释液pH的选择 | 第52-53页 |
| 4.3.5.3 BAP免疫层析试纸条的免疫动力学分析 | 第53页 |
| 4.3.6 BAP试纸条的性能评价 | 第53-54页 |
| 4.3.6.1 建立竞争抑制曲线 | 第53页 |
| 4.3.6.2 特异性验证 | 第53页 |
| 4.3.6.3 准确度和稳定性评价 | 第53页 |
| 4.3.6.4 BAP免疫层析方法与化学发光法的比较 | 第53-54页 |
| 4.4 结果与分析 | 第54-64页 |
| 4.4.1 抗体的选择 | 第54-55页 |
| 4.4.2 荧光微球标记抗体的表征 | 第55-56页 |
| 4.4.3 标记pH的优化 | 第56-57页 |
| 4.4.4 标记量的优化 | 第57页 |
| 4.4.5 标记物添加量的优化 | 第57-58页 |
| 4.4.6 T、C线包被浓度的优化 | 第58-59页 |
| 4.4.7 样本稀释液pH的选择 | 第59-60页 |
| 4.4.8 BAP免疫层析试纸条的免疫动力学分析 | 第60-61页 |
| 4.4.9 BAP免疫层析试纸条的灵敏度及线性范围 | 第61-62页 |
| 4.4.10 特异性的评价 | 第62页 |
| 4.4.11 准确度和稳定性的评价 | 第62-63页 |
| 4.4.12 BAP免疫层析方法与化学发光法的比较 | 第63-64页 |
| 4.5 小结 | 第64-65页 |
| 第五章 结论与展望 | 第65-68页 |
| 5.1 结论 | 第65-66页 |
| 5.1.1 抗PA抗体的配对和评价 | 第65页 |
| 5.1.2 PA荧光免疫层析试纸条快速定量检测方法的建立 | 第65-66页 |
| 5.1.3 BAP荧光免疫层析试纸条快速定量检测方法的建立 | 第66页 |
| 5.2 展望 | 第66-68页 |
| 致谢 | 第68-69页 |
| 参考文献 | 第69-76页 |
| 附录1 试剂材料 | 第76-78页 |
| 附录2 仪器设备 | 第78-79页 |
| 个人介绍 | 第79-80页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第80页 |
